微生物综合实验

《微生物综合实验》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、微生物学综合实验实验一土壤中微生物的分离与计数实验二理化因子对微生物的影响实验三环境条件对微生物生长的影响实验一土壤中微生物的分离与计数实验目的掌握从土壤中分离、计数细菌和霉菌的方法实验原理土壤是微生物生活的大本营，是寻找和发现有重要应用潜力的微生物的主要来源。不同土样中微生物的种类和数量各不相同，一般土壤中细菌的数量最多，其次是放线菌和霉菌。分离微生物时，常根据目的微生物特殊的营养要求，供给只适于他们生长而不利于其他微生物生长的特殊生存条件，或加入某种限制因子抑制其他微生物的生长，以筛选出目标微生物。本实验以采集的土壤为样品，利用平板分

2、离法从中分离出细菌和霉菌。实验材料1菌源：采集的土样。2培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、马丁培养基。3试剂：无菌生理盐水4器材：恒温箱、培养皿、移液管、涂棒、玻璃珠、称量纸等。实验步骤1制备土壤稀释液2细菌、霉菌分离3培养细菌37℃培养1-2d霉菌28℃培养2-3d4平板菌落计数同一稀释度的3个平板上菌落平均数*稀释倍数微生物活细胞数（个/克）=含菌样品克数土壤稀释液的制备①称取土样10g，放入盛90ml无菌水三角瓶中，振荡15～20分钟，使微生物细胞分散，静置约20～30秒，即成10-1的土壤悬液。②另取装有9ml无菌水的试管，编号为10-

3、2、10-3、10-4、10-5、10-6及10-7，用无菌吸管吸取10-1土壤悬液lml，加入编号10-2的无菌试管中，吹吸三次，使之混合均匀，即成10-2的土壤稀释液。再用另一支吸管吸取10-2试管中的土壤稀释液1ml，加入编号10-3的无菌试管中，轻轻摇动，使之混合均匀，即成10-3的土壤稀释液，一定要每次更换一支无菌吸管（连续稀释）。同法依次分别稀释成10-4、10-5和10-6等一系列稀释度菌悬液。平板制作将无菌培养皿编上10-5、10-6号码，每一号码设三个重复，用1ml无菌吸管按无菌操作要求吸10-6稀释液各1ml，分别放入

4、编号10-6的三个培养皿中。同法吸取10-5稀释液各1ml，分别放入编号10-5的三个培养皿中。（细菌取10-5、10-6，霉菌取10-3、10-4）然后在6个培养皿中分别倒入15ml已融化并且冷却至45℃左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，加盖后轻轻摇动培养皿，使培养基均匀分布，平置于桌面上，待凝固后即成平板。整个操作过程应严格按照无菌操作。纯化（平板划线法）倒平板——划线——培养——挑菌落——纯种（纯培养）isolationplate实验作业1．在你所实验的培养基平板上长出的菌落属于哪个类群？简述它们的菌落形态特征。2计算土壤中微生物的数量

5、。3分析讨论你的实验结果。实验二理化因子对微生物的影响实验目的1了解紫外线对微生物生长的影响。2了解不同化学药剂对微生物生长的影响。实验原理1紫外线对微生物有明显的致死作用，使细菌致死的紫外线波长是200-310nm，而以260nm左右的紫外线具有最高杀菌效应。作用机理是诱导胸腺嘧啶二聚体的生成，从而抑制DNA的复制。经紫外线照射受损伤的细菌细胞，如立即暴露于可见光下，则有一部分可恢复正常活力，称为光复活现象。2一些化学药剂对微生物的生长有抑制或杀死作用，因此，在实验室内及生产上常利用某些有效的化学药剂进行杀菌或消毒。不同的化学药剂对不同

6、的细菌，杀菌能力并不相同，而一种化学药剂对不同细菌的杀菌效果也不一致。实验材料1菌种大肠杆菌、枯草杆菌2培养基牛肉膏蛋白胨培养基3器材与试剂滤纸、镊子、培养皿、涂棒、化学药剂待定实验方法1紫外线对微生物的影响倒平板用无菌吸管取1ml大肠杆菌菌悬液用无菌涂棒涂平板将培养皿放于紫外灯下照射1min；后打开皿盖，放上纸板，照射2min。盖上皿盖。取出培养皿，用黑色纸包裹。37℃培养1d。观察结果。2化学药剂对微生物的影响在皿底上划分几个区域，标上1、2、3、4等倒平板用无菌吸管分别取1ml大肠杆菌、枯草杆菌菌悬液用无菌涂棒涂平板无菌操作打开皿盖

7、，用无菌镊子夹取一张滤纸片，沾上化学药剂，后放于平板上。37℃培养1d。观察结果。如有抑制作用，则滤纸片周围有抑菌圈，根据抑菌圈的大小表示抑菌剂的作用强弱。实验作业1观察实验结果，并作图。2为什么75%的乙醇对革兰氏阴性菌的作用效果好于革兰氏阳性菌？3分析你的实验结果。实验三环境条件对微生物生长的影响（一）实验目的了解温度、pH对微生物生长的影响（二）实验原理微生物生长繁殖要有一定的温度条件，不同的微生物要求不同的生长温度范围。在生长范围内又可分为最高，最适和最低三种生长温度。如温度超过最高或最低温度时，微生物均不能生长，或处于休眠状态，

8、甚至死亡。微生物的生长繁殖，需要一定的pH值范围，即环境中的氢离子浓度对微生物的生长繁殖有直接的影响，大多数细菌和放线菌适于中性或微碱性环境，酵母菌和霉菌则适于在弱酸性或酸性环境中生长，当环境