不同致病力H9N2亚型禽流感病毒全基因序列分析及一株病毒感染SPF鸡后部分器官主要细胞因子含量变化测定.pdf

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1、万方数据CompleteSequenceAnalysisofDmrentVirulentH9N2Subtype懋andCytokineLevelChangesinD迁ferentOrgansPostVirUSInfectionThesissubmittedtoQ'ngdaoAgt／culturalUniversityInFulffilmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofAgronomyGuoXuejm(CollegeofAnimalScienceandVeterinarymedicine)Supervisor：Y‘Y

2、anboervasor：mYaD0YQingdao．ChinaJune,2013万方数据独创性声明ffIllJlIlllllflllllllllllIfllIlllllY2663568本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得青岛农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：齑喾垒时间：汐侈年多月／o日关于论文使用授权的说明本人完全了解

3、青岛农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意青岛农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名：前学金时间：凇侈年多月／o日导师签名：尹鲻时间：少哼年乡月p日万方数据膏岛农业大学硕士学位论文摘要不同致病力H9N2亚型禽流感病毒全基因序列分析及一株病毒感染SPF鸡后部分器官主要细胞因子含量变化测定摘要试验一18株不同致病力H9N2亚型禽流感病毒全基因序列分析从300余株H9N2亚型禽流感毒分离株中选取了分离自不同时间

4、、不同地区、致死鸡胚时间有差异的18株进行了全基因组测序，并对基因序列进行了遗传进化和氨基酸位点的分析。结果显示，18株流感病毒各个基因片段均具有较高的同源性，并且分离自相近时间、同一地区的毒株自成单独的分支。表面蛋白基因相对比较保守，均属于BJ／1／94分支：内部蛋白基因与表面蛋白相比，表现出多样性的特点，包括BJ／1／94分支、G1／97分支、F／98分支和Y439／97分支。对关键氨基酸位点分析发现，2008年后的14株病毒HA蛋白313位点处出现新的糖基化位点，其中11株能在72h内致鸡胚死亡，大部分毒株受体结合位点出现V198A／T／E、02341．突变

5、：2008年之后分离株NA蛋白的264位均有新糖基化位，最出现：并且2009年以后所有分离株M2蛋白均出现$31N金刚烷胺抗性变异。研究表明，HA受体结合位点的变异以及HA和NA新的糖基化住点的出现可能导致近期H9N2病毒致病力的改变。试验二H9N2亚型禽流感病毒感染鸡后细胞因子含量变化测定为了研究H9N2亚型AlV引起的不同的脏器内细胞因子的含量的变化规律，本试验对6周龄SPF鸡静脉注射H9N2亚型AIV，攻毒后第3d、5d、7d、10d剖杀，采集肺脏、肾脏、肠道等组织。测定其中IL．2、lL-6、lL-8、IFN-Ct、IFN-lB的含量。结果发现本研究中攻毒

6、组肾脏、肺脏和肠道中细胞因子的含量在接种病毒后的第3d显著低于对照组，之后开始升高，第7d达到峰值。研究表明，H9N2亚型禽流感感染鸡后，细胞因子能在肾脏、肺脏和肠道中与病毒发生作用，细胞因子在肾脏和肺脏中抗病毒能力较强。关键词：HgN2；禽流感；遗传分析；全基因序列；细胞因子万方数据青岛农业大学硕士学位论文AbstractCompleteSequenceAnalysisofDifferentVirulentH9N2SubtypeAIVandCytokineLevelChangesinDifferentOrgansPostVirusInfectionAbstrac

7、tExperimem1CompleteSequenceAnalysisof18differentvirulentH9N2SubtypeAvianInfluenzaViruses(AⅣ)Inthisexperiment,18H9N2subtypeAIVwhichwereisolatedfromdifferentlocationsatdifferenttime，showeddiverselethalitytochickembryo．ThroughWedidwholegenomeamplificationandsequencing,andanalyzedgenetice

8、volut