胃癌中microrna-1228的表达及其功能机制研究

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1、浙江大学博士学位论文胃癌中microRNA--1228*的表达及其功能机制研究姓名：贾立涛申请学位级别：博士专业：内科学指导教师：蔡建庭20120601浙江大学博士学位论文中文摘要胃癌中micr0RNA．1228毋的表达及其功能机制研究浙江大学医学院博士研究生导师内科学贾立涛蔡建庭教授中文摘要目的：miIⅢA是一类内源性的长度约20．23nt的单链小RNA，通过介导靶基因的翻译抑制或降解发挥作用．差异表达milⅢA在肿瘤的发生发展中起重要作用．世界范围内胃癌的发病率排在肿瘤中第四位，在肿瘤相关死因中排在第二位．虽然胃癌的治疗手段已经取得很大进步，但是

2、预后仍然没有明显改善．本研究的目的是观察miR-1228宰在胃癌中的作用并探讨其机制．方法：采用实时定量PcR检测50例胃癌及癌旁组织的miR．1228幸表达，并进一步分析miR．1228幸与临床病理特征之间的相关性。为了评价miR．1228幸在胃癌中的作用，建立了稳定过表达miR．1228}的细胞系，并观察miR．1228·对裸鼠皮下移植瘤的形成及生长状况的影响。构建miR-1228木启动子区荧光报告基因质粒pGL3．1228·．promoter，转染胃癌细胞，加入n师吨干预，检测荧光变化情况。进一步将c．1沁l表达质粒和pGL3．1228·-pr

3、omoter共转染，观察报告基因的转录活性。采用报告基因检测miR．1228宰稳转细胞株的NF．1(B转录活性．westemblot检测miR．1228奉稳转细胞株E．cadherin和Vimentin的表达情况．采用t啪swell实验方法观察miR．1228幸对sGC．790l迁移的影响．U浙江大学博士学位论文中文摘要结果：相对于癌旁组织，miR-1228+的表达水平在胃癌组织中明显下调；并且miR．1228幸的表达水平和肿瘤大小相关．与阴性对照相比，miR．1228牛过表达能明显抑制sGC．790l裸鼠皮下移植瘤的生长，并减低瘤体的重量．NF．1

4、cB的激活剂TNF．a能够抑制miR．1228}启动子区报告基因的荧光强度；NF．1cB亚基c．Rel的表达质粒和pGL3．1228幸-promoter共转染至sGc-790l，结果发现pGL3—1228··promoter的表达活性明显受到抑制，抑制的程度大于n盯．a．进一步研究结果显示，miR．1228十稳定转染细胞株的NF．1cB转录活性明显降低．miR-1228宰能明显上调sGC．790l的E．cadherin蛋白的表达，同时下调Vimentin的蛋白水平。Tmnswell实验结果显示，miR．1228誊可以明显抑制sGC．7901的迁移。茹

5、结论：miR．1228枣在胃癌组织中的表达明显低于癌旁组织．过表达miR．1228木能够抑制SGc．7901裸鼠皮下移植瘤的生长。miR．1228宰与NF．1cB之间存在反馈环路．过表达miR．1228曩能够抑制sGC．7901的EMT．关键词：胃癌；micmRNA；核因子．KB；上皮问质转化IHTheSignificanceandFunctionofmicroRNA·1228舟ExpressioninGastricCancerZhejiangUniVersitySchoolofMedicine，GastroenterologyPh．D．Candid

6、ateJiaLitaoSuper、幢sorPro￡CaiJiantingAbstractBacl嚯round：miRNA盯eaclaSs0fshort(20一23nucleotidesinlength)，endogenouS，single．strandedRNAwKchregulategeneexpressionbycausing仃anslationalrepressionormRNAdegradation．DysregulatedmiRNAplayc—ticalrolesduringcarcinogenesis’锄dcancerprogressio

7、n．Gastricc锄ceristhefo证hmostcommonmalignam咖orworld嘶de锄dnl仃entlyis廿lesecondleadingcauSeofcancer-relat

8、edmoIrtali够．Althou曲cu仃entpracticeincludesinco叩oratingchemothe豫pyorradiationimosu喀icalresection仃eatnlemprotocols，ga矧ccancersurviValmtesremaillp00r．Thepu巾oseofthis咖dywaSt0elucidate

9、theroleofmiR-1228·ingaStriccancerandbcorrespondingmole