天然脑活素促细胞增殖及抗细胞衰老作用探究

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1、天然脑活素促细胞增殖及抗细胞衰老作用作者：李映红吴正治吴伟康李明张晓丽陈茵杨敏【摘要】目的：探讨天然脑活素对人胚肺二倍体成纤维细胞(MRC-5)增殖能力和复制性衰老的影响及其机理。方法：光镜下观察MRC-5细胞衰老表型，常规计数细胞代龄、传代速度，MTT法检测细胞增殖活度，X・Gal染色法观察细胞衰老情况，计数衰老细胞百分率。结果：天然脑活素可维持细胞的非衰老表型，增加MRC-5细胞代龄，天然脑活素孵育MRC-5细胞的细胞增殖能力较空白老龄对照组明显升高(P<0.05),细胞的增殖速度显著加快。另外，天然脑活素连续

2、培养的细胞在老龄阶段衰老细胞数显著低于老龄对照细胞(P<0.01)0结论：天然脑活素可升高MRC-5细胞增殖能力，有效延缓细胞的复制性衰老。【关键词】天然脑活素；人胚肺成纤维细胞；增殖活度；复制性衰老；延缓(Abstract)ObjectiveToexploretheeffectsofNaturalCerebrolysinoncellproliferationactivityandreplicativesenesceneeofhumanembryoniclungdiploidfibroblasts(MRC-5cel

3、ls)anditsmechanism・MethodsToobservethechangesofsenescentphenotypebylightmicroscope,countthepassageagesandvelocity,detectthepotentialofcellproliferationbyMTT・ThechangesofcellssenesceneeofNaturalCerebrolysin・effectedMRC-5cellswerestudiedbyX-Galstainingmethod,and

4、thepositivecellratesofsenescencecellsweredetectedandanalyzed・ResultsNaturalCerebrolysinmaintainedunalteredcellmorphologyandincreasedlifespanofMRC-5byatleast18-21passages・Comparingwiththecontrolseniumcells,theproliferationpotentialofMRC-5cellsincubatedwithNatur

5、alCerebrolysinwasincreasedobviously(P<0.05),andthepassagevelocitywasenhanceddoubleofthatofthecontrolseniumcells(P<0.01).Inaddition,thepositivecellrateofsenesceneecellswassignificantlylowerinlatepassagecellsinsequeneedmultigenerationcultureinNaturalCerebr

6、olysinthanthoseofcontrolseniumcells(P<0.01),andsimilartothoseofyoungcells・ConelusionAsaresult,weconeludedthatNaturalCerebrolysincouldnotablypromotetheproliferationactivityofMRC-5cellsanddelaythecellsreplicativesenesceneeefficiently.(KeyWords〕NaturalCerebrol

7、ysin;Humanembryoniclungdiploidfibroblasts;Proliferationactivity;Delay;Replicativesenescence衰老(senescence)是细胞的重要生命现象之一，绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力，当其经过一定的倍增之后，将进入终末增殖状态，称为细胞衰老。一般来讲，人类胚胎的成纤维细胞在达到衰老时，能够复制50代左右(PopulationDoublings,Pds),由于这种衰老是由分裂传代而达到的，故又称之为复制性衰老(replica

8、tivesenescence)[1]o探讨细胞衰老的分子机理是人类认识自我研究的重要组成部分，从分子水平研究衰老过程中基因及调控变化，已成为目前衰老机理研究的主要方向，同时研究开发延缓衰老的药物将为提高人类生存质量提供重要保证，也为衰老相关疾病的防治提供理论基础和实验依据。天然脑活素为结合临床经验和现代药效学正交实验优化筛选而成，本研究在以往基础上以人胚肺二