临床医学论文-M蛋白的鉴定及实验分析

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1、临床医学论文・M蛋白的鉴定及实验分析【关键词】M蛋白；免疫球蛋白；分析IdcntifyandExperimentalAnalysisofMProteinKeywords:Mprotein;Immuneglobin;AnalysisM蛋白（骨髓瘤蛋白）细胞大量增殖产生的具冇相同氨基酸顺序和蛋白质结构的免疫球蛋白（Ig）分子或其片段，临床上常见于多发性骨髓瘤（MM）、原发性巨球蛋白血症、重链病、原发性淀粉样变性、意义未明的单克隆丙种球蛋白血症等淋巴细胞或浆细胞克隆增殖性疾病［1］。M蛋白是单克隆免疫球蛋白的缩写,也称副蛋白、骨髓瘤蛋白、M成分。对此病只有采

2、取较好实验室方法与正确实验分析相结合，才能为临床提供可靠依据。1血清区带电泳技术是临床实验室对蛋白质进行的一种剖析技术。它可以对血清或其它体液中界常蛋白质进行筛选。它是以区带电泳为基础在一种合适的支持介质一琼脂糖上进行的电泳。血清蛋口质在给定的pH条件下主要根据其所带电荷数将其分离成各种片段。1.1正常人血清的区带屯泳结果和扫描图像从左至右的5个区带依次为白蛋白及a1、a2、B和y球蛋白区。冇时在慢电泳吋P球蛋白可分为P1球蛋白和P2球蛋白。白蛋白区的成分包括白蛋白、前口蛋口和部分a1脂蛋口；a1区包括a1抗朕酶蛋口、a1脂蛋口、Ge球蛋口；a2区包描

3、触珠蛋口、铜蓝蛋口、巨球蛋口等；B1区包描转铁蛋口、补体C3c、IgA、血结素等；B2区包描C3b、IgA；y区包描IgG、IgM.CRP等。1.2多克隆免疫球蛋白壇殖性疾病各类Ig均增加，相应的其它区带会减少，多见于肝硬化、慢性肝炎和系统性红斑狼疮等，由于B和丫区大量增殖，导致两区Z间的间隙消失，成为yB桥，亦称丫B联，扫描时B消失，出现一高而宽的丫峰。1・3免疫缺陷症时会出现无y峰或低B峰。1.4M蛋白血症特点是区带窄而浓，扫描峰高而尖，基底部窄，在Y区高与宽的比例22,B区则$1（止常时小于此比例），其它区带明显减少。1.5M蛋口量少时常被其它蛋

4、口掩盖可用稀释血清的方法解决，在进行血清区带电泳时，有时会出现假性M蛋口条带，此时则需要进行免疫电泳和免疫固定检测以资甄别。出现假性M蛋白条带的情况包括:当血液凝固不完全，血清中含有纤维蛋白原；血管内溶血时血清内血红蛋白结合珠蛋白含量增高;缺铁性贫血吋血清转铁蛋白浓度升高；某些应急状态卜•a球蛋口浓度增加及先犬性高脂蛋口血症;双口蛋口血症、口蛋口变异、口蛋白结合青霉索等药物后电泳行为改变。2免疫球蛋白检测正常人产牛免疫球蛋口的浆细胞是多克隆性质合成的免疫球蛋口除5种不同重链外，还只有K和入轻链，并且K/X比是恒定[2],M蛋白疾病是骨髓中异常浆细胞极度

5、增生所引起的一种恶性疾病，早期可无临床症状，起病缓慢，有的病例临床表现极不典型,易引起漏诊和误诊。因此血清免疫球蛋口也是M蛋口综合诊断的标准之一。Ig定量常用方法冇单向（环状）免疫扩散法、速率散射浊度测定法、火箭免疫电泳法。其屮以速率散射浊度测定法最为准确，月.采用自动化方法使操作方便，速率散射比浊法定量检测Ig的意义在于确定M蛋白所属lg类别及数量，速率动态散射比浊法是抗原抗体结合反应在每一个E位时间内的速度，连续测定各单位时间的反应速度即为动态观察，该法具冇速度快、敏感度高、精确度高、稳定性好的优点。一般M蛋白所属Ig含量均显着升高，其它类Ig则正

6、常或显着降低。3尿本周氏蛋白木周氏蛋白是单克隆游离免疫球蛋白轻链，它是K或入轻链的合成超过重链时轻链游离于血清中，分子量为45KD,容易从尿中排出本周氏蛋门，多來源于骨髓浆细胞的恶性增生，是由于合成紊乱,在生成和分泌完整的免疫球蛋白分子吋的过量轻链。木周氏蛋白又称凝溶蛋白，具有特殊的热沉淀性质，在pH5.0的条件下,加热至50°C~60°C时出现沉淀，继续加热至90°C后又重新溶解，再冷却时乂可出现沉淀。过去检测方法中，是利用木周氏蛋白的这种特殊的热沉淀性质检测尿本周氏蛋门的。这种方法由于存在特异性和灵頌度差的缺点，其结果也受诸多因索的影响:例如沉淀变

7、化需要肉眼观察，由于操作过程屮人为影响因素较多，敏感度较低，常导致判断有误差;尿液混浊、尿液中含有过多的其它蛋口以及实验过程中受温度变化等可影响其结果。本实验可以看出，热沉淀反应法应不再作为本周氏蛋白的筛选。同时也不能确定轻链的型别。4免疫固定免疫固定电泳是抗原在载休上电泳后直接用抗血清作用于蛋白，进行抗原抗体反应，使抗原在屯泳位置上被固定。免疫固定后的区带，应为单一免疫复合物沉淀带，根据抗血清的不同，可判定未知蛋口为何种成分。在研究M蛋口时，免疫固定电泳至少要应用6种抗血清，一是抗全血清抗体，其它5种分别为Y、a、卩、K和X的抗血清。免疫固定电泳不只

8、对MM分型有意义，同时还可对MM患者进行早期诊断，优于骨髓细胞检查，因为骨髓细胞形态检查往往要