细胞工程二轮复习

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1、专题2细胞工程1996年7月5日,世界第一只-----克隆羊多利,动物体细胞克隆技术，也揭开细胞工程更深层次发展的序幕!直击考纲5-2生物技术在食品加工及其他方面的应用（2）植物组织培养（新增）掌握程度参考本考试说明中的：一、考核目标与要求（二）实验与探究能力知识内容要求6-2克隆技术（1）植物的组织培养（2）动物的细胞培养与体细胞克隆（3）细胞融合与单克隆抗体ⅡⅠⅡ生物技术实践构建框架细胞工程植物细胞工程动物细胞工程植物组织培养植物体细胞杂交技术原理步骤意义原理步骤意义动物细胞培养技术动物核移植技术和克隆动物应用植物繁衍的新途径植物新品种的培育细胞产物的工业化生

2、产微型繁殖作物脱毒单倍体育种人工种子突变体的利用——蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等动物细胞融合——细胞膜的流动性和细胞全能性——植物细胞的全能性可证明高度分化的植物细胞，仍具有形成完整植株所需要的全部遗传信息。—去壁、诱导融合、筛选、植物组织培养单克隆抗体制备1、概念：在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。2、过程：外植体愈伤组织根、芽植物体二、植物组织培养技术（重点理解）：再分化脱分化外植体如：茎尖、根尖适宜的温度、PH值、养料、激素、充足氧气条

3、件生长素、细胞分裂素（需光）无定形状态排列疏松、无规则无叶绿体,实验胡萝卜的组织培养技术原理：植物根、茎、叶一般都具有全能性，在一定的营养和激素等条件下，可以形成,将愈伤组织转接到含有不同激素成分的培养基上，就可以诱导其生成胚状体或丛芽，进而发育成完整的小植株。证明：分化的植物细胞，人具有形成完整植株所需要的。愈伤组织再分化全部基因脱分化原生质体番茄细胞原生质体融合再生出细胞壁杂种细胞脱分化愈伤组织杂种植株再分化三、植物体细胞杂交技术（重点理解）：1、过程：马铃薯细胞标志：成功融合人工诱导去壁植物组织培养植物细胞的融合直击考纲5-2生物技术在食品加工及其他方面的应

4、用（2）植物组织培养（新增）掌握程度参考本考试说明中的：一、考核目标与要求（二）实验与探究能力知识内容要求6-2克隆技术（1）植物的组织培养（2）动物的细胞培养与体细胞克隆（3）细胞融合与单克隆抗体ⅡⅠⅡ生物技术实践动物细胞工程动物细胞培养技术动物细胞核移植技术和克隆动物动物细胞融合单克隆抗体制备原理—细胞分裂增殖过程相关概念：原代培养、传代培养、贴壁生长、接触抑制、细胞株、细胞系条件—无菌、无毒的环境，营养，温度和PH，气体环境受体细胞：分类胚胎细胞核移植体细胞核移植应用：重要价值的生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等过程意义原理—细胞膜具有一定的流动性和

5、细胞分裂增殖过程诱导动物细胞融合的方法物理法化学法灭活的病毒过程单克隆抗体的优点—特异性强、灵敏度高，并可能大量制备单克隆抗体的应用作为诊断试剂用于治疗疾病和运载药物去掉细胞核的卵母细胞中：证明动物细胞核具有全能性归纳过程取的组织、器官细胞悬浮液酶贴满瓶壁的细胞单个细胞加入液动物胚胎或幼龄动物胰蛋白培养接触抑制原代培养(分装前)1-10代细胞遗传物质改变原代细胞培养加液40—50代细胞(细胞株)未遗传物质改变无限传代（细胞系）已传代培养胰蛋白酶有关概念原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。一般培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。传代培养

6、：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。细胞接触抑制细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易

7、传代培养。1、无菌、无毒的环境保证细胞顺利的生长增殖添加一定量的抗生素，定期更换培养液添加：糖（葡萄糖）、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等。动物细胞培养的条件2、营养3、温度和PH培养室中控制,使之达到36.5±0.5℃,7.2~7.4培养箱中提供O2和CO2（95%空气和5%CO2）4、气体环境：去核卵细胞供体细胞电刺激使两细胞融合重组细胞重组胚胎新个体代孕母牛C胚胎移植卵细胞培养—①卵母细胞比较大，容易操作②细胞质多，营养丰富③含促进核全能性表达的物质动物体细胞的核移植过程高产奶牛A供体细胞培养供卵奶牛B无性生殖用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程

8、细胞核病毒