SIRT1在胃癌组织中的表达及其机制研究.pdf

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1、分类号；Ｒ３２２；１０４４０单位代码密级：公开学号：２０１２１１００５⑥浩透掌巧硕女＃後化戈ＳＩＲＴ１在胃癌组织中的表达及其机制研究ＳＩＲＴ１ｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｉｎｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｔｉｓｓｕｅ研祝生；安晓静指导教师：余昌謀教授申请学位口类级别：医学硕ｚｂ学科、专业名称；人体解剖与姐织厮胎学所在院（系）；基础医学院——二０二一入学日期：日论文完成日期年九月：二０五年

2、互月十日：１０４４０分类号：民３２２单位代码密级：公开学号：２０１２１１００５戀镇透掌殘巧女《像裕戈ＳＩＲＴ１在胃癌组织中的表达及其机制研究ＳＩＲＴ１ｅｎｅｅｘｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｉｎｇｐｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｔｉｓｓｕｅ研究生：安晓静指导教师：金昌珠教授申请学位口类级别：医学硕±学科、专业名称：人体解剖与组织胚胎学所在院：基石出医学院（系）——二一日论文完成日期入学日期：二〇年九月：二０

3、五年兰月十曰原创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得滨州医学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本声明的法律责任由本人承担。。研究生签名；时间：年ｙ月３日Ｓ礙ｉ｜｜关于论文版权使用授权的说明本人完全了解滨州医学院有关保留，、使用学位论文的规定艮Ｐ；学校有权保留送交论文的

4、复印件和电子材料，允许论文被查阅和借阅；本人授权滨州医学院可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后应遵守此协议）研究生签名廠＾导师签名：时间；辟Ｘ月如日滨州医学院硕＋学位论义目录中文摘要１Ａｂｓｔｒａｃｔ３缩略词表６前胃８ＩＥ义１０一第部分ＳＩＲＴ１在胃癌组织中的表达及临床意义１０１．材料与方法１０２．１结果５３１７．職２０参考文献第二部分ＳＩＲＴ１及其突变体

5、Ｔ２００Ｉ、Ｅ４２０Ｋ真核表达载体的构建及鉴定２３１．材料和方法巧２．２９结果３．職３１３４参考ｉ；：献第Ｈ部分ＳＩＲＴ１基因及其突变体对２９３Ｔ细胞増殖及细胞周期的影响３６１．６材料与方法３４２．结果３３．ｉ４７嫌５０参考文献全文总结巧文献综述巧敬谢６２硕±期间发表论文情况６３滨州医学院硕±学位论义中文摘要目的：１１－检测０例胃癌组织中ＳＩＲＴ１、ｐｃａｔｅｎｉｎ的表达水平并探讨其与胃癌临床病理参数的相关性。通过克隆別ＲＴ１基因的全长ｃＤ

6、ＮＡ构建含有ＳＩＲＴ１及其突变Ｔ４２０Ｋ一体２００Ｉ和Ｅ基因的重组真核表达载体，从而进步研究在胃癌发生发展过程中ＳＩＲＴ１及其突变体所发挥的生物学功能。方法：收集１０１例滨州医学院附属医院手术切除的胃癌组织，制作石蜡标本，通过免疫组织化学染色检测Ｓ－ｃａｔｅｎｉｎＩＲＴ１、ｐ的表达并分析其与肿瘤临床病理特征的－ＰＣＲ实验方法扩增Ｓ相关性。民ＴＩＲＴ１基因的全长ｃＤＮＡ，其扩增产物通过双酶切被克隆至ｐｃＤＮＡ３．１（＋）真核表达载体中，从而使ＳＩＲＴ１基因表达增加。同时采用定点突变的方法构建ＳＩＲＴ１基因的突变体Ｔ２０

7、０Ｉ和Ｅ４２０Ｋ，进而获得其真核ｃＤ３＋－Ｔ２ＩｃＤＮＡ３－表达载体ｐ．＋Ｅ４２。ＮＡ．１００和ｐ１０Ｋ重组质粒通过酶切和ＤＮＡ（）（）测序比对得Ｗ鉴定ｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎ实验从蛋白水平上证实重组真核表，同时采用Ｗｇ达载体构建成功。制备感受态细胞、做质粒转化并通过质粒抽提获取足量的－＋－－ＩｐｃＤＮＡ３．１＋，ｐｃＤＮＡ３．１＋ＳＲＴＫｃＤＮＡ３．１（Ｔ２００ＫｃＤＮＡ３．１＋Ｅ４２０Ｋ（）（）ｐ）ｐ（）２９３Ｔ真核表达载体，，然后将其通过脂质体转染的方法转染到细胞中分别采用ＭＴＴ、流式细胞术的方法检测无ＤＮＡ转

8、染的空白对照（空白组）、空载体ｃ３ＤＮＡ＋－ＷＴｐＤＮＡ．１＋空载姐）、重组载体ｐｃ３．１ＳＴＲＴ１组）、（