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1、黑眶蟾赊皮肤抗菌肽的制备和性质研究□□胡文婷I，张英霞】，满初日疇2,张凯-黄鑫】，陈敏洁】（1.海南大学海洋学院海洋生物实验教学中心，海口570228;2.海南大学农学院，海口570228;3.海南海灵化学制药有限公司，海口570311）摘要：收集黑眶蟾蛛皮肤分泌物，经SephadexG-25去除大分子蛋白后，利用微量测定法进行抗菌活性分析。结果发现，黑眶蟾蛛皮肤分泌物对革兰氏阳性菌一金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌的抑制抑制作用较强，对革兰氏阴性菌中的嗜水气单细胞菌也表现出较强的抑制作用，对溶藻弧菌、副溶血弧菌、河流弧
2、菌、大肠杆菌的抑制相对较弱。利用胰蛋白酶对黑眶蟾蛉皮肤抗菌肽水解后，其抗菌活性消失。将黑眶蟾烽皮肤抗菌肽在不同温度（37~95°C）和不同pH（2.5-5.0）下保温，发现其抗菌活性成分对热及酸耐受性较强。黑眶蟾蛉皮肤分泌物在低浓度无溶血活性。关键词：黑眶蟾蛛；抗菌肽；皮肤；制备；性质中图分类号：Q959.9;Q556文献标识码：A文章编号：PreparationandpropertiesofantimicrobialpeptidesfromSkinSecretionofBufoMelanostictusHUWen-t
3、ing1,ZHANGYing-xia1,MANCHURi-ga2,ZHANGKai3,HUANGXin1,CHENMin-jie1(1.ExperimentTeachingCenterofMarineBiology,CollegeofMarineScienc,HainanUniversity,Haikou57022&China;2.CollegeofAgricuLlure,HainanUniversity,Haikou570228,China;3.HailingPharmaceuticalGroup,Haikou570
4、311,China)Abstract:TheskinsecretionofBufoMelanostictuswascollected,thenpreparedbytakingoffmacromolecularproteinsonaSephadexG-25column.Antimicrobialactivitywasdeterminedinchallengedbyminiaturizedmethods.TherewereantibacterialactivitiesfortheGrampositivebacteriaSt
5、aphylococcusaureusandBacillussubtilis,andfortheGramnegativebacteriaAeromonashydrophial,weakantibacterialactivityfortheGramnegativebacteriaV.alginolyticus,V.parahaemolyficus,I7,fluvialisandEscherichiacoll.TheskinSecretionofBufoMelanostictushadnoantibacterialactiv
6、itywhenitwasdigestedwithaproteinase(trypsin),indicatingthattheantibacterialcomponentwasaprotein.ThepeptidesculturedinvariouswatertemperatureandpHvaluesshowedantimicrobialstabilityagainsttemperatureandpH,andwasnothemolyticforfishredbloodcells-Keywords:BufoMelanos
7、tictus;antimicrobialpeptides;skin;preparation;characterization收稿日期：基金项目：海南省教育厅高等学校科研资助项目（Hj2009-23）作者简介：胡文婷（1981-）,女，山东曹县人，讲师，硕士〉研究方向：生物化工，E-mail:huwenting_0@163.com两栖动物皮肤裸露、湿润，因此相对于其他动物，皮献粘液中含冇更多分了结构特殊、功能复杂多样的抗菌活性物质⑴。其中抗菌肽(anlibacierialpeptides)是免疫防卫系统产生的一类对抗外源
8、性病原体致病作用的防御性多肽活性物质，具启广谱抗菌活性和抗病壽、抗真菌、抗寄牛.虫及抗肿瘤等生物活性，口抗菌肽的独特作用机理使其不易产生抗药性，对一些农物和经济作物病原菌亦冇作用，因此冇望成为新型的人用或兽用抗菌药物⑦現黑眶蟾赊，属于两栖纲、无尾冃、蟾赊科、蟾赊属，广泛分布于我国南北地区，是常见的蟾蛛品种。屮药“蟾酥”即黑眶蟾赊或
