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《试验槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离及鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、实验二槐米中芦丁及椭皮素的提取分离及鉴定槐米为豆科植物槐（SophorajaponicaL.）的未开放花蕾。味苦性凉、具淸热凉血、止血Z功。常用于治疗多种出血症：肠风便血、痔血、尿血、血、崩漏下血、赤血下痢等。槐米常炒炭应用。槐米的主耍化学成分为芦丁，其含量可达12〜16%,其次含有懈皮素、三砧皂昔、槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米内素等。芦丁具有Vitp样作用，可降低毛细血管脆性和调节通透性。临床上用作毛细血管脆性引起的出血症，常作为高血压症的辅助治疗药。［目的要求］1•通过芦丁的提取与精制拿握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。2.掌握榊皮素的制备原理及操
2、作。3.熟悉紫外光谱在黄酮结构鉴定小的应用4.通过芦丁的结构检识，了解昔类结构研究的一般程序和方法。［实验原理］芦丁（rutin）：C27H30O16-3H2O,浅黄色针状结品，mp174〜178°C（含三分子水）；188°C（无水物）。难溶于冷水（1：8000〜10000）,可溶于热水（1：180〜200）,燕P醇（1：10）,冷甲醇（1：100）,热彌（1：60）,冷乙醉（1：650）；难溶于乙醴、三氯甲烷、石汕醴、乙酸乙酯、丙酮等，易溶于碱液。懈皮素（quercetin）：Ci5H10O7-2H2O,黄色结晶,mp313〜314°C（2分子结晶水）,3
3、16°C（无水物）。能溶于冷乙醇（仁290）,易溶于沸乙醇（1：23）,可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、毗噪、丙酮等；难溶于水、苯、石汕瞇等溶剂。肌皮素0H+鼠李糖+葡萄糖芦丁为黄酮廿，分了屮具有酚疑基，显酸性，可溶于稀碱液屮，在酸液屮沉淀析出，可利用此性质进行提取分离。利用芦丁易溶热水、热乙醇，较难溶于冷水、冷乙醇的性质选择重结晶方法进行精制。芦丁可被稀酸水解生成桝皮素及衙豹糖、鼠李糖，依此进行制备懈皮素。通过纸色谱及紫外光谱进行黄酗及糖的鉴定。［实验内容］」、芦丁的提取分离及精制方法（1）槐米粗粉（50g）置1000ml烧杯中，加入500ml饱和石灰水，加
4、热，并维持pH8〜9煮沸20分钟，趁热用脱脂棉滤过滤液药渣用300ml饱和石灰水煮沸10分钟，维持pH8〜9趁热滤过滤液药渣（X）在60€〜70匸下用浓1_10调卩日至4〜5静置，抽滤V沉淀低温（80°C）干燥，称重。按1：200的比例加水,加热使溶解，趁热滤过滤液静置,抽滤,减压干燥，计算收率▼芦J精制品方法⑵利用芦丁在冷热溶剂中的溶解度不同进行提取分离。槐米粗粉沸水煮沸5〜10分钟，反复2次趁热滤过水提取液药渣放冷沉淀析出（粗芦丁）热水重结品或乙醇垂结晶芦丁结品二、榊皮素的制备称取精品戸Jig置250ml烧瓶屮加2%H2S04200ml加热回流1小时放冷
5、，静置，抽滤酸性滤液中和中性滤液浓缩浓缩液沉淀水洗两次，干燥乙醇重结品称重，计算收率黄色细针状结晶(欄皮素)(供糖的PC鉴定)三、检识反应1.芦丁的定性反应取芦丁适最，加乙醉使溶解，分成三份供下述试验用：(1)盐酸镁粉试验：取样品液适量，加2滴浓HCI、再酌加少许镁粉，即产生剧烈的反应，并逐渐出现红色至深红色。(2)链■枸试验：取样品液适量，然后加2%ZrOCl2的甲醉溶液，注意观察颜色变化，再加入2%枸椽酸的甲醇溶液，并详细记录颜色变化。(3)a■蔡酚■浓硫酸反应：取样品液适量，加等体积的IO%a■蔡酚乙醇溶液，摇匀，沿管壁缓加浓硫酸，注意观察两液界血的颜
6、色。2.芦丁的UV(1)鉴泄试剂的配制%1甲醉钠溶液：取0.25g金属钠，切碎，小心加入色谱甲醇10ml屮，此液置于玻璃瓶中，用橡皮塞密封。%1三氯化铝溶液：取1g无水三氯化铝，小心加入色谱甲醇20ml屮，放置24小时后全部溶解即得。%1醋酸钠：用无水粉末醋酸钠。④⑤硼酸饱和溶液：取无水硼酸，加入适量色谱甲醇、制成饱和溶液。(上述贮备液可放置六个月)(1)芦丁溶液的配制精密称取芦丁纯品0.5g,用甲醇适量溶解至50ml容量瓶屮，用甲醇稀释至刻度。（3）光谱的测定%1甲醇光谱：取样詁液置石英杯中，至200-500nm内进行扫描，重复一次，观察紫外光谱。%1甲醇
7、钠光谱：取样晶液置石英杯中，加入甲醇钠溶液3滴后，立即测定，放置5分钟后再测一•次。%1三氯化铝光谱，在盛有样品液的石英杯屮，加入三氯化铝6滴，放置1分钟示进行测定。测定示加入3滴盐酸溶液（盐酸：水=仁1）再进行测定。%1醋酸钠光谱：取样品液约3ml,加入过赧的无水醋酸钠固体，摇匀（杯底剩有约2mg的醋酸钠），加入醋酸钠示两分钟内测定，5分钟到10分钟示再测定一次。1.芦丁及懈皮素的色谱支持剂：中速层析滤液（5X20cm）展开剂：正丁醇■醋酸■水（4：1：5）上层样品：门制懈皮素的乙醇溶液门制芦丁的乙醇溶液对照品：懈皮索标准品的乙醇溶液芦丁标准品的乙醇溶液显
8、色剂：三氯化铝乙醇溶液喷雾2.糖的纸色谱检识支持剂：
