酶解法提取牛皮胶原蛋白的条件优化【毕业设计】

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1、本科毕业设计（20__届）酶解法提取牛皮胶原蛋白的条件优化目录0前言11材料与方法21.1实验材料21.1.1原料来源21.1.2酶制剂21.1.3仪器与设备21.1.4试剂21.2测定方法21.2.1酶活的测定21.2.2牛皮中胶原蛋白含量的测定21.3工艺流程31.4操作要点31.4.1原料预处理31.4.2酶法提取牛皮胶原蛋白31.5试验方法41.5.1酶及提取介质的选择41.5.2复合酶的复合比确定41.5.3酶提取的单因素实验41.5.4酶提取的最佳工艺条件正交实验42结果与分析52.1牛皮中胶原蛋白含量的测定结果52.1.1羟脯氨酸标准曲线

2、的绘制52.1.2牛皮中羟脯氨酸含量的测定结果52.2酶活测定结果62.3酶及提取介质对牛皮胶原蛋白提取率的影响62.4复合酶的不同复合比对牛皮胶原蛋白提取率的影响72.5酶提取的单因素实验结果72.5.1料液比对牛皮胶原蛋白提取率的影响72.5.2酶提时间对牛皮胶原蛋白提取率的影响82.5.3酶提温度对牛皮胶原蛋白提取率的影响92.5.4加酶量对牛皮胶原蛋白提取率的影响102.5.5乙酸浓度对牛皮胶原蛋白提取率的影响102.6酶提取的最佳工艺条件正交实验结果113结论12致谢12参考文献12附录14摘要：胶原蛋白具有良好的物理性能和生物学特性，因而应

3、用于化工、食品、医学等诸多领域。本文以牛肉制品的下脚料——牛皮为原料，以胶原蛋白提取率作为指标，比较水和0.5mol/L的乙酸溶液两种不同的介质对牛皮胶原蛋白提取率的影响，得出采用酸酶结合法更利于牛皮胶原蛋白的提取。此外，在酶的选择上通过比较试验，最后选择复合酶（木瓜蛋白酶与胃蛋白酶按1:1酶活比例复合）作为试验用酶。在此基础上，本实验又通过单因素试验和正交试验对牛皮酶解工艺条件进行了优化，实验结果表明酶提取的最优条件为：以0.5mol/L的乙酸溶液为提取介质，料液比（m/V）为1:25，酶提温度为42℃，酶提时间为8h，加酶量为3000U/g，牛皮胶

4、原蛋白的提取率高达90.56%。关键词：牛皮；酶解；胶原蛋白；复合酶Abstract:Duetocollage’smanyfavorablephysicalandbiologicalcharacteristics,ithasawiderangeofapplicationsinmanyareas.Inthispaper,freshcowhideasrawmaterialandtheextractionrteofcollagenasindex,theenzymicextractmethodcombingwithaceticacidisconsiderera

5、wonderfulmethodandgreatlyimprovestherate,whencomparingtheenzymicextractmethodcombingwithwater.Onthechoiceoftheenzymes,thecompoundenzymethatthepepsinandthepapainarecompoundedby1:1proportionisregardedastheenzymeofextractingcollagen.Throughthesinglefactorexperimentandtheorthogonale

6、xperiment,theoptimalconditionsareconfirmed.Experimentalresultsshowthattheoptimumextractionconditionsareobtainedasfollow:0.5mol/Laceticacidasextractionmedia,therationofmaterialtoliquor125,theenzymeconcentrationfor3000U/g,andextractionat42℃for8h,andtheextractionrateofcollagenis90.

7、56%.Keywords:Cowhide;enzymaticextraction;collagen;thecompoundenzyme0前言胶原蛋白是一种白色、不透明、无支链的纤维蛋白质[1]。胶原蛋白是哺乳动物体内含量最丰富、分布最广泛的蛋白质。胶原蛋白在脊椎动物体内占蛋白质总量25%-30%，占腱和骨骼的细胞外蛋白质总量90%以上，其中动物皮中胶原蛋白含量达到50%以上[2]。胶原蛋白是结缔组织极重要的结构蛋白质，是动物结缔组织中的骨、软骨、皮肤、腱、韧等的主要成分，对机体和脏器起着支持、保护、结合以及形成界隔等作用[3-4]。胶原蛋白是细胞外基质

8、（ECM）的主要成分，分子量为300ku左右。胶原蛋白最普遍的结构特征是三螺旋结构，其由3条α