生物化学实验基本知识ppt课件.ppt

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1、实验一、生物化学实验规则及基本知识1一、实验基本知识与操作规则二、实验目的三、实验室规则四、实验记录与实验报告五、实验成绩评分办法2量器的认识和使用一、移液管的使用移液管是一种量出式仪器，只用来测量它所放出溶液的体积。它是一根中间有一膨大部分的细长玻璃管。其下端为尖嘴状，上端管颈处刻有一条标线，是所移取的准确体积的标志。常用的移液管有5，10，25，和50mL等规格。通常又把具有刻度的直形玻璃管称为吸量管。常用的吸量管有1，2，5，和10mL等规格。移液管和吸量管所移取的体积通常可准确到0.01mL。一、实验基本知识与操作规则3量器的认识和使用移液管的使用方法移取溶液时，用右手的

2、大拇指和小指捏着移液管颈的上方，将其末端插入溶液中，左手拿洗耳球，先把球中空气压出，再将球的尖嘴接在移液管上口，慢慢松开压扁的洗耳球使溶液吸入管内。当液面升高到刻线以上时，移去洗耳球，立即用右手食指堵住上口。将移液管提出液面，使其保持垂直，同时末端靠在容器的内壁上，为此可使容器略倾斜。然后略为放松食指，并轻轻捻动管身，使液面缓慢下降，当溶液的弯月面下沿恰与刻线相切时，立即用食指压紧上口，使溶液不再流出。将移液管取出并插入承接容器中。为保持其垂直并使末端靠在容器内壁，可使承接容器略倾斜。松开食指，让管内溶液自然地全部沿容器壁流下。全部溶液流完后需等15s后再拿出移液管，以便使附着在

3、管壁的部分溶液得以流出。如果移液管未标明“吹”字，则残留在管尖末端内的溶液不可吹出，因为移液管所标定的量出容积中并未包括这部分残留溶液。45量器的认识和使用移液管的洗涤使用移液管前，应先用铬酸洗液润洗，以除去管内壁的油污。然后用自来水冲洗残留的洗液，再用蒸馏水洗净。洗净后的移液管内壁应不挂水珠。移取溶液前，应先用滤纸将移液管末端内外的水吸干，然后用欲移取的溶液涮洗管壁2至3次，以确保所移取溶液的浓度不变。6二、微量加样器的使用微量加样器又称微量移液器、微量进样器。其下端为可装卸、可更换的尖管形移液嘴（吸头），上方是控制采样的推进按钮。有固定式和可调式两种类型，规格有µl级、ml级

4、。随着生物技术的发展，微量移液器已成为生物化学实验中的重要工具。这类移液器有准确、可连续操作和方便等特点。量器的认识和使用7工作原理微量加样器利用排代原理由活塞的定程运动形成负压吸入定量的液体，其吸液量由活塞在活塞套内移动的距离来确定，再按下按钮使活塞向下移动，排出活塞腔内的气体而将吸头内的液体排出。81.选择在移液范围内的加样器，若为可调式则先将容量调节到所需的容量上。2.将吸头套在加样器的下端，轻轻转动后牢固地套上，确保密封。3.正式使用前需连续按动数次（不吸液体），以保持腔内外气压一致。4.用手垂直握住加样器，拇指将按钮压至第一停点（第一档位），并将吸头浸入到液面下1～3m

5、m，再缓慢地放松按钮使之复位，等待1～2s后从液体中取出时拖靠掉吸头外部残液于被取出的容器内壁中。注意避免吸头与其他任何东西碰撞。5.将吸头移到加样容器内壁上，轻轻地将按钮压至第一停点将液体排出，等待1～2s，再把按钮压至第二停点（第二档位），排尽全部液体后，吸头应沿容器壁向上滑动取出，此时拖靠吸头内部残液于加样容器内壁中。再放松按钮使之复位，卸下吸头，完成一次操作过程。操作方法9量器的认识和使用微量移液器的使用注意事项⑴吸取液体时，只推至第1档，释放液体时，推至第1档后停1～2秒后推至第2档。⑵使用完之后，一定要把移液器调回最大量程，以免压缩弹簧导致弹簧不能回复。⑶移液器必须卸

6、掉枪头后才能放到移液器架上。10常用玻璃仪器的洗涤与干燥1.初用玻璃仪器的清洗新购买的玻璃仪器表面常附着有碱性物质，可先用洗涤灵稀释液，肥皂水或去污粉等洗刷，再用自来水洗净，然后浸泡在1%-2%盐酸溶液中过夜，再用自来水冲洗，最后用蒸馏水冲洗3次，80℃烤干备用。11常用玻璃仪器的洗涤与干燥2.使用过的玻璃仪器的清洗(1)一般玻璃仪器如试管，烧杯，锥形瓶等，先用自来水洗刷去净污物，再用毛刷沾取洗衣粉，洗涤灵稀释液或去污粉刷洗器皿内外壁，自来水多次冲洗去除洗涤剂，并洗至容器内壁不挂水珠，最后用蒸馏水洗3次，烤干或倒置控干备用。(2)量器如吸量管，量瓶等，使用后立即用自来水冲洗，直至

7、不挂水珠，再用蒸馏水冲洗3次，风干备用。若冲洗后的器皿仍挂水珠，则将其晾干后，泡在铬酸洗液中4-6小时，再用自来水冲洗，最后用蒸馏水洗3次控干。12一、722型分光光度计的使用①通电预热约20分钟，打开比色皿暗厢盖。②选择波长。③清洗比色皿（拿粗糙面，一次拿一个……）④测装试液：约2/3–4/5。⑤擦净比色皿外部；粗糙面无明“水”，光面无水迹，无指纹，无纸纤维。⑥调零测试操作及读数正确。⑦测完清洗比色皿，放回原处。⑧仪器恢复原样。常用仪器的操作要点13二、低速离心机的使用①检查离