三疣梭子蟹蜕皮周期中甲基法尼酯浓度的变化【开题报告】

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1、毕业论文开题报告生物技术三疣梭子蟹蜕皮周期中甲基法尼酯浓度的变化一、选题的背景与意义三疣梭子蟹（Portunustrituberculatus），隶属于甲壳纲、十足目、梭子蟹科，是中国沿海的重要经济蟹类。其生长迅速，养殖利润丰厚，已经成为中国沿海地区重要的养殖品种。梭子蟹一般在3-5米深海底生活及繁殖，冬天移居到10-30米的深海，喜在泥沙底部穴居。1987，LeRoux首次在甲壳动物中提出了大颚器(mandibularorgan，M0)这个概念，主要描述的是组织结构中类似于昆虫咽侧体的一个内分泌腺！它主要的分泌产物是甲基法尼酯(meth

2、ylfarnesoate，MF)，可以调节甲壳动物中蜕皮、生长发育等活动。而且大颚器也被证明是甲壳动物中唯一合成MF的内分泌器官。目前国内外都有人对甲壳动物中一些蟹类的超微结构做了研究。叶海辉等采用组织切片和电镜技术，对锯缘青蟹大颚器的形态结构进行了观察；赵维信等也对克氏原螯虾大颚器的超微结构进行了研究；赵维信等人同样对克氏原螯虾大颚器在卵巢发育周期中的组织结构变化做了研究；杜育哲等人用透射电镜对中华绒螯蟹大颚器的超微结构及眼柄切除后M0的变化进行了研究。对三疣梭子蟹大颚器的显微结构和超微结构的研究国内也有出现，秦昆、康现江对三疣梭子蟹大

3、颚器显微及超微结构做了研究。作为一种经济类的蟹类，三疣梭子蟹同样会遇到目前蟹类中普遍存在的性早熟的问题，这就给很多养殖户早成了重大的经济损失。所以研究清楚性早熟的机理然后解决这个问题刻不容缓。Laufer很早以前就提出过大颚器的分泌物甲基法尼酯具有促性腺激素的作用，所以研究三疣梭子蟹中大颚器在蜕皮周期中的变化来确定其对性早熟有没有影响及影响的强弱。可以进一步的研究三疣梭子蟹性早熟的机制，以便尽早的解决该问题。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题：研究的基本内容：1.三疣梭子蟹蜕皮周期中甲基法尼酯浓度的变化拟解决的问题：2.甲基法尼酯浓度的

4、测定三、研究的方法与技术路线：（一）研究方法1、实验材料：三疣梭子蟹在宁波宁海长街得水育苗场购得。2、三疣梭子蟹蜕皮周期中甲基法尼酯浓度的变化（1）大颚器的提取用解剖器材获取三疣梭子蟹中不同蜕皮时期（蜕皮后期、蜕皮间期、蜕皮前期、蜕皮期四个大期）游泳足基部抽取血淋巴，加入含有1000μL乙腈和1000μL0.9%NaCl及10μL内标（十二烷酸甲酯）的15ml的玻璃离心管内，超声波清洗5min,涡旋震荡2min，加入1ml正己烷，涡旋震荡2min，3000r/min离心10min，吸取上层正己烷（含有甲基法尼酯）于已作记号的4ml干净色谱

5、瓶中，下层重复提一次，合并正己烷在冰箱下层-20℃保存一周（2）一周内将正己烷旋转蒸发，蒸发后加100μL色谱正己烷定容，进行气相色谱-质谱分析（3）根据样品中甲基法尼酯特征离子响应强度与内标十二烷酸甲酯的特征离子响应强度比值，由标准曲线方程求得样品中甲基法尼酯的含量。（4）根据统计学原理，绘制图表1000μL0.9%NaCl获取血淋巴1000μL乙腈下层重复提一次，合并正己烷在冰箱下层-20℃保存一周吸取上层正己烷，于已作记号的4ml干净色谱瓶中3000r/min离心10min10μL内标加入1ml正己烷，涡旋震荡2min15ml的玻璃

6、离心管内，超声波清洗5min，涡旋震荡2min加100μL色谱正己烷定容，进行气相色谱-质谱分析计算获得甲基法尼酯的含量四、研究的总体安排与进度2010.10毕业论文选题2010.10-2010.11进行文献查阅和资料收集2010.11-2010.12完成任务书、开题报告、综述，进行开题答辩2011.1-2011.2完成两篇外文文献的翻译2011.2-2011.4进行论文实验，然后再把实验的数据整理，完成毕业论文2011.5进行毕业答辩五、主要参考文献：[1]LauferH,BorstD,BakerFC,eta1．Identificati

7、onofajuvenilehormone—likecompoundinacrustacean[J].Science,1987,235(4785):202-205[2]LauferH,SagiA,AhlJBS,eta1．Methylfarnesoateappearstobecrustaceanreproductivehormone[J]．InvertebraReprodDev,1992,22:17-20[3]RiddifordLM.Cellularandmolecularactionsofjuvenilehormone.Ⅰ:generalc

8、onsiderationandpremetramorphicactions[J].AdvInsectPhysiol,1994,24:213-273[4]赵维信,陆剑锋.中华绒螯蟹大颚器激素生物