EGCG对人食管癌ECA109细胞增殖凋亡及Survivin和VEGF mRNA表达影响的研究.pdf

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1、1．11．21．31．41．523456目录EGCG对人食管癌ECAl09细胞增殖凋亡及Survivin和VEGFmRNA表达影响的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7日IJ舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯／材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1O结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30结论⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37英汉缩略词对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43VEGF、COX．2在食管癌中的研究进展(综述)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯44致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯55泸州医学院硕士学位论文EGCG对人食管癌ECAl09细胞增殖凋亡及Survivin和VEGFmRNA表达影Ⅱ向的研究＼㈣燃摘要目的：研究不同浓度的表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallaocatechin-3一gallate，EGCG)对体外培养的食管癌ECAl09细胞增殖、凋亡及Survivin、VEGFmRNA表达的影响，初步探讨EGCG对

3、食管癌ECAl09细胞的抑制作用及其机制。方法：1．采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度(40、80、120pg／m1)的EGCG分别作用于食管癌ECAl09细胞24h，48h，72h后，用酶标仪检测各组细胞的OD值，计算各浓度EGCG在不同时间对食管癌ECAl09细胞的增殖抑制率；2．不同浓度(40、80、1201xg／m1)的EGCG作用于食管癌ECAl09细胞48h后，采用AnnexinV-FITC和PI双染，通过流式细胞仪(FlowCytometry，FCM)检测各组细胞的凋亡率；3．不同浓度(40、80、120}tg／m1)的EGCG作用于食管癌

4、ECAl09细胞48h后，采用逆转录．聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测细胞Survivin和VEGFmRNA的表达情况。结果：1．倒置相差显微镜下观察可见，随着EGCG干预的浓度增加，食管癌ECAl09细胞产生细胞体积减小，固缩变圆，细胞染色质凝集，细胞内出现空泡等一系列细胞形态改变；2．不同浓度EGCG(401xg／m1、801xg／ml、120}tg／m1)作用食管癌ECAl09细胞24h后，细胞的增殖抑制率相对于对照组分别为14．24+0．72，21．60士1．03，29．56+1．27，各组间差异具有统计学意义(P

5、胞增殖抑制率分别为39．17+1．50，43．44+1．66，48．58士1．73，各组间差异具有统计学意义(P

6、120“g／m1)作用下，食管癌ECAl09细胞早期凋亡率、总凋亡率分别为0．0667士．03055、O．5200士．09539；4．8367士0．73146、10．3200士0．95252；12．2533士1．22696、24．1267士1．44057；23．5100士1．76847、34．0967土1．82878，实验组早期、总凋亡率均明显高于对照组，且随EGCG浓度的增加，早期凋亡和总凋亡细胞的比例都逐渐增加。实验组与对照组相比，且实验组两两之间比较P<0．05；4．RT-PCR检测，在不同浓度EGCG(099／ml、40肛g／ml、8099／ml、120

7、1．tg／m1)作用下，食管癌ECAl09细胞SurvivinmRNA的表达量分别为O．5419-土0．01873、0．4844+0．01478、O．3330士0．00685、O．2155士0．00304，以对照组SurvivinmRNA的表达水平最高，并随EGCG浓度的增高，食管癌ECAl09细胞SurvivinmRNA表达量逐渐降低。食管癌ECAl09细胞VEGFmRNA的表达量分别为1．0747士0．03547、O．9312+0．03899、O．5215土0．02270、0．3846+0．01732，以对照组VEGFmRNA的表达量最高，并随EGCG浓度的

8、增高，食管癌ECAl09