秀丽隐杆线虫对苯甲醛嗅觉适应信号途径中Gα的鉴定及功能的研究.pdf

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1、分类号０９３密级公开ＵＤＣ１＿编号《方乂掌巧女研《４《化俗Ａ■？■题目录丽臨杆线虫对萊甲酸嗅觉适应信＿与徐径中Ｇａ的鉴定及功能的研究学院、中私）省部共建云南生物资源保艳（所与利用国家重点实验室一专业名称微生物学１２０１３０００８９３研究生姓名韩京化学号＿导师姓名黄晓抹职称硏究最二０—六年五月ＴｈｅｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆＧａｉｎｔｈｅｏｌｆａｃｔｏｒｙａｄａｔａｔｉｏｎｐｓｉｎａｌｉ

2、ｎａｔｈｗａｔｏｂｅｎｚａｌｄｅｈｄｅｏｆＣｅｌｅａｎｓｇｇｐｙｙｇＣａｎｄｉｄａｔｅ：ＪｉｎｈｕａＨａｎｇＳｕｅｒｖｉｓｏｒｓ：Ｐｒｏｆ．ＸｉａｏｗｅｉＨｕａｎｐｇＳｕｂｍｉｔｔｏｔｈｅＬａｂｏｒａｔｏｒｆｏｒＣｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎａｎｄＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｙＢ－ｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅｓＹｕｎｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｉｎａｒｔｉａｌｆｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆｒｅｕｉｒｅｍｅｎｔｙｐｑｆｏｒｔｈｅｄｅｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｏｆＳｃｉｅｎｃｅｇＫ

3、ｕｎｍｉｎＹｕｎｎａｎＣｈｉｎａＰ．Ｒ．ｇ，，Ｍａ．２０１６ｙ扉页：论文独创性声明及使用授权本论文是作者在导师指导下取得的研巧成果。除了文中特别加标注和致谢的地方，不存在劉窃或抄袭行为夕ｈ论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果。与作者一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢＇邑、。（现就论文的使用对云南大学授权如下：学校有权保留本论文含电子版），也可Ｌ采用影印，可Ｊ、缩印或其他复制手段保存论文；学校有权公布论文的全部或部分内容将论文用于查阅或借阅服务；

4、学校有权向有关机构送交学位论文用于学术规范审查、社会监督或评奖。；学校有权将学位论文的全部或部分内容录入有关数据库用于检索服务（内部或保密的论文在解密后应遵循此规定）－研究生签名－０：＾京等导师签名日ｍ：６７５南大学硕±学位论文中文摘要，，秀丽隐斤线虫是生活在止壤中的微小动物结构简单通体透明，是生物领域理想的模式生物。线虫的生活环境十分复杂，其中存在多种刺激，包括病原菌、气味、食物、渗透压、ｐＨ等，而线虫具有完善的化感体系，可Ｗ识别该些刺激并作出不同的应答。线虫＾＾王壤中的细菌为食，其寻找食物的

5、策略是基于其敏感的嗅觉体系。线虫通过嗅觉神经元来辨别环境中的气味从而寻找食物，但环境中许多气味对线虫具有天然的吸引作用但却不能为其提供营养，，因此线虫可Ｗ通过一适应非食物产生的吸引性气味来提高其觅食行为的效率。从这点来说，嗅觉适应对于线虫觅食有重要意义。Ｇ蛋白信号途径是线虫嗅觉体系中最重要的途径，也有报道该途径会影响线，ＧＧＰＣＲ）Ｇ蛋虫嗅觉适应。在该信号途径中气味分子与蛋白偶联受体（结合，白ａ亚基（Ｇｏｔ）被激活并解离，从而激活下游信号途径，使线虫产生嗅觉反应。一，ＥＧＬ４另方面，气味分子持续的刺激

6、也会通过调节Ｇ蛋白信号途径从而促进的入核一，并通过系列下游基因的变化，从而导致对信号分子产生嗅觉刺激。尽一管近年来，在嗅觉适应研巧领域取得了不少进展，在此基础上也提出了上述个可能的嗅觉适应模型，但该领域的研究者仍然认为不排除持续的嗅觉刺激也有可一能通过定途径直接调节巧流和ＤＡＧ的水平来调节适应。因此，为了探索是否存在嗅觉适应的其它调控途径，本文通过检测Ｇ蛋白信号途径中的关键蛋白Ｇａ在线虫嗅觉适应中的作用，探索了Ｇ蛋白信号途径Ｌ义及可能的下游通路对线虫苯甲醇嗅觉适应的影响，主要得到下结果：－－１ＧＰＡ７ＰＡ

7、１．和Ｇ３两个Ｇａ参与调节线虫对苯甲酵的嗅觉适应。通过对Ｇａ－７－／５突变型线虫进行筛选，发现掛Ｗ和绍Ｗ突变型线虫对苯甲酵的嗅觉适应有缺０－７和７Ｃ－回复陷。将巧７パ突变型线虫进行回复，证明绍，其嗅觉适应缺陷得到和０－＾确实参与调控线虫对苯甲酸的嗅觉适应邸。２－ＧＰＡ－．ＧＰＡ７和１３巧响嗅觉适应可能的下游途径的筛选ＲＮＡｉ结合突。通过－－变株筛选的方法，对绍Ｗ７和巧Ｗ／３下游途径关键基因进行筛选。其中ＣＡＭＰ途－－Ｃ（知＞７２此７＞７知－径和ＰＬ途径的关链基因突变，Ｗ化或干扰（／，如厶／／）都不影响线虫对

8、苯甲醒的嗅觉适应－パ－。而ｃＧＭＰ途径的关键基因成ｚ／和ｔｏｃ４都影响Ｉ５南大学硕±学位论文线虫对苯甲酸的趋化，说明该途径影响线虫对苯甲酵的感知。３－－．ＤＡＧ信号通路是否参与ＧＰＡ７和Ｇ