酿酒微生物计数方法探讨.pdf

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1、广西农业科学2010，41(8)：822—823GuangxiAgriculturalSciences酿酒微生物计数方法探讨景晓卫，唐玉明，任道群，姚万春(四川省农业科学院水稻高粱研究所，四川泸州646100)摘要：采用琼脂倾注法接种不同菌株，并对平板菌落分别进行人工计数与自动计数，对两种方法的计数结果进行比较分析，以验证全自动菌落计数仪的菌落识别功能和计数准确性。结果表明，全自动菌落计数仪对于菌落较小的细菌类能准确地快速计数，重现性好，最大误差率为3．95％；但对于菌落形态较大的霉菌类、酵母类等计数准确率低，最大误差率分别为42．

2、86％和35．50％。因此，在实际应用中应以自动计数为主，通过合理设置菌落直径、颜色、亮度、背景偏差等参数以方便自动计数，同时采用人工计数对结果进行修正，以提高计数准确率。关键词：微生物；平板菌落计数；人工计数；自动计数中图分类号：TS261．1文献标识码：A文章编号：1002—8161(2010)08-0822-021一■●·1●●J’1●●●l●■'DiscUssionontlleCOUntlngmethOnOlwine-matangmicrODesJINGXiao-wei，TANGYu-ming，RENDao—qun，YAOW

3、an-chun(RiceandSorghumResearchInstitute，SichuanAcademyofAgriculturalSciences，Luzhou，Sichuan646100，China)Abstract：Inordertoverifythedetectionfunctionandaccuracyofautomaticmicrobialcolonycounter,methodsofautomaticandartificialcolonycountingwerecomparedandanalyzedusingcuh

4、umofdifferentstrains．Theresultsshowedthatautomaticcolonycountingwasaccurateandquickforthebacteriawithsmallercolonies．andtheresultswerehighlyreproducible．ThemaximumeErorratewasfoundtobe3．95％，whileitshowedlowaccuracyforcountingbiggercolonies，suchasyeastsandmoulds，insucha

5、caseitshowed42．86and35．5％maximumeITorrate，respectively．ItWassuggestedthatautomaticcountingmethodshouldabeusedinthepracticalapplicationbysettingupparametersreasonably，such鹊diameter，color,brightnessandbackgrounddeviationofcolonies．Meanwhile，automaticcountingmethodWasalso

6、usedtomodifiedtheresultstoimproveitsaccuracy．Keywords：microbe；plateculturecounting；artificialcounting；automaticcounting白酒酿造过程实际上是微生物富集、代谢的过程，因此，要提高白酒的优质品率，必须从微生物开始进行研究，而微生物计数一直是酿酒微生物研究中一个重要基础指标[1】。酿酒微生物计数主要采用平板菌落计数法．因平板菌落计数法通常做梯度稀释，所以计数的线性范围大，重复性、平行性好，是一种经典的计数方法。目前，平板菌

7、落计数主要靠人工主观识别和判断来进行．由于人工计数易受主观影响，工作量大、重现性差、效率低，因此亟待改进。本文将全自动菌落分析仪的菌落计数结果与人工计数结果进行比较，以验证其菌落识别功能和计数准确性，为实际应用全自动菌落分析仪提供指导。1材料与方法1．1供试材料供试菌株分别为巨大芽孢杆菌1．223。从曲药中选育的酵母S2．10、霉菌C一24。以及10种不同配方的人工窖泥中的细菌。培养基配方采用牛肉膏蛋白胨培养基、PDA培养基。试验仪器为全自动菌落分析仪。1．2试验方法1．2．1菌落识别试验将巨大芽孢杆菌1．223、酵母S2．10和霉

8、菌C一24分别用无菌水制成含菌量适宜的菌悬液．并采用琼脂倾注法接种，倒置于32℃培养箱中培养48h。然后对各平板菌落分别进行人工计数和自动计数，统计两种计数结果的误差[2】。1．2．2计数重现性试验将巨大芽孢杆菌1．223用无菌水制成