深低温停循环下神经生长因子脑保护作用探究

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1、深低温停循环下神经生长因子脑保护作用探究作者：祁泉，严勤，朱德明，蒋祖明，俞晓青,邹文艳【摘要】目的建立一种新的深低温停循环模型，研究深低温停循环(DHCA)对兔大脑皮层、海马组织中神经细胞凋亡情况，探讨DHCA下神经生长因子的脑保护作用。方法健康新西兰大白兔幼兔(0.5kg)20只，随机均分为2组：实验组(给予生长因子)和对照组(不给予生长因子)。在DHCA前、后不同时间窗监测血清S100B含量，并采用原位末端标记法(TUNEL染色法)观察和测定脑组织神经细胞凋亡的情况。对照分析两组不同时间窗S100B的变化以及神经细胞凋亡的情况。结果实验组幼兔在DHCA后神经

2、细胞凋亡数目显著减少(P<；0.05),在DHCA后30min(T2)、1h(T3)、3h(T4)、5h(T5)、12h(T6)5个时间窗血清S100B蛋白含量明显低于对照组(P<；O.05)o结论给予外源性神经生长因子能明显抑制海马以及皮层神经细胞的凋亡，对深低温停循环后的神经细胞有良好的保护作用。【关键词】深低温停循环；神经生长因子Abstract：OBJECTIVEToestablishamodelofdeephypothermiecirculatoryarrest(DHCA)andstudytheneuralapoptosisinthehippoc

3、ampusandcerebralcortex,investigatetheprotectiveeffectsofnervegrowthfactor(NGF)duringDHCA.METHODSTwentyhealthybabyrabbit(0.5kg)wererandomlydividedintotwogroups(10rabbitspergroup):studygroup(preconditioningwithNGF)andcontrolgroup(withoutNGF).S100Bcontentofbloodtakenindifferentwindowarou

4、ndDHCAwasmeasured・NeuralapoptosiswasidentifiedbyTUNELinhippocampusCAIregionandcerebralcortexofbrain.ComparelyanalysisthechangeofS100Bandtheexpressionofneuralapoptosisinthehippocampusandcerebralcortexbetweentwogroup.RESULTSThenumberofneuralapoptoticcellsinstudygroupweredecreasedsignifi

5、cantlyduringDHCA(P<；0.05).SerumS100BlevelsweresignificantlydifferenceatpostDHCA30min(T2),lh(T3),3h(T4),5h(T5),12h(T6)betweentwogroup(P<；0.05).CONCLUSIONExogenousNGFinhabitNeuralapoptosisofhippocampusandcerebralcortexandhasaprotectiveeffectonneuronalinjuryinducedbyDHCA.Keywords:Dee

6、phypothermiecirculatoryarrest；Nervegrowthfactor深低温停循环(deephypothermiccirculatoryarrest,DHCA)能为心脏及大动脉手术提供一个无血最佳手术视野，但停循环可使全身重要器官尤其是大脑处于缺血、缺氧状态，造成一定程度上的脑组织损伤，如何预防这种损伤是近年来的研究热点。近期许多研究证明神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)可通过多种机制减少缺血/再灌注神经元的凋亡［1-3］,同时已有研究证明S1OOB蛋白可作为体外循环(extracorporealcirculatio

7、n,ECC)心脏手术后评价脑损伤的可信指标［4］。因此本实验拟采用颈总动脉与锁骨下动脉阻断的DHCA模型，以S1OOB蛋白为标准观察NGF对DHCA下脑组织神经细胞凋亡等损伤的影响，探讨DHCA下的脑保护方法，为后期研究提供理论依据。1材料和方法1.1材料与分组实验动物选用健康新西兰大白兔幼兔(上海松江实验动物中心)20只，雌雄各半，体重0.5kg,随机分为2组，每组10只。实验组：DHCA中给予NGF；对照组：DHCA中不给予NGF。1.2麻醉与监护每只动物在实验前禁食6h,速眠新(0.3ml/kg)诱导后气管插管，呼吸机(Newpont100)辅助呼吸,呼吸道

8、内正压通气