《丙泊酚抑制h_2o_2诱导的肝l02细胞凋亡-论文》.pdf

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1、538ChineseJournalofClinicalMedicine，2013．Vo1．20，No．4中国临床医学2013年8月第20卷第4期·论著·丙泊酚抑制H2O2诱导的肝L02细胞凋亡张虹王浩李懿(复旦大学附属中山医院麻醉科，上海200032)摘要目的：探讨丙泊酚在Hz0诱导的人肝L02细胞凋亡中的作用。方法：人肝L02细胞经丙泊酚预处理后再用Hz0z进行处理，采用TUNEL法及caspase-3切割程度来检测细胞的凋亡。通过real—timePCR检测Bcl-2(B-eelllymphoma2)，Bcl-xL(B-celllymphoma-ex

2、tralarge)，Bad(Bcl一2一associateddeathpromoter)和Bax(Bcl一2一associatedXprotein)mRNA表达量。结果：在H：O诱导的凋亡过程中，经丙泊酚预处理的L02细胞凋亡数量及caspase-3切割量均明显减少。并且这种减少与丙泊酚的剂量成正相关：当丙泊酚剂量用至300Fmol／L时，细胞的凋亡程度被降至最低。丙泊酚预处理减少了促凋亡基因Bad和Bax的mRNA表达。结论：丙泊酚对H0。诱导的人肝细胞L02凋亡具有抑制作用，可能部分是通过抑制Bad和Bax的表达发挥作用的。关键词丙泊酚；肝细胞；凋亡

3、中图分类号R971．2文献标识码APropofolInhibitedtheApoptosisofHumanHepaticL02CellsInducedbyH2o2ZHANGHongWANGHaoLIYiDepartmentofA8ss0Z0g，ZhongshanHospital，FudanUniversity，Shanghai200032，ChinaAbstractObjective：ToexploretheeffectofpropofolinH2O2一inducedapoptosisofhumanhepaticL02cells．Methods：Pre—

4、conditionedornonpreconditionedhumanhepaticL02cellswereexposedtoH2O2andtheapoptosiswasevaluatedbyTUNELassayandcaspase-3cleavage．ThemRNAexpressionsofBcl一2，Bcl—xL，Bad，andBaxwerequantifiedbyreal—timePCR．Re-suits：Propofolpreconditioningreducedpopulationofapoptoticcellsandcaspase一3clea

5、vageinducedbyH2O2inL02cells，whichwaspositivelycorrelatedtothedosageofpropofo1．Whenadoseofpropofolto300／lmol／L，apoptosisoftheceilswerereducedtoaminimumdegree．Propofolpretreatmentdecreasedtheexpressionsofpro—apoptoticgenesBadandBaxmRNA．Conclusions：PropofolprotectagainstH202-induced

6、apoptosisinhepaticcellsL02，whichispartlymediatedbysuppressingex—pressionofBadandBax．KeyWordsPropofol；Hepatocytes；Apoptosis肝脏移植、组织切除术及出血性休克都会引起胞内钙离子的增多以及脂质的过氧化，而这些修饰细胞氧化损伤，并最终导致肝功能失调或衰竭¨】]。可引起细胞的凋亡和坏死。组织缺血再灌注中堆积的氧自由基是导致细胞凋亡本研究探讨了丙泊酚预处理对H：O：诱导的肝的主要因素_2]。目前针对缺血再灌注(ischemia／细胞凋亡的作用。r

7、eperfusion，I／R)损伤最有效的措施是预处理，如缺1资料与方法血、热休克及药物预处理，可以有效地提高移植术后1．1细胞株及主要试剂L02细胞株(人正常永生肝组织存活率[3]。作为常用的静脉麻醉药，丙泊酚化肝细胞)购自中国科学院细胞生化所。RPMI一由于其代谢几乎不受肝功能失调的影响，常被用于1640培养液及胎牛血清购自美国GIBCO公司。丙肝移植手术中。但是对不同的组织细胞以及在不同泊酚(得普利麻)购自阿斯利康公司。TUNEL试剂的实验条件下，丙泊酚的作用则并不完全一致。目盒购自瑞士Roche公司。Real—TimePCR试剂盒前，丙泊酚对肝细

8、胞在氧化应激条件下的作用尚不购自日本TaKaRa公司。清楚，其作用的分子机制更是