miRNA-146a调控血管平滑肌细胞增殖和凋亡的作用及机制.pdf

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1、国际检验医学杂志２０１７年１月第３８卷第１期ＩｎｔＪＬａｂＭｅｄ，Ｊａｎｕａｒｙ２０１７，Ｖｏｌ．３８，Ｎｏ．１·６３··论著·ｍｉＲＮＡ－１４６ａ调控血管平滑肌细胞增殖和凋亡的作用及机制杨云山（广东省惠州市第一人民医院检验科５１６００３）摘要：目的探究ｍｉＲＮＡ－１４６ａ调控血管平滑肌细胞增殖、凋亡的作用及相关机制。方法取ＳＤＰ级健康雄性ＳＤ大鼠作为实验对象，取血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）消化离心后，转染５０ｎｍｏｌ／ＬｍｉＲＮＡ－１４６ａ反义寡核苷酸、错义链和同等剂量磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ），进行对照比较。结果实验组细胞在转染后４８ｈ内ＶＳＭＣ的数目和吸光度值均低于其他两组，细胞凋亡率明

2、显高于其他两组，核因子κＢｐ６５、ＰＣＮＡ的表达水平低于其他两组，差异均具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论ｍｉＲＮＡ－１４６ａ可促进ＶＳＭＣ的增殖，抑制细胞凋亡的进行，这一作用机制与核因子κＢｐ６５、ＰＣＮＡ表达水平增高有关。关键词：ＲＮＡ－１４６ａ；血管平滑肌细胞；增殖；凋亡；机制ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－４１３０．２０１７．０１．０２４文献标识码：Ａ文章编号：１６７３－４１３０（２０１７）０１－００６３－０３ＥｆｆｅｃｔａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｍｉＲＮＡ－１４６ａｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍ

3、ｕｓｃｌｅｃｅｌｌｓＹＡＮＧＹｕｎｓｈａｎ（ＴｈｅＦｉｒｓｔＰｅｏｐｌｅ′ｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＨｕｉｚｈｏｕＣｉｔｙ，Ｈｕｉｚｈｏｕ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ５１６００３，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｍｉＲＮＡ－１４６ａｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌｓａｎｄｉｔｓｍｅｃｈａｎｉｓｍ．ＭｅｔｈｏｄｓＴａｋｉｎｇｔｈｅＳＤＰｇｒａｄｅｈｅａｌｔｈｙｍａｌｅＳＤｒａｔｓａｓｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｕｂｊｅｃｔｓ，Ａｆｔｅｒｔｈｅｄｉｇｅｓｔｉｏｎｏｆ

4、ｖａｓｃｕ－ｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌｓ（ＶＳＭＣ），５０ｎｍｏｌ／ＬｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄｍｉＲＮＡ－１４６ａａｎｔｉｓｅｎｓｅｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ，ｍｉｓｓｅｎｓｅｃｈａｉｎａｎｄｔｈｅｓａｍｅｄｏｓｅｏｆｐｈｏｓｐｈａｔｅｂｕｆｆｅｒ（ＰＢＳ）ｗｅｒｅｃｏｍｐａｒｅｄ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｎｕｍｂｅｒａｎｄａｂｓｏｒｂａｎｃｅｖａｌｕｅｏｆＶＳＭＣｉｎｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｇｒｏｕｐｗｅｒｅｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｉｎｔｈｅｏｔｈｅｒｔｗｏｇｒｏｕｐｓａｆｔｅｒｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎｗｉｔｈ４８ｈ，ｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｒａｔｅｗａｓｓｉｇｎ

5、ｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｔｈｅｏｔｈｅｒｔｗｏｇｒｏｕｐｓ，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒκＢｐ６５ａｎｄＰＣＮＡｗａｓｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈｅｏｔｈｅｒｔｗｏｇｒｏｕｐｓ，ａｎｄｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｗａｓｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ＜０．０５）．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎｍｉＲＮＡ－１４６ａｃａｎｐｒｏｍｏｔｅｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＶＳＭＣ，ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｔｈｅｃｅｌｌｓ，ｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｃｔｉｏｎｉｓｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅｉｎｃｒｅａｓ

6、ｅｏｆｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒκＢｐ６５ａｎｄＰＣＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＲＮＡ－１４６ａ；ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌ；ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ；ａｐｏｐｔｏｓｉｓ；ｍｅｃｈａｎｉｓｍ小分子ＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）是一类进化保守的非编码单链小以及相关试剂盒。实验动物为ＳＤＰ级健康雄性ＳＤ大鼠共２０ＲＮＡ分子，因其表达具有组织特异性和时序性，能够识别特定只，均为８周龄，体质量为（１２５．５±１０．２）ｇ，均购自辽宁省实验的目标ｍｉＲＮＡ，可参与到细胞增殖、分化等活动中，目前已知［５］动物中心，实验过程符合《关于善待实验动物的指导性意见》［１－２］。

7、血管平ｍｉＲＮＡ近７００个，３０％以上基因表达可由其调控中的相关规定。滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的增殖、凋亡直接影响到动脉粥样硬化病变１．２方法的发展，而炎症和免疫反应是发生这一病变的核心机制。相关１．２．１大鼠ＶＳＭＣ分离培养取健康雄性大鼠，断椎处死，研究显示，ｍｉＲＮＡ会影响到内源性免疫系统内部平衡，其中置于７５％酒精中浸泡，时间为５ｍｉｎ，将胸主动脉取出，并剥离内外膜，整个过程严格执行无菌操作；将组织块剪成１ｍｍ３大ｍｉＲＮＡ－１４