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1、关于血小板衍生生长因子受体在膀胱癌中的表达意义【关键词】膀胱肿瘤关键词:膀胱肿瘤;受体,血小板源生长因了;新生血管化,病理性;免疫组织化学摘要:目的探讨血小板衍生生长因了受体(PDGFR)表达与膀胱移行上皮细胞癌发生、生物学行为及预后的关系.方法采用免疫组织化学技术一一两步法检测68例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱组织PDGFR表达及膀胱癌组织屮微血管密度(MVD).结果PDGFR阳性染色分布于癌细胞、间质、血管及炎症细胞的胞质及胞膜•膀胱癌组织PDGFR阳性率为83.8%,明显高于正常膀胱组织(30.0%,PKeywords:bladdernooplasms;receptors,pl
2、atelet-derviedgrowthfactor;neovascularization,pathologic;im-munohistoehemistryAbstract:AIMTostudytherelationshipbetweenexpres-sionofplatelet-derivedgrowthfactorreceptor(PDGER)andthegonesis,biologicalbehaviorandprognosisofbladdertransitionalcellcarcinoma・METHODSExpressionofPDGFRandmicrovesseldens
3、ity(MVD)wereinvestigatedin68casesoftransitionalcellcareinomainbladderandlOcasesofnormalbladdertissueswithimmunohistochemicaltechniqueaccordingtotheproceduresofclassicaltwo-steps.RESULTSItwasrevealedthatthePDGFRpositivestainingrateintumortissues(83.8%,57/68)wassignificantlyhigher(Po引言血小板衍生生长因了(PD
4、GF)是细胞生存微环境屮的重要一员[1-3]•研究表明,其受体(PDGFR)表达失调可导致细胞增殖及恶变[4-7].PDGFR在膀胱肿瘤表达的研究较少且关系尚未明确.我们采用免疫组织化学技术一一两步法,在检测膀胱移行上皮细胞癌组织屮PDGFR表达的同时用VWF一抗检测肿瘤的微血管密度(MVD),探讨PDGFR表达与膀胱移行细胞癌发生、生物学行为及预后的关系.1材料和方法1.1材料1988/1993我院经病理证实的膀胱移行细胞癌石蜡包埋标木68例,均有完整的5a随访资料.其中男49例,女19例,年龄25〜82(平均60.2)岁.临床病理与分期按UICC标准:Tis〜T136例,T2〜T4
5、32例.按WHO肿瘤分级:I级16例,II级29例;III级23例;复发、死亡43例(死亡26例,17例复发存活)•另取10例正常膀胱组织作对照•常规切片厚度4um.兔抗人PDGFR多克隆抗体由SantaCruz公司提供,工作浓度1:100.鼠抗人VWFmAb[t
6、Dako公司提供,丁•作浓度1:200.抗兔、鼠二抗(DakoEnvisionTM+system,IIRPR)由Dako公司捉供・1.2方法用免疫组织化学两步法.作4uni厚连续组织切片4张,分别做PDGFR,VWF免疫组化,空白对照和HE染色.常规脱蜡至水,30mL-L-lH202封ffl30min,lg•L-l胰蛋白酶消
7、化30min,滴加一抗4°C过夜,37°C孵育lh,PBS液震洗后滴加二抗并37°C孵育30min,DAB显色,苏木素复染、脱水、二甲苯透明,封固阅片.用已知阳性的肾细胞癌切片作阳性对照,丿IJPBS液代替一抗做空白对照.PDGFR表达的判定:细胞着黄色或棕黄色呈颗粒或线网状为阳性细胞•在X400倍视野下每张切片随机观察10个视野,将切片屮平均阳性细胞比例及染色深浅分别记0〜:3分.切片屮无阳性细胞为0分,阳性细胞占总细胞数50%记3分;染色深度以多数细胞为准,无阳性细胞记0分,显色为黄色记1分,显色棕黄色记2分,显色棕褐色记3分;再按这两项指标的总积分将结果分成4级:0分为-,1〜2
8、分为+,3~4分为,5~6分为,其屮,为强阳性表达.微血管密度的计数:Weidner法[8]在低倍镜下找到肿瘤组织的微血管区(呈阳性染色的内皮细胞),再在高倍镜(20X10)观察单位面积癌组织的微血管数量,以5个高倍视野微血管数的均数表示.统计学处理:结果采用x2检验,t检验及Spear-man秩相关分析.2结果2.1PDGFR阳性染色分布及染色结果细胞呈棕黄色颗粒状或线网状阳性染色分布于胞质、胞膜(Figi)•膀胱癌组屮癌细胞、血管平滑肌、间