细胞工程复习

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时间:2019-05-14

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1、细胞工程复习细胞工程基础1、细胞工程:是指以生物细胞或组织为研究对象,按照人们的意愿进行工程学操作,从而改变生物性状,以获得生物产品,为人类生产和生活服务的科学。2、细胞工程的研究内容可分为七大类:1)器官、组织和细胞培养2)原生质体培养3)植物胚胎培养4)动物胚胎培养5)转基因动植物6)胚胎干细胞7)染色体工程3、实验室组成1)动物细胞工程实验室组成:无菌操作室、培养室、细胞学鉴定室、制备室、储藏室、清洗灭菌室2)植物细胞工程实验室组成:无菌操作室、制备室、清洗灭菌室以及具备光照条件的培养室和试管苗移栽所需的温室4、玻璃器皿清洗注意事项

2、1)浸泡:用水浸泡——①初次使用:经稀盐酸(5%)浸泡;②用过的:用后立即用清水浸泡。2)刷洗:宜选用软毛刷和优质的洗涤剂。器皿数量大时,可使用超声波清洗器清洗,冲洗干净3)酸洗:刷洗不掉的微量杂质经过清洗液的强氧化作用可被除掉。常用的清洗液:浓硫酸、重铬酸钾及蒸馏水配制而成。具有高度腐蚀性,酸缓慢放入水中。4)冲洗:用水充分冲洗,不留任何残迹,然后用蒸馏水漂洗数次,烘箱内烘干备用。5、物理灭菌方法1)湿热灭菌2)过滤除菌3)干热灭菌4)紫外线灭菌6、化学灭菌方法:1)熏蒸消毒;2)药剂喷雾消毒7、无菌操作室消毒8、培养基的成分(植物):

3、1、培养基的成分(动物):2、生物安全:是指对由动物、植物和微生物等生物体给人类健康和自然环境可能造成的不安全的防范,主要是针对病原微生物或具有潜在危害的重组DNA等生物危险的防范。3、生物安全实验室分为四级:植物细胞工程12、植物细胞全能性的含义:1)每个植物细胞都具有它母体的全部遗传特性2)每一个细胞都可以在特定条件下发育成为母体一样的植株。13、植物细胞具有全能性的原因14、一个已分化的细胞要实现其全能性一般要经历两个过程:一是脱分化,二再分化15、实现细胞全能性的条件:①具有较强全能性的细胞从植物组织抑制性影响下解脱出来,使其处于

4、独立发育的离体条件下;②赋予离体细胞一定刺激,包括营养物质、植物激素、光周期、温度,酸碱度16、细胞分化:是指由发育起始状态的合子沿个体发育方向不断分化形态结构、生理功能不同的细胞、组织、器官而最终形成完整植株的过程,即由于细胞的分工而导致其结构和功能改变或发育方式改变的过程。17、分化细胞差异与功能相适应,其含义为:18、在一个分化的成熟细胞中,通常仅5%~10%的基因处于活化状态。19、脱分化(去分化)20、高等植物细胞脱分化和再分化示意图21、植物愈伤组织22、分类23、长期培养物形态发生潜力的丧失(三种学说)1)生理学说2)遗传学

5、说3)竞争学说24、外植体的极性:通常是指在器官、组织甚至细胞中,在不同的轴向上存在某种形态结构和生理生化上的梯度差异。25、植物激素对愈伤组织培养的调控作用:(1)生长素(2)细胞分裂素(3)脱落酸(4)乙烯26、器官发生:是指植物根、茎、叶、花、果实等器官的分化与形成。器官发生的三种方式:第一种是先形成芽,然后在芽形成的茎基部长根而形成小植株:第二种是先根后芽第三种是在愈伤组织的不同部位分别形成芽和根,然后两者结合起来形成一株植物,这种情况在很多植物中均发生。27、体细胞胚(SE)或胚状体的含义:①体细胞胚是离体培养的产物,只限于离体

6、培养范围使用,以区别体于无融合生殖胚;②体细胞胚起源于非合子细胞,区别于由受精卵发育而成的合子胚;③体细胞经过了胚胎发育过程,具有胚根、胚芽和胚轴的完整结构,并与原外植体的微管组织无联系,是个相对独立的个体,区别于组织培养中以器官发生方式分化的不定芽和不定根。与器官发生相比,体细胞胚胎发生在组织学上具有明显的特点:第一、体细胞胚最根本的特征为两极性第二、体细胞胚的微管组织分布是独立的“Y”字形结构,与外植体组织无结构上的联系,出现所谓的生殖隔离现象,这种结构便于细胞的分化和全能性的分化第三、由体细胞胚形成的再生植株其遗传性相对稳定,差异性

7、远小于由器官发生途径形成的再生植株28、影响体细胞胚胎发生的因素1、氮源2、生长素3、组织起源29、P56人工种子示意图30、控制胚性细胞同步化的方法1、抑制剂法促进细胞同步分裂2、低温处理促进细胞同步分裂3、渗透压控制同步化法4、同步胚的分段收集筛选法5、通气法动物细胞培养技术1、动物细胞培养是用无菌操作的方法将动物细胞体内的组织或器官取出,模拟动物体内的生理条件,在体外进行培养,并观察细胞的生长、发育及衰老等生命现象的技术2、生物学特征的两重性1、基本生物学特征与体内细胞相似1、差异性3、细胞分化;在个体发育中,细胞后代在形态结构和功

8、能上发生稳定性差异过程。4、去分化(也叫脱分化):是指各种分化细胞,逐渐失去各自的形态与功能个性,表现出某种趋同性的过程。5、体外培养细胞的形态1、贴附型细胞:在体外培养时能贴附于支持物表面生

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