牛皮胶原蛋白酶解条件优化【毕业设计】

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1、本科毕业设计（20__届）牛皮胶原蛋白酶解条件优化1目录1.前言12.材料与方法12.1材料与仪器12.1.1材料12.1.2主要仪器和设备22.2方法22.2.1测定方法22.2.1.1酶活力的测定22.2.2.2水解度的测定22.2.2试验方法32.2.2.1酶解用酶种类的选择32.2.2.2酶解工艺优化33结果与讨论33.1蛋白酶活力的测定33.2酶解用酶的选择43.3木瓜蛋白酶酶解牛皮胶原蛋白的工艺条件优化53.3.1木瓜蛋白酶酶解牛皮胶原蛋白的单因素试验53.3.1.1酶解温度的确定53.3.1.2酶解pH的选择53.3.1.3酶解时间的选择63

2、.3.1.4木瓜蛋白酶加酶量的选择73.3.2木瓜蛋白酶酶解牛皮胶原蛋白的正交试验73.4复合酶酶解工艺优化93.4.1复合蛋白酶酶解牛皮胶原蛋白的单因素试验93.4.1.1加酶量的选择93.4.1.2pH值的选择93.4.1.3酶解温度的选择103.4.1.4酶解时间的选择103.4.2复合酶酶解牛皮胶原蛋白正交试验114结论12致谢13参考文献14摘要：本文研究了酶解法提取牛皮胶原蛋白小分子肽的工艺条件。以牛皮胶原蛋白的水解度作为指标，分别研究木瓜蛋白酶和复合蛋白酶对牛皮胶原蛋白的酶解效果，通过采用单因素试验和正交试验得到优化的工艺条件。正交试验表明，

3、两种酶分别酶解时，酶解时间、温度、pH值、加酶量对牛皮胶原蛋白水解度的影响顺序均为：温度>pH值>加酶量>时间；木瓜蛋白酶酶解的优化条件是温度55。C、ph值6.5、时间6h、加酶量6000U/g，在该优化条件下牛皮胶原蛋白的水解度可以达到23.1%；复合蛋白酶酶解的优化条件是：温度55。C、时间8h、pH值8.0、加酶量8000U/g，在该优化条件下牛皮胶原蛋白的水解度可以达到35.9%。复合蛋白酶的对牛皮胶原蛋白的酶解效果优于木瓜蛋白酶。关键词：胶原蛋白；胶原肽；酶解法；水解度Abstract:Thisessaystudiesontheextracti

4、onconditionsofcowhidecollagensmallpeptidesusingenzymaticmethod.Usingdegreeofhydrolysisofcowhidecollagenasindicators,studytheenzymaticeffectcausedbypapainandcomplexproteaserespectivelyandthenderiveoptimizedconditionsbysinglefactorexperimentandorthogonalexperiment.Orthogonalexperime

5、ntshowsthatwhentwoenzymesworkingrespectively,theorderofinfluencecausedbyenzymolysistime、temperature、pHnalueandaddingquantityofenzymeonhydrolysisdegreeofcowhidecollagen:temperature>pHvalue>addingquantityofenzyme>time;Theoptimizedconditionsofpapainenzymolysisis:temperatureof55℃、pHva

6、lueof6.5、timeof6h、enzymeconcentrationof6000u/gandunderthisconditionthehydrolysisdegreeofcowhidecollagencanachieve23.1%.Thecomplexproteaseenzymolysisconditionis:temperatureof55℃、timeof8h、pHvalueof8.0、enzymeconcentrationof8000u/gandunderthisconditionthehydrolysisdegreeofcowhidecolla

7、gencanachieve35.9%.Theenzymolysiseffectcausedbycomplexproteaseisbetterthanthatofpapain.Keywords:Collagen;Collagenpeptide;Enzymatic;Degreeofhydrolysis1.前言我国是皮革生产大国之一，每年生产30万吨以上的皮革废渣，利用这些工业废弃物酶解来制备胶原多肽，使其变废为宝，不仅减少环境污染，还能带来良好的社会效益和经济效益。但是由于酶自身的缺点，如高度的底物专一性，易变敏感性，水解率偏低等，导致工业化生产的成本较高，产

8、品价格昂贵。所以寻找热稳定性好的胶原蛋白酶，改进各种水解工艺条件，