三疣梭子蟹蜕皮周期中蜕皮激素浓度的变化【毕业设计】

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1、本科毕业设计（20__届）三疣梭子蟹蜕皮周期中蜕皮激素浓度的变化目录1引言12材料和方法12.1材料12.2主要仪器设备与试剂12.3实验方法22.3.1标准溶液的配制22.3.2色谱和质谱条件UPLC条件32.3.3标准曲线和检出限32.3.4血淋巴蜕皮激素浓度的变化的测量33实验结果33.1检测获得的蜕皮激素浓度33.2数据分析结果44结论5致谢5参考文献5附录8摘要：甲壳动物Y器(Y-organ)分泌的蜕皮类固醇激素对其蜕皮过程起重要调控作用。利用高效液相色谱-电喷雾串联质谱（LC-MS/MS）法完成三疣梭子蟹蜕皮过程中血淋巴蜕皮激素浓度变化的测定。随着蜕皮周期的运行基本处于逐渐

2、升高的趋势，蜕皮后期(A/B)蜕皮激素的浓度较低，低于仪器检测限0.03ng/mL。进入蜕皮间期后，蜕皮激素的浓度开始逐渐恢复正常1.393±0.245ng/mL。进入蜕皮前期蜕皮激素浓度逐渐上升，D0，D1，D2其浓度分别为4.547±0.372ng/mL，6.406±0.438ng/mL和8.135±0.423ng/mL；而在蜕皮前期D3期达到最高峰20.071±1.327ng/mL，D4有所回落变为10.313±0.511ng/mL。该研究结果证实蜕皮类固醇激素对三疣梭子蟹蜕皮过程起重要调控作用。关键词：三疣梭子蟹；蜕皮周期；蜕皮激素；LC-MS/MSAbstract:Crust

3、aceanYcontrol(Y-organ)steroidhormonesecretedbytheirmoltingmoltingprocessplaysanimportantregulatoryrole.Highperformanceliquidchromatography-tandemmassspectrometry(LC-MS/MS)methodtocompletetheprocessofPortunustrituberculatusmoltingecdysteroidhemolymphconcentrationdetermination.Withthemoltcycle,run

4、ningbasicallyattheincreasingtendency,moltlater(A/B)lowconcentrationsofecdysone,belowtheinstrumentdetectionlimitof0.03ng/mL.Intotheinter-moltperiod,theconcentrationofecdysonegraduallyreturnedtonormal1.393±0.245ng/mL.Intothepre-moltecdysteroidlevelsincreasedgradually,D0,D1,D2concentrationwere4.547

5、±0.372ng/mL,6.406±0.438ng/mLand8.135±0.423ng/mL;earlyinthemoltingD3achievethehighest20.071±1.327ng/mL,D4fellbackinto10.313±0.511ng/mL.ItprovedsteroidhormoneplaysanimportantregulatoryroletoPortunustrituberculatus.Keywords:Portunustrituberculatus；moultingcycle；ecdysone；LC-MS/MS1引言三疣梭子蟹（Portunustri

6、tuberculatus）属节肢动物门（Arthropods）、甲壳纲（Crustacea）、十足目（Decapoda）、梭子蟹科（Portunidae），分布于我国辽东半岛、山东半岛到广东、广西的各海区以及日本、朝鲜、马来西亚群岛等海域，是一种大型海产经济蟹类。作为重要的大型经济蟹类，三疣梭子蟹肉质鲜美，营养丰富，食用价值高，不仅是我国传统的名贵海鲜，也是一种重要的出口海产品。20世纪90年代中期开始，三疣梭子蟹的大规模育苗和养殖在我国逐渐推广，现今三疣梭子蟹已是世界上养殖规模最大的海洋经济蟹类之一。蜕皮激素是一种类固醇激素，它既存在于无脊椎动物（主要是节肢动物）中，也存在于植物中。

7、甲壳动物蜕皮激素由Y器（又称为蜕皮腺，与昆虫的前胸腺为同功器官）合成、分泌[1,2]。目前国内已有人对甲壳动物蜕皮腺及蜕皮激素做了一些研究，如叶海辉等[1]采用组织切片和电镜技术，对锯缘青蟹大颚器、Y器的形态结构进行了观察，以及陆剑峰、赵维信[3]对中华绒螯蟹（Eriocheirsinensis）Y-器官在蜕皮周期中的超微结构，进而指出其对蜕皮过程的影响。目前尚无人研究三疣梭子蟹（Portunustrituberculatus）的蜕皮周期，作为