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1、肝癌干细胞分离鉴定的研究进展I王泉，胡卫，陈涛基金资助：湖北省自然科学重点基金项目(20UCDA039)作者:王泉，女,在读硕士研究生,研究方向:药理学，邮箱:wq7557342@163.com通讯作者：陈涛，博士，教授，研究方向：屮医药抗肿瘤，邮箱：chentao@ctgu.edu.cn(三峡大学，湖北宜昌443002)摘要：肿瘤干细胞已经被证实存在于多种肿瘤组织中，近来发现肝癌中也存在肝癌干细胞。肿瘤干细胞被认为是肿瘤的起始细胞，对肿瘤的发生、发展、转移、复发及耐药有着重要作用。因此分离和鉴
2、定肝癌干细胞成为当前研究的热点。本文复习了相关文献，现就肝癌干细胞分离鉴定的研究进展做一综述。关键词：肝癌干细胞；分离鉴定；CD133；SP；无血清培养TheProgressonIsolationandIdentificationofLiverCancerStemCellsWANGQuan,HUWei,CHENTao(ChinaThreeGorgesUniversity,YiChangHuBei,443002)Abstract:Cancerstemcells(CSCs)havebeendemon
3、stratedinagrowingrangeofepithelialandothersolidorganmalignancies.AndpreviousexperimentalandclinicalevidencealsoindicatedtheexistenceofliverCSCs.CSCsaredefinedasaminorpopulationwhichpossessesaprominentabilitytogeneratenewtumorsthatplayanimportantrolei
4、nthetumordevelopment,metastasis,recurrenceandresistancetochemotherapy.SoisolationandidentificationofliverCSCsattractmuchattention.Inthisreview,wedescribetheprogressonisolationandidentificationofliverCSCs.KeyWords：Livercancerstemcells；IsolationandIden
5、tification；CD133；CD90；serum-freemediumsorting传统观点认为肿瘤的发生是曲于正常细胞基因序列的改变，导致DNA发生突变，从而引起大量幼稚细胞增生，其生长是所有肿瘤细胞共同作用的结果。但近年来肿瘤T细胞理论提出了全新的观点，认为肿瘤T细胞(cancerstemcells,CSCs）是肿瘤发生、发展的基础，与肿瘤的转移、复发、耐药有关。因此分离鉴定出肿瘤干细胞并研究具特征，将为肿瘤的治疗开辟新的路径。原发性肝癌是一种常见的恶性肿瘤，好发于东南亚国家〔⑺，而我
6、国是肝癌的高发国家之一，其死亡率仅次于胃癌和食管癌居第三位。目前关于其发病机制仍不清楚。越来越多的证据证明,肝癌组织中存在肝癌干细胞（livercancerstemcells,LCSCs）。1肿瘤干细胞学说干细胞是一类具冇自我更新能力和多向分化潜能的原始细胞，一方面可以通过对称分裂维持自身细胞的数口，一方面又能分化成各种不同的组织细胞叫传统观点认为肿瘤的发主是由于正常细胞的基因序列的改变，导致DNA发生突变,从而引起大量幼稚细胞增生，英生长是所冇肿瘤细胞共同作用的结果。因此治疗方法主要是通过手术
7、、化疗、放疗等尽量去除所有的肿瘤细胞，但是治疗后仍有复发和转移，效果往往不尽人意。Reya等⑹在总结总结前人研究及比较干细胞和肿瘤细胞生物学特征的基础上，于2001年首次提出了“肿瘤干细胞学说"，认为肿瘤细胞具有异质性，肿瘤组织中存在一种数量较少的干细胞样癌细胞亚群，具冇肿瘤始动能力及转移特性，能够自我更新，通过迁移形成肿瘤转移；冇多向分化潜能，可分化成肿瘤内任何细胞；有永生性，能保证肿瘤的持续增殖，这种细胞称为CSCso1997年，Bonnet等①从急性淋巴细胞白血病病人体内分离出CD34PD
8、38-细胞群，仅占肿瘤细胞的5%,但只有这些细胞具有干细胞特性，这是人类首次获得的肿瘤干细胞。近年来，在许多实体瘤中发现了CSCs的存在，如乳腺癌［切、结肠癌［叭脑胶质瘤［9】等。2LCSCs的分离目询，LCSCs的分选方法冇三种：（1）侧群细胞（sidepopulationcells,SP细胞）分选法;（2）依赖于细胞表面标志物，使用荧光激活细胞分选fluorescenceactivatedcellsorting,FACS）或磁性激活细胞分选法（magneticactivatedcellsor
