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1、苯酚-硫酸法定量测定桔梗多糖的研究作者:李妍魏建和许旭东师凤华褚庆龙【摘耍】目的建立桔梗多糖含量定量测定方法,为评价桔梗药材及新选育品种的质量提供方法。方法桔梗样品用水提取,经多级处理除去杂质制得桔梗精制多糖,精制多糖溶解与苯酚-硫酸试剂显色;用精制多糖测得桔梗多糖与葡萄糖的换算因子,采用苯酚-硫酸比色法测定桔梗样品中多糖的含量。结果建立了-种苯酚-硫酸法测定桔梗多糖质量分数的方法,其平均回收率为97.54%,RSD二1.44%。对不同来源桔梗中多糖的质量分数进行测定,其范围为8.54%〜20.28%。结论此方法简便可行
2、,桔梗多糖供试液在4h内显色稳定,重复性较好,可作为桔梗多糖的测定方法。【关键词】桔梗多糖;苯酚-硫酸法;定量测定Abstract:ObjectivcAnphcnol-H2S04colorimctrymcthodwasdcvclopcdforthcdcterminationofpolysaccharidesinRadixplatycodonissamplesfromdifferentorigins,inordertoprovideascientificbasisforaqualityevaluationofbreedin
3、ggoodRadixplatycodonis・MethodsExtractedwithwater,removedtheinterferencecomponentsduringthepretreatmentproccss,andacorrcctcdfactorwasuscdinordcrtominimizcthccrrorbctweenglucoseandpolysaccharidesofdetermination,thecontentsofthepolysaccharidesinRadixplatycodonissamp
4、lesweredeterminedbyphenol-H2S04colorimetrymethod・ResultsAnphenol-H2S04colorimetrymethodfordeterminalionofpolysaccharidesinRadixplatycodonissamplesfromdifferentoriginshasbeenestablished.Theaveragerecoveryrateforthepolysaccha.rideswa.s97.54%with1.44%ofRSD(n二6)・Thec
5、ontentrangeofpolysaccharidesinRadixplatycodonisfromdifferentoriginswasfrom8・54%to20.28%・ConclusionThisdeterminationmethodissimple,practical,goodreproducibileandthecolorofthetreatedsamplescanbestabi1izedwithin4h.Keywords:Radixplatycodonis;Polysaccharide;Phenol-sul
6、furicacidcolorimetrymethod桔梗为桔梗科Campanulaceae植物桔梗PlatycodongrandiflorumADC.的根[1],是一种药食同源的食品,用途广泛。桔梗多糖是一种菊糖型多聚糖[2],是桔梗食用品质的主要评价指标。现代药理学研究发现桔梗多糖还具有多种生物活性,如免疫调节、祛痰、保肝、消炎、改善胰岛素、增强机体免疫功能及抗肿瘤等,具有广阔的开发前景[3,4]。木实验室于2001年启动了对桔梗的优良品种选育的系统研究,并于2004年首次发现了桔梗雄性不育种质,现已选育出不育率100
7、%的桔梗细胞质雄性不育系、保持系、自交4代纯系,以及紫花、粉花、白花等一批纯合品系,其品质需要依据药用或食用育种目标进行评价[5]。以往对桔梗的研究主要侧重于桔梗中的皂昔类化学成分[6〜8],而忽视了桔梗中的多糖类成分及质量控制的研究。木文首次建立了应用紫外-分光光度法测定桔梗中多糖含量的检测方法。现报道如下。1仪器、试剂与材料1.1仪器UV-1102紫外分光光度计,上海天美科学仪器有限公司产品;TB-214电子天平,北京赛多利斯仪器系统有限公司产品;数显恒温水浴锅HH-6,国华电器有限公司产品;旋转蒸发仪R-205,B
8、uCHI有限公司产胡;台式高速离心机141,ThermoELECTRONCORPORATION产品;电热恒温鼓风干燥箱DHG-9240,上海精宏实验设备有限公司产品;电冰箱BCD-233,伊莱克斯公司产品。1.2试剂苯酚,北京化学试剂公司产品;浓硫酸、无水乙醇、丙酮、乙醸、石油醴,以上试剂均为分析纯;蛋白酶,丹麦诺维