干细胞标记物.ppt

《干细胞标记物.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、干细胞的标志物干细胞：是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。包括：胚胎干细胞生殖干细胞成体干细胞按分化潜能分为：全能干细胞多能干细胞专能（单能）干细胞干细胞的标志物分类：细胞表面的特殊标志细胞内特异基因的表达细胞内特殊物质的表达其他特性细胞表面分子细胞表面分子分类：细胞膜受体白细胞分化抗原粘附分子细胞因子受体结合促分裂素的分子主要组织相容性复合体抗原B细胞识别抗原的膜免疫球蛋白免疫球蛋白Fc段受体其它受体和分子。受体：（receptor）是一种能够识别和选择性结合某种配体（信号分子）的大分子物质受体与配体间的作用具有三个主要特征：①

2、特异性；②饱和性；③高度的亲和力。白细胞分化抗原：是白细胞（还包括血小板、血管内皮细胞等）在分化成熟为不同谱系（lin-eage）和分化不同阶段以及活化过程中，出现或消失的细胞表面标记粘附分子:是一类能介导细胞间及细胞与细胞外基质粘附的分子，多为糖蛋白。粘附分子分类:粘合素超家族粘附分子（纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、纤维蛋白原、胶原蛋白、等）免疫求蛋白超家族粘附分子（ICAM、VCAM、和CD31等）钙粘连素超家族粘附分子选择素家族粘附分子其它粘附分子。干细胞表面分子功能：参与干细胞的分化调控维持干细胞的自我更新和多能性参与机体重要

3、的生理和病理过程“通用的”干细胞标记：ABCG2/Bcrp1（St.JudeChildren'sResearchHospital）多能干细胞标记：干细胞因子Oct-4波形蛋白硷性磷酸酶鉴定干细胞的常用方法：细胞形态和结构细胞功能细胞表面的特殊标志细胞内特异基因的表达胚胎干细胞的常用标志：Oct-4SSEAsTRA-1-60和TRA-1-81Oct-4：Oct-4（也叫Oct-3或Oct3/4）属POU转录因子一员SSEAs（特异性胚胎抗原）：人EC、ES：SSEA-3（+）、SSEA-4（+），SSEA-1（-）鼠ES：SSEA-

4、1（+），SSEA-3（-）、SSEA-4（-）TRA（肿瘤排斥抗原）：人ES（+）鼠ES（-）胚胎干细胞的检测：形态特性：ES具有与早期胚胎细胞相似的形态特点。生长特性干细胞特殊标记：SSEAs,TRA-1-60,TRA-1-80（AKP+,SSEA+,Oct-4+显示ES的未分化状态，并且Oct-4和SSEA-4是人类ES的特性）端粒酶活性高AKPSSEA核型不被Hoechst33342和Rhodamine123染色分化能力人胚胎干细胞特性胚胎干细胞生殖干细胞SSEA-1－＋SSEA-3＋＋SSEA-4＋＋TRA-1-60＋＋

5、TRA-1-81＋＋AKP＋＋Oct-4＋？端粒酶活性＋＋滋养细胞＋＋滋养细胞培养条件＋无血清培养LIF+bFGF+bFGF+Forskolin造血干细胞的标志物Lin：lineagesurfaceantigen胸腺抗原-1（Thy-1、CD90）干细胞抗原（stemcellantigen-1,Sca-1）KitCD34CD133ABCG2CD45KDR/VEGFR-2其它：CD38，WGA（丝裂原）系表面抗原(lineagesurfaceantigen,Lin)当造血干细胞分化为各系的祖细胞和成熟细胞时，会出现各系细胞的专一标志

6、，即系表面抗原如：淋巴系：CD19、CD7粒系：CD11、CD13、CD15、CD16红系：CD36、CD47、CD51、CD59、CD71；单核系：CD14巨核系：CD31、CD41、CD42、CD61、CD107B淋巴系：CD19、CD20、CD21、CD22T/NK系：CD2、CD7、CD11、CD25、CD26检测造血祖细胞时，可选择其中3-5个代表各系的抗原。胸腺抗原-1（Thy-1、CD90）为GPI（糖磷脂酰肌醇glycophosphatidylinositol,GPI）连结的膜分子，主要分布在胸腺T细胞、NK细胞和

7、神经元。Thy-1是用来鉴别造血干细胞的种系特异性标志物.Thy-1在CD34阳性细胞中表达最高，是比CD34更早期的造血干/祖细胞表面标志,并且当造血干细胞开始表达其分化细胞类型(如CD45RA，CD38，和CD71)时，他的表达开始下降.小鼠造血干细胞表达底水平Thy-1。表型为Thy-1Low的细胞群能完全重建受致死量照射宿主的淋巴造血系统。干细胞抗原（stemcellantigen-1,Sca-1）Sca-1是18kDa磷脂酰肌醇锚定蛋白，属Ly-6(一种胞浆膜蛋白）抗原家族成员。Sca-1被广泛认为和Ly-6半抗原一起，

8、是小鼠HSC标志分子，它在多能HSCs上表达。一种抗Sca-1抗体经常和一些细胞表面标志分子表达的阴性选择一起用来鉴定和分离小鼠HSCs。Sca-1+HSCs可在成年骨髓、胎儿肝脏、成年动物流动的外周血和脾脏中被找到。Sca-1在几种非造血组织中也