京尼平交联羊膜治疗兔角膜急性碱烧伤的实验研究

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1、京尼平交联羊膜治疗兔角膜急性碱烧伤的实验研究南充市中心医院目的:观察京尼平交联羊膜对兔角膜急性碱烧伤的治疗效果为该新型生物材料的临床应用提供动物实验依据。方法:将60只急性角膜碱烧伤大白兔分为三组,每组20只,A组移植普通羊膜,B组移植京尼平交联羊膜,C组为对照组。结果:京尼平交联羊膜与普通羊膜脱落时间差异有统计学意义;术后14、28、42天,京尼平交联羊膜组CNV评分及角膜混浊度评分与对照组比差异有统计学意义,术后14d,京尼平交联羊膜组与普通羊膜组角膜浑浊度评分与对照组差异均无统计学意义。结论:治疗角膜化学性碱烧伤

2、,京尼平交联羊膜与普通新鲜羊膜相比在抑制新生血管以及减轻角膜混浊方面效果更显著。[abstract]Objective:tostudytheeffectofanewbiomaterial-genipincrosslinkedamnioticmembrane(GAM)forcornealalkaliburn.Methods:usecrosslinkedHAMtotreat60cornealalkaliburnnewZealandRabbitschecktheeyesofthecorneaedemaandconjuctiv

3、ehyperaemiaeveryday.Results:TheaveragetimeofgenipincrosslinkedHAMdissolvedisissignificantdifferencebetweenthedissolvedtimeofG-HAMandAM.thescoreofCNVshowedsignnificentdifferencebetweenG-HAMandcontrolgroup.Conclusion:Comparedwithordinarymembrane,genipin-crosslinke

4、dHAMshowedbettereffectforcornealalkaliburn.[Keywords]Humanamnioticmembrane;Genipin;crosslink;Ocularsurfacedisease;Tissueengineering碱烧伤对眼表上皮、角膜、角膜缘干细胞,结膜会产生持续的损伤,最终导致单眼或双眼的视力下降。角对碱烧伤来说,成功的关键在于减轻对角膜缘干细胞和结膜细胞的损害,除此之外,减轻炎症反应,阻止组织进一步的溶解也十分重要[1、2]。基于前期的实验研究,木实验主要研宄京尼平

5、交联羊膜对碱烧伤角膜的治疗效果,并探讨其用于眼表重建的可行性。1材料与方法1.1材料、试剂与仪器新鲜人羊膜,京尼平、胰酶、乙二胺四乙酸、新西兰大白兔,戊巴比妥钠,托百士眼膏,手术器械、显微镜。1.2G-HAM的制备将新鲜获取羊膜脱上皮细胞并浸入0.5%的京尼平溶液中30min[8]进行交联。1.3动物实验及分组60只健康新西兰大白兔,均无眼部病变。以石眼造碱烧伤模型(重度)后随机分成3组,每组20只。所有动物均遵循动物医学伦理规范。A组:烧伤后移植G-HAM。B组:烧伤后移植甘汕保存AM。C组:不做任何处理,对照组,仅

6、点眼药水1.4实验方法1.4.1手术方法及取材将G-HAM/AM平整覆盖于角膜表面注意贴合紧密,在角巩膜缘将羊膜与结膜、表层巩膜用10/0尼龙线8针缝合固定。术后第14、28、42d每个吋间点观察动物后按分组随机处死5只动物,取角膜行HE染色。1.4.2实验观察指标及检测标准术后每日观察结膜充血水肿、分泌物、羊膜脱落溶解等情况,第14、28、42d,将兔全麻后于裂隙灯下观察角膜混浊、新生血管,并对两者进行记录评分。而后处死兔,摘除眼球,剪下角膜,HE染色观察角膜切片。2.结果2.1大体观察术后7-30天,肉眼下三组羊膜

7、移植后眼表修复大体图2.1.1羊膜溶解脱落情况术后4〜5天,普通羊膜开始溶解,部分观察眼移植的普通羊膜完全脱落,而京尼平交联羊膜未观察到明显变化。至术后10天,京尼平交联羊膜开始显示溶解征兆,其完全脱落的平均吋间为20.00±10.418d,普通羊膜为9.20±10.618d,溶解时间差异有统计学意义(p<0.01)。2.1.2角膜混浊度评分术后14天,G-HAM角膜混浊度评分(3.87±0.743)、AM组角膜浑浊度评分(4.01±0.632)与对照组(4

8、.07±0.704)相比差异均无统计学意义(p>0.05),两者之间差异也无统计学意义(p>0.05);术后28、42天,G-HAM组角膜浑浊度评分分别为:(3.13±0.516)、(2.33±0.724)与对照组的(4.27±0.458)和(4.33&plusm

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