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1、婴儿肺炎沙眼衣原体培养的临床分析婴儿肺炎沙眼衣原体培养的临床分析摘要:我院182例婴儿鼻咽拭子细胞培养沙眼衣原体22%(40/182)呈阳性，笔者认为鼻咽拭子与鼻咽部抽吸物培养效果相当,前者更适宜于临床应用；另从标本采集与贮藏温度角度提出方法学改进以提高培养的灵敏度，总结出婴儿沙眼衣原体肺炎常见的特征性症状体征，从而引起儿科医师对本病的高度重视。关键词:沙眼衣原体;婴儿;肺炎;细胞培养中图分类号:R374+.1文献标识码:A文章编号:1673-2197(2009)06-0073-02沙眼衣原体(ChlamydiaTrachomatis,CT)是西方发达国家最常见的性病病原体［
2、1］,婴儿CT感染主要是通过被感染的产道获得。宫颈CT感染者其阴道产儿60%〜70%可被感染，其中20%〜50%发生包涵体结膜炎，10%〜20%发生CT肺炎［2］。为探讨婴儿CT肺炎的发病情况及临床特点，笔者对我院2007年6月-2008年5月收治的182例肺炎患儿进行了实验室检查及临床分析。1资料和方法1.1资料1.1.1研究对象2007年6月-2008年5月，于本院就诊的肺炎患儿182例，其中男婴110例，女婴72例;剖宫产儿31例。纳入标准：年龄2周-3月；病史和体检诊断为感染性肺炎;X胸片证实为肺炎。1.1.2主要材料McCoy细胞株(小鼠细胞)为本室保存,RP-MI
3、1640培养基，胎牛血清。1.2检测方法按美国CDC推荐方法并略作改良［3］:1.2.1标木米集①鼻咽拭子:将套上无菌小塑料管的特制竹签脱脂棉拭子经鼻前庭插入鼻咽部，用力旋转约5s后立即退入塑料管内，随管一并取出以免被鼻腔内细菌污染;②鼻咽抽吸物:将无菌新生儿胃管经鼻插入鼻咽部，用20mL无菌空针抽吸，见抽吸物量>0.2mL后拔管，将所采集的标本充分混悬于2SP转运培养基中，挤尽液体弃去棉拭子。不能在8h内接种者置-70C保存。1.2.2细胞培养(1)单层细胞的准备。培养瓶中&长良好的McCoy细胞用0.02%EDTA消化后，加入RPMI1640培养液均匀混悬细胞，以ImL分
4、装于24孔培养板中，使细胞浓度为1X105/mL〜2X105/mL,36°C0.5%C02孵箱内孵育48h,使Z长为均匀融合的细胞单层。(2)标本接种、培养。冰壶保存者直接接种。-70°C保存者先用37°C水浴融解，再用滴管用力吹打标本后，接种于准备好的细胞单层,3000rpm35°C离心lh,再35°C孵育2h,弃上清换含防线菌酮(lng/L)和70g/L聚乙二醇的1640培养基,36°C5%C02下孵育48h后,-70°C冻融3次再盲传2代。(3)碘染色、镜检。弃培养液用PBS轻轻冲洗细胞2次，以无水甲醇固定lOmin后加过滤的
5、John氏染液ImL染色20~30min,1:1碘甘油封固。在400倍光学显微镜下发现被染色细胞胞浆中有棕黑色包涵体者为阳性。所有镜检均在盲传后48〜72h内完成。1.3统计学处理x2检验(SAS统计软件)o2结果2.1鼻咽拭了培养182例鼻咽拭了培养中，除去被细菌污染的17例,CT培养阳性率为23.6(40/165)。临床特点如下:①剖宫产儿CT均阴性•而非剖宫产儿CT阳性率27.2%(40/147),差异有显著性，X2=15.13,P<0.01;②低热(腋温37.5°C~38°C或24h内体温波动>1°C)24例(60.0%)，
6、无热15例(37.8%),仅2例高热(2.5%):③处例均有呼吸增快,34例(85.0%)有阵阵单咳,28例(70.0%)有紫纟甘,27例(67.5%)有中细湿❷音,7例(17.5%)有喘鸣音;④16例(40.0%)有结膜炎或结膜炎史;⑤X线胸片均显示不同类型的浸润阴影,肺纹理增粗,33例(82.5%)有过度充气;⑥平均病理期为21do2.2鼻咽拭子与鼻咽抽吸物培养结果对63名患儿作自身配对经左右鼻孔同吋取鼻咽拭了和鼻咽抽吸物培养，前者CT阳性11例(17.46%)，略高于后者10例(15.87%),经x2检验两者污染率x2=0.3
7、15,P>0.05及阳性率x2=0.05,P>0.05之间无显著差别。3讨论细胞培养是确诊CT感染的传统金标准，其特异性为100%,可从以下两方面提高培养的阳性率:①标本采集:CT肺炎的诊断以从呼吸道获取标本为主，可为鼻咽拭子和气管或鼻咽抽吸物,3者中以气管抽吸物的特异性最好，但取材困难，需借助喉镜或支气管镜,鼻咽抽吸物和鼻咽拭子取材则较容易,对诊断CT肺炎亦有较高特杲性。本实验鼻咽拭子阳性率高的原因，主要是采样时均用无菌塑料管套住拭了，防止了鼻腔内其它菌污染拭子;②标本贮藏温度:
