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时间:2020-01-23
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1、第五章食用菌菌种生产第一节菌种概述第二节菌种生产设备第三节菌种培养基第四节接种第五节菌种培养与质量鉴定第六节菌种保藏与复壮第一节菌种概述一、菌种概念二、菌种类型三、菌种生产程序一、菌种概念菌种担孢子或子囊孢子野生扩大繁殖后的纯次生菌丝体栽培来历野生菌驯化原菌株改良生物技术创新优良菌株扩大繁殖用于生产实行纯培养不含任何杂菌基本要求二、菌种类型一级菌种二级菌种三级菌种级别按保藏用种实验用种生产用种目的状态:固体菌种、液体菌种(一)级别不同的菌种1.一级种(母种)用分离法首次得到的纯次生菌丝体概
2、念概况培养环境试管、斜面培养基用途再生母种扩大原种保藏用种菌丝弱而少、不可直接栽培特点2.二级种(原种)将母种扩大至粗放培养基上形成的菌种概念概况培养环境菌丝较多而壮、适应性较强特点用途扩大栽培种大口瓶、较粗放的液体或固体培养基3.三级种(栽培种)将原种扩大至粗放培养基上形成的菌种概念概况培养环境菌丝多而壮、适应性强特点用途栽培生产菌种袋、较粗放的液体或固体培养基不可再扩生产总过程母种栽培种栽培原种子实体(二)状态不同的菌种用固体基质培养的菌种1.固体菌种概念特点设备、工艺简单菌龄长而不一发
3、酵率较低用液体基质培养的菌种2.液体菌种概念特点设备、工艺较复杂菌龄短而一致发酵率高易老化和自溶生长势的区别液体菌种固体菌种三、菌种生产程序第二节主要生产设备一、制培养基设备二、灭菌设备三、接种设备四、培养设备五、保藏设备六、菌种厂布局一、制培养基设备(一)原料处理设备切片粉碎两用机切片粉碎两用机铡草机粉碎机拌料机装袋机(二)培养基分装设备装瓶机挖瓶机菌种袋颈圈菌种瓶二、灭菌设备高压锅外锅:装水内锅:装物(有壁管)锅盖安全阀排气阀压力表常压密闭性好要求1.接种箱用法清洁、放物品→消
4、毒喷雾熏蒸紫外灯特点简易、利移动对人体低害效果好、工效低三、接种设备(一)接种环境观察窗紫外灯操作孔接种箱2.接种室缓冲间:2~3m2接种间:5~6m2面积7~9m2高2.2~2.5m要求6个面平滑两门错开、平拉式顶装紫外灯清洁→物品放缓冲间→消毒→移物至接种间→喷消毒液→10min后接种→消毒液清洁使用使一定工作区达到相对无菌、无尘状态的电器3.超净工作台双人单人要求:前端为导热性好的金属材料4.接种工具固体菌种接种枪液体菌种接种枪四、菌种培养没备1.培养箱培养少量菌种的恒温
5、电器(20~40℃)2.培养室培养大量菌种的恒温房要求光线暗密闭好、通风性强能升温、降温(空调机)有培养架返回本节贮藏室远离污染源低温(4~8℃)干燥、通风、遮光用前要严格消毒杀虫地面常撒石灰粉保藏原种、栽培种:五、菌种保藏设备保藏母种:冰箱(4℃)左右六、菌种厂的布局根据菌种生产流程合理设置仓库配料室灭菌室接种室培养室办公室栽培棚门口晒料场第三节菌种培养基一、概述(一)概念及要求(二)培养基的类型二、各级菌种的培养基(一)母种培养基(二)原种、栽培种培养基三、培养基的灭菌一、培养基的概述(一)概念及
6、要求概念人工配制的适于菌种生长的营养基质要求营养种类、比例、水分、pH适宜;保持无菌状态。类型天然:天然有机物合成:已知成分的化学药品半合成:?原料来源状态液体:营养液固体固体:天然固体原料固化:加1.5%~2%琼脂表面形状斜面培养基平板培养基(二)培养基的类型粉状条状属天然植物多糖融点96℃以上凝点40℃以下冷水中不溶透明度好、粘着力强不被微生物分解利用特性二、各级菌种的培养基(一)母种培养基1.通用配方2.配制过程PDA马铃薯200g、葡萄糖20g琼脂15~20g、水1000m1
7、煮沸20min,取定量滤液制马铃薯滤液滤液沸时加入,融后加余料融化琼脂调解pH勿污管口,控制装量分装试管准备灭菌扎捆10%NaOH或HCL(二)原种、栽培种培养基主料棉籽壳87,麦麸10辅料白糖1,石灰1,过磷酸钙1配方(%)棉壳、麦麸干混余料溶于水后浇入主料清水翻拌至含水量配制1.种类(1)棉籽壳培养基主料麦粒、玉米粒等98.5%辅料石膏粉1%,碳酸钙0.5%调pH与分装pH:一般为8.0左右原种培养基装大口瓶栽培种培养基装菌种袋外紧内松,上紧下松配方(%)颗粒洗净,1%石灰水泡胀文火煮沸1
8、5~20min晾至无明水后拌入余料配制(2)颗粒培养基栽培种的装袋三、培养基的灭菌(一)母种培养基的灭菌无菌检验约30℃条件下→空白培养2~3天灭菌与摆斜面摆斜面1kg/cm2(103kpa、121℃)20~30min(二)原种、栽培种培养基的灭菌高压灭菌1.5kg/cm2(152kpa、128.1℃)灭菌1~2h常压灭菌100℃灭菌10h左右→再闷12h要求攻头、控中、保尾返回本节第四节菌种的接种一、无菌操作二、母种的接种
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