三疣梭子蟹蜕皮周期中MIH表达研究【毕业设计】

《三疣梭子蟹蜕皮周期中MIH表达研究【毕业设计】》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、本科毕业设计（20__届）三疣梭子蟹蜕皮周期中MIH表达研究目录三疣梭子蟹蜕皮周期中MIH基因的表达3引言4161材料与方法71.1材料71.2主要试剂71.3方法71.3.1总RNA提取71.3.2第一链cDNA合成71.3.4荧光定量PCR72结果83．讨论123.1MIH的作用及其作用机制123.2影响三疣梭子蟹蜕皮的各种因素研究133.2.1激素133.2.2能量133.2.3其他因素144.总结14致谢15参考文献1616摘要：在本次研究中，以实时荧光定量PCR技术（quantitativereal-t

2、imePCR,qRT-PCR）相对定量2-△△Ct方法，对MIH基因表达出的mRNA进行检测。实验结果表明，随三疣梭子蟹蜕皮周期进行，蜕皮周期中MIH表达水平变化呈一个明确变化的趋势，从蜕后A期MIH表达量开始上升，直到蜕皮C期达到顶峰，然后慢慢下降到蜕前D3/D4期达到最低，完成一个蜕皮过程，然后进入下一个蜕皮周期。其中以蜕皮周期中的蜕前D0期为对照，采用2-△△Ct方法计算另外各个蜕皮时期MIH基因mRNA的相对表达量。2-△△Ct结果表示，MIH基因在蜕皮周期中的表达情况，相对对照组蜕前D0期表达量，蜕后A

3、期为0.42±0.08倍，蜕后B期为1.09±0.09倍，蜕皮C期为1.35±0.16倍，蜕前D1期0.78±0.07倍，蜕前D2期为0.27±0.08倍，蜕前D3/4期为0.20±0.04倍。三疣梭子蟹蜕皮周期中MIH基因表达量的变化差异用SPSS软件(13.0)中的Dennett检验法进行分析，蜕皮周期中各个时期的MIH的表达量在(P<0.05)存在显著性差异的。结果表明，MIH基因的表达水平变化直接影响甲壳动物蜕皮过程的发生与进行关键字：三疣梭子蟹；蜕皮；MIH；实时荧光定量PCRAbstract：Them

4、ethodforthedeterminationoftheexpressionlevelsofmolt-inhibitinghormonemRNAincrustaceans(Portunustrituberculatus,)hasbeendevelopedusingrelativequantificationofquantitativereal-timePCR（qRT-PCR）andwewilluse2-△△CtmethodtoanalyzetheexpressionofthemRNAofMIH.Theexper

5、imentalresultsindicatedthattheexpressionlevelsofMIHchangedcleartendencywiththemoltcycleofPortunustrituberculatusprogressed,MIHtranscriptsincreasedinpost-moltA,achievedthecrestuntilinter-moltperiodC,thendroppedslowlybeforepre-moltD3/D4achievedlowestlevels,comp

6、letedmoltcycle,afterenteredthenextmoltcycle.AsthecontrolgroupD0,relativequantificationresultsusing2-△△Ctmethodtoanalyzetheexpressionlevelsofmolt-inhibitinghormonemRNAduringamoltcycle,showedthatMIHtranscriptsdown-regulated0.42±0.08foldinA,increased1.09±0.09fol

7、dinB,increased1.35±0.16foldinC,down-regulated0.78±0.07foldinD1,down-regulated0.27±0.08foldinD2,down-regulated0.20±0.04foldinD3/4.Molt-inhibitinghormonemRNAexpressionSignificantdifferencesduringthemoltcycleofthePortunustrituberculatus,analyzedbyDennettofSPSS(1

8、3.0)software.MIHtranscriptsofeachmoltingstageweresignificantly(P<0.05)inthemoltcycle.TheresearchresultsindicatedthatMIHexpressionlevelschangesmaybeinvolvedinthemoltcycleofcrustaceansimmed