人羊膜匀浆上清液治疗兔角膜碱烧伤病理探究.doc

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1、人羊膜匀浆上清液治疗兔角膜碱烧伤病理探究【摘要】目的:观察人羊膜匀浆上清液促进兔角膜碱烧伤后角膜上皮和基质修复的作用,为临床上应用人羊膜匀浆上清液点眼治疗眼碱烧伤提供理论依据。;方法:将制备的羊膜匀浆上清液点眼治疗兔角膜碱烧伤,并对治疗后的角膜照相观察角膜上皮愈合和基质修复情况。;结果:羊膜匀浆上清液治疗角膜碱烧伤后眼充血明显减轻,角膜上皮愈合较快,角膜上皮细胞排列整齐,基质中炎症细胞浸润减轻且胶原纤维排列整齐。;结论:早期应用羊膜匀浆上清液能促进兔角膜碱烧伤后角膜的愈合及膜基质

2、有序修复。;【关键词】羊膜匀浆上清液;角膜;碱烧伤文章编号:1009-5519(2007)11-1582-02中图分类号:R77文献标识码:APatho~studyonhumanamniotichomogenatetocornealhealingafteralkaliburnofcorneainrabbitsLIAOQiong,DAIChao,LIUXiang(DepartmentofOphthalmology,XinqiaoHospital,TheThirdMilitaryUniversityofMe

3、dicalSciences,Chongqing,400037,China)[Abstract】Objective:Toselecttheeffectivemethodsforeyealkalinefreshamniontorabbitcornealepithelialcellandstromaafteralkaliburnofrabbitcornea・Methods:Themodelofalkaliburnofrabbitcorneawassetupandtreatedbysupernatantofhomogeni

4、zedfreshamnion.Cornealepitheliumandstromawereobservedwithaslitlampmicroscope・Results:Aftertreatmentwithsupernatantofhomogenizedfreshamnion,therabbiteyesshowedprogressivedecreaseofvascularityandstromalinfiltrationandorderlyarrangementofcornealepithelialcellandc

5、ollagenfibers.Conclusion:Supernatantofhomogenizedfreshamnioncanacceleratethehealingofrabbitcornealepitheliumandrestorethecornealstromainorder.【Keywords】Supernatantofhomogenizedamnion;Cornea;Alkaliburn文献报道羊膜上皮细胞分泌EGF、;TGF-a、;KGF、;HGF、;bF

6、GF等生长因子[1,2],我们直接将羊膜制成匀浆,观察其存在的多种细胞因子是否对角膜上皮细胞的增殖有促进作用,并将羊膜匀浆上清液制成眼液点眼治疗兔角膜碱烧伤,然后行角膜病理研究,观察其对角膜上皮愈合、;炎症反应、;基质修复的影响,以期寻找一种比羊膜移植经济、;方便、;效果佳的治疗角膜碱烧伤的新方法&W65377;1资料和方法1.1动物及主要试剂:⑴家兔:体重1.5〜2.0血。;(2)羊膜匀浆上清液:自制,方法如下:在超净台上将羊膜在PBS液中清洗3次,约1

7、0~15分钟,取适当大小称湿重,按1:1加PBS液放入匀浆机中,每分钟5000转,10冲程磨制匀浆,每冲程30秒。;取出匀浆按1:5加PBS液于离心管中离心2000r/min,10分钟,取上清液备用(1小时内用)。;后加入细胞冻存液放入-8(TC冰箱过夜,再放入液氮中冻存。;(3)bFGF(贝复舒眼液);(4)1mol/LNaOH:自制&W65377;1.2碱烧伤动物模型的制备:(1)1%丁卡因眼液点眼3次。;(2)乙瞇吸入麻醉。;(3)开睑器开睑,将浸在

8、1mol/LNaOH的直径为8mni的滤纸片置于兔角膜中央30秒。;⑷生理盐水冲洗结膜囊3分钟。;1.3动物分组和点眼:取15只家兔(30只眼)分为3组:对照组&W65380;羊膜匀浆组、;bFGF组。;碱烧伤后立即开始点眼,羊膜匀浆组(1:2羊膜匀浆上清液加氯霉素眼液点眼)、;bFGF组(贝复舒眼

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