资源描述：
《大肠癌微卫星不稳定性及其临床意义》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、大肠癌微卫星不稳定性及其临床意义关键词:结直肠肿瘤；微卫星DM;微卫星不稳定性【摘要】目的了解大肠癌微卫星不稳定性(microsatelliteinstability,MI)情况。方法用6个微卫星位点检测PCR扩增所选位点PCR产物用8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染。结果60例大肠癌中，20例表现MI,其中11例为复制错误(replicationerrors,RER)阳性。RER阳性与RER阴性大肠癌患者相比，发病年龄较年轻，一级亲属有恶性肿瘤病史者明显高于RER阴性，倾向位于结肠，呈浸润性生长，III-IV期比例高。5例大肠癌伴大肠腺瘤病例中
2、，4例腺瘤有MI。结论中国人大肠癌MI发生率介于文献报道之间，MI为大肠癌形成过程中的早期分子事件,RER为肿瘤易感指标之一。微卫星DNA是大量随机分布于真核生物整个基因组中的1〜6个简单重复核昔酸序列，微卫星不稳定性(microsatelliteinstability,MI)是指由于复制错误(replicationerrors,RER)引起的简单重复序列的增加或丢失，其在恶性肿瘤发生发展过程中的作用已受重视，被认为是大肠癌的一种发病机制。我们对60例大肠癌组织的MI进行了研究，并结合临床病理资料，探讨其临床意义。材料与方法1.标木收集和基因组
3、DNA提取：自浙江医科大学第二附属医院肿瘤科1996年3月〜1997年5月间经病理证实的大肠癌患者60例，男37例，女23例。年龄32〜78岁，平均年龄(56±12)岁。按Dukes分期标准，I〜II期33例，III〜IV期27例。现场取手术切除组织标本，立即置入液氮屮保存，直至提取基因组DNA。每份标本包括肿瘤组织和相应的正常肠粘膜，基因组DNA提取采用蛋白酶k消化，酚氯仿抽捉法。1.MI检测:选用了D2S119、D13S160、D8S282、D3S1293、D2S123和D18S58等6个微卫星位点进行检测，PCR反应体系为50mmol/L
4、KC1,10mmol/LTris-Cl,0.l%TritoX-100,1.5mmol/LMgCl2,200Pmol/LdNTPS,模板DNA200ng,上下游引物各50pmol,Taq酶1U,加去离子水至50u1。PCR反应参数为：94°C变性5分钟，然后进入循环(94°C45秒，退火温度30秒，72°C1分钟)，共35个循环，最后70°C延伸10分钟，4°C保存。PCR产物用8%变性聚内烯酰胺凝胶电泳，电泳结束后进行银染。3•判断标准：分析电泳图谱，MI表现为肿瘤组织相对于正常组织出现额外的条带、等位带产生迁移率的改变或等位带浓度增加。在检测
5、的6个微卫星位点中，如果有两个或两个以上位点表现MI,则定义为RER阳性“刀。4•统计处理：采用t检验、x2检验和Fishers确切概率法，检验水准(Q)定为0.05,统计在SPSS6.0软件上完成。结果1.MI发生率:60例标本中,33.3%(20/60)表现MI,RER阳性11例，占18.3%。6个位点中,MI发生率依次为：D3S1293为18.3%(11/60),D2S123为13.3%(8/60),D8S282为13.3%(8/60),D18S58为11.7%(7/60),D2S119为11.7%(7/60),D13S160为6.7%(
6、4/60)。本组收集到5例大肠癌伴人肠腺瘤病例标本，4例腺瘤检测到MI,其中2例腺瘤和腺癌均为RER阳性；2例仅腺瘤存在MI,而腺癌未检测到。2.RER阳性大肠癌的临床特征：60例大肠癌中,发现RER阳性11例，年龄32〜78岁，平均年龄(52±14)岁。RER阴性49例，年龄34〜78岁，平均年龄(57±13)岁，RER阳性组比RER阴性组平均发病年龄小(P=0.18)o6例40岁以下的大肠癌中,RER阳性3例;54例40岁以上的病例中,RER阳性8例(P=0.069)。11例RER阳性大肠癌中，有4例一级亲属有恶性肿瘤病史，占36.4%；4
7、9例RER阴性病例中，也有4例一级亲属有恶性肿瘤病史，占8.2%；RER阳性病例有恶性肿瘤家族史的比例明显高于RER阴性(P=0.031)o1.RER阳性大肠癌的病理特征：RER阳性组屮，6例位于结肠，占54.5%,其屮位于右半结肠5例。RER阴性组中，21例位于结肠，占42.9%,其中位于右半结肠12例，占24.5%oRER阳性病例中，隆起型1例，浸润型10例。RER阴性病例中，隆起型14例，占28.6%；浸润型35例，占71.4%。RER阳性组中高中分化大肠癌8例,占72.7%；低分化3例，占27.3%oRER阴性组中高中分化38例,占77
8、.6%；低分化11例，占22.4%。RER阳性组中,Dukes分期为I〜II期5例，占45.5%；III〜IV期6例,占54.5%oRER阴性组中，I
