砷暴露下原生动物柯立斯四膜虫(Tetrahymena corlissi)的毒理学机制研究.pdf

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2、錢《‘换矜＇’六年六巧：雜谦：，心嗎＇．－画禱馨－雜藝；碱訟觀獅蠢磁盧論臟ＩＩＩ中图分类号：Q959单位代码：10231学号：2013301032硕士学位论文砷暴露下原生动物柯立斯四膜虫（Tetrahymenacorlissi）的毒理学机制研究硕士研究生：韦薇导师：陈瑛教授学科专业：动物学答辩日期：2016年6月授予学位单位：哈尔滨师范大学AThesisSubmittedfortheDegreeofMasterTheresearchabouttoxicologymechanismofarsenicinaprotozoan，Tetrahymena

3、corlissiCandidate：WeiWeiSupervisor：ChenYingProfessorSpeciality：ZoologyDateofDefence：June,2016Degree-Conferring-Institution：HarbinNormalUniversity目录目录摘要……………………………………………………………………………………ⅠAbstract…………………………………………………………………………………Ⅱ第一章绪论……………………………………………………………………………11.1砷毒理学研究进展……………………………………

4、……………………………11.1.1砷简介…………………………………………………………………………11.1.2砷的毒性效应…………………………………………………………………11.1.3砷毒理学研究进展……………………………………………………………21.2四膜虫在毒理学研究中的地位与作用……………………………………………31.2.1四膜虫简介……………………………………………………………………31.2.2四膜虫研究现状………………………………………………………………41.2.3四膜虫在毒理学研究中的应用………………………………………………51.3本课题研究的目的与意

5、义…………………………………………………………61.4研究方案……………………………………………………………………………8第二章材料与方法……………………………………………………………………92.1实验材料及培养……………………………………………………………………92.2四膜虫生长曲线的测定…………………………………………………………102.3砷暴露下四膜虫24hEC50的测定………………………………………………102.3.1实验方法………………………………………………………………………112.3.1.1砷暴露浓度梯度的确定…………………………………………………

6、…112.3.1.2砷暴露实验过程……………………………………………………………112.3.2数据处理………………………………………………………………………122.4砷暴露下T.corlissiArsM基因的表达分析………………………………………122.4.1T.corlissi中ArsM基因的鉴定………………………………………………122.4.2T.corlissi总RNA提取和cDNA合成………………………………………122.4.3RT-PCR………………………………………………………………………132.5ArsM基因T.corlissi敲除株的构建…………

7、……………………………………132.5.1敲除载体的构建………………………………………………………………132.5.2细胞的转化、筛选和鉴定……………………………………………………142.6砷暴露下四膜虫细胞内的砷形态分析……………………………………………15哈尔滨师范大学硕士学位论文2.6.1砷暴露处理和样品制备………………………………………………………152.6.2HPLC-ICP-MS分析砷形态…………………………………………………15第三章实验结果与分析………………………………………………………………163.1T.corlissi与T.pyriformi

8、s两种四膜虫生长曲线的分