课程总结：生物大分子分离纯化的总体策略

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1、［井期预测未来最好的方法就是把它创造.出来。—罗曼・罗兰［法国］生物化学实验基础段训练总结啖命丈今&汤质的欖质及制备斫宪的基瘁战略概述生物大分子主耍是指蛋白质、酶（也是一种蛋白质）和核酸，这三类物质是生命活动的物质基础。在自然科学，尤其是生命科学高度发展的今天，蛋白质、酶和核酸等生物大分子的结构与功能的研究是探求牛命奥秘的屮心课题，而牛物人分子结构与功能的研究，必须首先解决生物大分子的制备问题，没有能够达到足够纯度的生物大分子的制备丄作为前题,结构与功能的研究就无从谈起。与化学产品的分离制备相比较

2、，主物人分子的制备有以卜•主耍特点：⑴牛•物材料的组成极其复杂，常常包含有数百种乃至儿T种化合物。具屮许多化合物至今还是个谜，冇待人们研究与开发。有的生物大分了在分离过程中还在不断的代谢，所以生物大分子的分离纯化方法差别极大，想找到一种适合各种生物人分子分离制备的标准方法是不可能的。⑵许多生物大分了在生物材料中的含量极微，只冇万分Z—、几十万分Z—，甚至几百万分之一。分离纯化的步骤繁多，流程乂长，有的目的产物耍经过十儿步、儿十步的操作才能达到所需纯度的耍求。例如由脑垂体组织取得某些激素的释放因子，

3、耍用几吨甚至几十吨的生物材料，才能提取出几毫克的样品。⑶许多牛物人分子一口离开了牛物体内的坏境时就极易失活，因此分离过程屮如何防止其失活，就是牛物人分子提取制备最困难之处。过酸、过碱、高温、剧烈的搅拌、强辐射及木身的自溶等都会使生物大分了变性而失活，所以分离纯化时一定要选川授适宜的环境和条件。⑷生物大分子的制备几乎都是在溶液中进行的，温度、pH值、离子强度等各种参数对溶液中各种组成的综合影响，必须权衡利弊，综合考虑。因而实验结果常冇很大的经验成份,个人的实验技术水平和经验对实验结果会有较大的影响。

4、正是由于牛物人分子的分离和制备是如此的复杂，因而实验方法和流程的设计就必须尽可能多查文献，多参照前人所作的工作，吸取其经验和精华，探索中的火败和反复是不可避免的，但是具乐趣与智慧也正体现于此。生物大分子的制备通常可按以下步骤进行：①确定要制备的生物大分子的目的和要求，是进行科研、开发还是要发现新的物质。②建立相应的可靠的分析测定方法，这是制［井期预测未来最好的方法就是把它创造.出来。—罗曼・罗兰［法国］生物化学实验基础段训练总结啖命丈今&汤质的欖质及制备斫宪的基瘁战略概述生物大分子主耍是指蛋白质、

5、酶（也是一种蛋白质）和核酸，这三类物质是生命活动的物质基础。在自然科学，尤其是生命科学高度发展的今天，蛋白质、酶和核酸等生物大分子的结构与功能的研究是探求牛命奥秘的屮心课题，而牛物人分子结构与功能的研究，必须首先解决生物大分子的制备问题，没有能够达到足够纯度的生物大分子的制备丄作为前题,结构与功能的研究就无从谈起。与化学产品的分离制备相比较，主物人分子的制备有以卜•主耍特点：⑴牛•物材料的组成极其复杂，常常包含有数百种乃至儿T种化合物。具屮许多化合物至今还是个谜，冇待人们研究与开发。有的生物大分了

6、在分离过程中还在不断的代谢，所以生物大分子的分离纯化方法差别极大，想找到一种适合各种生物人分子分离制备的标准方法是不可能的。⑵许多生物大分了在生物材料中的含量极微，只冇万分Z—、几十万分Z—，甚至几百万分之一。分离纯化的步骤繁多，流程乂长，有的目的产物耍经过十儿步、儿十步的操作才能达到所需纯度的耍求。例如由脑垂体组织取得某些激素的释放因子，耍用几吨甚至几十吨的生物材料，才能提取出几毫克的样品。⑶许多牛物人分子一口离开了牛物体内的坏境时就极易失活，因此分离过程屮如何防止其失活，就是牛物人分子提取制备

7、最困难之处。过酸、过碱、高温、剧烈的搅拌、强辐射及木身的自溶等都会使生物大分了变性而失活，所以分离纯化时一定要选川授适宜的环境和条件。⑷生物大分子的制备几乎都是在溶液中进行的，温度、pH值、离子强度等各种参数对溶液中各种组成的综合影响，必须权衡利弊，综合考虑。因而实验结果常冇很大的经验成份,个人的实验技术水平和经验对实验结果会有较大的影响。正是由于牛物人分子的分离和制备是如此的复杂，因而实验方法和流程的设计就必须尽可能多查文献，多参照前人所作的工作，吸取其经验和精华，探索中的火败和反复是不可避免的

8、，但是具乐趣与智慧也正体现于此。生物大分子的制备通常可按以下步骤进行：①确定要制备的生物大分子的目的和要求，是进行科研、开发还是要发现新的物质。②建立相应的可靠的分析测定方法，这是制备生物大分子的关键，因为它是整个分离纯化过程的“眼睛”。③通过文献调研和预备性实验，掌握生物大分子目的产物的物理化学性质。④生物材料的破碎和预处理。⑤分离纯化方案的设计和探索，这是最关键也是最体现研究者智慧的环节。⑥生物大分子制备物的均一性（即纯度）的鉴定，要求达到一维电泳一条带，二维电泳一个点，或HP