临床医学毕业论文酶法提取杜仲多糖的工艺研究

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1、XX大学毕业论文酶法提取杜仲多糖的工艺研究2014年6月25日酶法提取杜仲多糖的工艺研究作者：刘晓河张海燕梁惠花【摘要】目的：确定杜仲中多糖的酶法提取工艺。方法：用正交试验的方法分别研究果胶酶、小性蛋白晦和纤维素酶对杜仲多糖提取率的影响。结果：果胶酶增加多糖提取率效果最为显著，其最佳提取条件是：酶加量O.lOmg/L,酶处理温度5O°C,酶处理时间3h。其次是屮性蛋白酶，纤维素酶的效呆最差。结论：杲胶酶可明显增加杜仲多糖的提取率。【关键词】杜仲；杜仲多糖；聚半乳糖醛酸酶；纤维素酶；正交试验【ABSTRACT】Obje

2、ctive:TostudytheeffectofextractionratefromEucommiaulmoidesolivpolysaccharidebyenzyme.Methods:ItwasinvestigatedbyorthogonalexperimentdesignL9(34)ontheinfluenceoftheextractionrateofEucommiaulnioidesolivpolysaccharide>neutralproteinenzymeandcelluloseenzyme.Results

3、:Theeffectivenessofenzymewasthebest.Theoptimalconditionofextractionwaswhenenzymewasasmuchas10%,and50°CheatpreservationuptoIh.Thesecondwasneutralproteinenzyme,Thecelluloseenzymewasthelast.Conclusion:TheenzymecanincreasetheextractionrateofEucommiaulmoidesolivpoly

4、saccharide.【KEYWORDS］EucommiaUlmoidesOliv,EUCOMMAN,Polygalacturonase,Cellulase,OrthogonalTest杜仲(Eucommiaulmoidesoliv)是我国名贵的滋补药材，具有降血压、降血脂、降血糖、抗菌消炎、抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗癌、抗肿瘤等作用；含冇苯丙素类、环烯瞇祜类、黄酮类、多糖类等多种物质，杜仲多糖是一类天然的免疫增强剂，通过提高机体免疫力起到抗癌、抗肿瘤作用［1］。目而提取杜仲多糖主耍是用水提醇沉法［2］和酸碱提取法，

5、用水提取法时，多糖的得率较低，后处理过程较为繁琐，而酸碱提取法又容易使多糖水解，破坏其活性结构，冇关酶法提取杜仲多糖的研究报道少见。木文参照有关文献［3,4］,探讨了果胶卿、屮性蛋口酶和纤维素酶提取杜仲多糖的最佳条件，为杜仲的进一步开发提供实验基础。1材料与方法1」仪器与试剂1.1.1仪器UV754紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）；XJ80离心机（江苏医疗器械厂）；RE52A旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）。1.1.2试剂杜仲购于本院屮医门诊部（于硅胶干燥器屮干燥两天后备用）；杲胶酶、中性蛋白酶、纤维素

6、酶（Fluka公司产品）；其余试剂均为国产分析纯。1.2方法1.2.1多糖的提取方法选取酶加量、酶处理温度和酶处理时间三个因索。采用L9（34）正交设计表，以多糖的提取率为指标，作正交试验。正交试验因素水平见表1。表1L9（34）正交试验因素水平表因素水平酶加量（mg/L）酶处理温度（°C）果胶酶中性蛋白酶纤维索酶酶处理时间(h)10.03455535120.07506040230.105565453称取杜仲0.5g于烧杯中，加入50倍量水，沸水浸提2h,离心取上清液，浓缩，定容后测定多糖含量，以该提取率为100%作

7、对照，另称取杜仲0.5g于烧杯屮，加入10倍量水，按正交试验设计，加入酶。IW解后，再加入20倍水，沸水浸提2h,离心取上清液，定容后测定多糖含量，每个提取平行做3次。1.2.2多糖测定方法采用苯酚一硫酸法测定总糖含量，采用3,5二硝基水杨酸法测定还原性糖含量。总糖含量减去还原糖含量即为多糖含量。2009年6刀刘晓河等：酶法提取杜仲多糖的工艺研究第3期2009年6刀河北北方学院学报（医学版）第3期表2果胶酶捉取杜仲多糖的正交试验结果分析表3中性蛋白酶提取杜仲多糖的止交试验结果分析2结果按121多糖的捉取方法进行捉取，

8、再按122多糖的测定方法测定多糖含量。以不加酶时多糖的提取率为100%作对照。加入酶后增加的多糖提取率见表2、表3和表4。表4纤维索酶提取杜仲多糖的正交试验结果分析酶法提取杜仲多糖的试验结果表明，果胶酶增加多糖提取率的效果最明显，最高处理组比对照组高4」倍（见表2第8组），纤维素酶效果最差。三种酶提取杜仲多糖的关键因了与最佳提取条件见表5。表5