课程总结生物大分子分离纯化的总体策略

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1、预测未来最好的方法就是把它创童出来。一一罗曼・罗兰［法国］生物化学实验基础段训练总结或命丈今&汤质的徃质及制备罚究的基確战略概述生物大分子主要是指蛋白质、酶(也是一种蛋白质)和核酸，这三类物质是生命活动的物质基础。在自然科学，尤其是生命科学高度发展的今天，蛋白质、酶和核酸等生物大分子的结构与功能的研究是探求生命奥秘的中心课题，而生物大分子结构与功能的研究，必须首先解决生物大分子的制备问题，没有能够达到足够纯度的生物大分子的制备工作为前题,结构与功能的研究就无从谈起。与化学产品的分离制备相比较，生物大

2、分子的制备有以下主要特点：(1)生物材料的组成极其复杂，常常包含有数百种乃至儿千种化合物。其中许多化合物至今还是个谜，有待人们研究与开发。有的生物大分子在分离过程中还在不断的代谢，所以生物大分子的分离纯化方法差别极大，想找到一种适合各种生物大分子分离制备的标准方法是不可能的。⑵许多生物大分子在生物材料中的含量极微，只有万分之一、几十万分之一，甚至几百万分之一。分离纯化的步骤繁多，流程又长，有的目的产物要经过十儿步、儿十步的操作才能达到所需纯度的要求。例如市脑垂体组织取得某些激素的释放因子，要用几吨甚

3、至几十吨的生物材料，才能提取出几毫克的样品。⑶许多生物大分子一旦离开了生物体内的环境时就极易失活，因此分离过程中如何防止其失活，就是生物大分子提取制备最困难之处。过酸、过碱、高温、剧烈的搅拌、强辐射及本身的自溶等都会使生物大分子变性而失活，所以分离纯化时一定要选用最适宜的环境和条件。⑷生物大分子的制备几乎都是在溶液中进行的，温度、pH值、离子强度等各种参数对溶液中各种组成的综合影响，必须权衡利弊，综合考虑。因而实验结果常有很大的经验成份,个人的实验技术水平和经验对实验结果会有较大的影响。正是rti于

4、生物大分子的分离和制备是如此的复杂，因而实验方法和流程的设计就必须尽可能多查文献，多参照前人所作的工作，吸取其经验和精华，探索中的失败和反复是不可避免的，但是其乐趣与押慧也正体现于此。生物大分子的制备通常可按以下步骤进行：①确定要制备的生物大分子的目的和要求，是进行科研、开发还是要发现新的物质。②建立相应的可靠的分析测定方法，这是制预测未来最好的方法就是把它创童出来。一一罗曼・罗兰［法国］生物化学实验基础段训练总结或命丈今&汤质的徃质及制备罚究的基確战略概述生物大分子主要是指蛋白质、酶(也是一种蛋白

5、质)和核酸，这三类物质是生命活动的物质基础。在自然科学，尤其是生命科学高度发展的今天，蛋白质、酶和核酸等生物大分子的结构与功能的研究是探求生命奥秘的中心课题，而生物大分子结构与功能的研究，必须首先解决生物大分子的制备问题，没有能够达到足够纯度的生物大分子的制备工作为前题,结构与功能的研究就无从谈起。与化学产品的分离制备相比较，生物大分子的制备有以下主要特点：(1)生物材料的组成极其复杂，常常包含有数百种乃至儿千种化合物。其中许多化合物至今还是个谜，有待人们研究与开发。有的生物大分子在分离过程中还在不

6、断的代谢，所以生物大分子的分离纯化方法差别极大，想找到一种适合各种生物大分子分离制备的标准方法是不可能的。⑵许多生物大分子在生物材料中的含量极微，只有万分之一、几十万分之一，甚至几百万分之一。分离纯化的步骤繁多，流程又长，有的目的产物要经过十儿步、儿十步的操作才能达到所需纯度的要求。例如市脑垂体组织取得某些激素的释放因子，要用几吨甚至几十吨的生物材料，才能提取出几毫克的样品。⑶许多生物大分子一旦离开了生物体内的环境时就极易失活，因此分离过程中如何防止其失活，就是生物大分子提取制备最困难之处。过酸、过

7、碱、高温、剧烈的搅拌、强辐射及本身的自溶等都会使生物大分子变性而失活，所以分离纯化时一定要选用最适宜的环境和条件。⑷生物大分子的制备几乎都是在溶液中进行的，温度、pH值、离子强度等各种参数对溶液中各种组成的综合影响，必须权衡利弊，综合考虑。因而实验结果常有很大的经验成份,个人的实验技术水平和经验对实验结果会有较大的影响。正是rti于生物大分子的分离和制备是如此的复杂，因而实验方法和流程的设计就必须尽可能多查文献，多参照前人所作的工作，吸取其经验和精华，探索中的失败和反复是不可避免的，但是其乐趣与押慧

8、也正体现于此。生物大分子的制备通常可按以下步骤进行：①确定要制备的生物大分子的目的和要求，是进行科研、开发还是要发现新的物质。②建立相应的可靠的分析测定方法，这是制备生物大分子的关键，因为它是整个分离纯化过程的“眼睛”。③通过文献调研和预备性实验，掌握生物大分子目的产物的物理化学性质。④生物材料的破碎和预处理。⑤分离纯化方案的设计和探索，这是最关键也是最体现研究者智慧的环节。⑥生物大分子制备物的均一性（即纯度）的鉴定，要求达到一维电泳一条带，二维电泳一个点，或HPLC