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1、XX大学毕业论文TGFB1、vtp53基因在前列腺癌组织中的表达及其临床意义2014年6月25日TGF卩1.wtp53基因在前列腺癌组织中的表达及其临床意义作者:苏振波梁作文洪泉赵丹王伟华【摘要】目的探讨TGF卩1、wtp53基因在前列腺癌组织中的表达并探讨其临床意义。方法应用免疫印迹技术检测正常前列腺、前列腺癌组织和癌旁组织中TGF卩1,wtp53基因的表达。结果正常前列腺外腺和癌旁组织间的TGF卩l、wtp53表达水平无差异(P0.05);前列腺癌组织屮TGF卩1和wtp53表达,与止常前列腺组织和癌旁组织相比差异显
2、著(P0.01);已有远处转移灶的丽列腺癌组织中TGF卩1和wtp53表达,与无转移灶者相比差异显著(PO.Ol)o结论TGF卩1和wtp53基因与前列腺癌的发生和转移相关,并可能在前列腺癌的进展中起重要作用。因此,借助测定TGF卩1与wtp53表达可辅助前列腺癌的诊断和评估预后。【关键词】前列腺癌;TGFpl;wtp53;免疫印迹法[Abstract】ObjectiveTodetecttheexpressionsofTGF卩1andwtp53geneinprostatecarcinomaandevaluateitssig
3、nificances.MethodsWesternblottingmethodwasusedtodetectTGF卩1andwtp53expressioninthenormalandcarcinomousprostatictissues.ResultsTGF卩1wassimilarlyexpressedinthenormalandprostaticparaneoplastictissues(P0.05),andsowaswtp53(P0.05).EitherTGFplorwtp53wasdifferentlyexpress
4、edinthecarcinomousprostatictissuescomparedwithnormalorparaneoplastictissues(P0.01).TheexpressionsofTGFplorwtp53werestatisticallydifferentbetweenmetastaticprostatecarcinomaandnonmetastaticcarcinoma(P0.01).ConcmusionsTGF卩1andwtp53genesarerelatedtothemalignanttransfo
5、rmationandmetastatisofprostatecarcinoma.TodetecttheexpressionsofTGFplandwtp53maymakeforjudgingprostatecancer'sdiagnosisandprognosis.【Keywords]Prostatecancer;TGFp;wtp53;Westernblotting研究表明前列腺癌的发牛是基因调控失衡的结果,其牛物学特性与多种癌基因、生长因子密切相关门〜4)。传化生长因子(TGF)pi冇促进肿瘤侵袭、转移、血管增生以及免疫抑
6、制等多种作用门)。野生型p53(wtp53)是肿瘤抑制基因,突变后则是典型的显性癌基因,具有致癌的作用(2)。本研究运用免疫印迹技术分别检测了TGF卩1及wtp53基因在前列腺癌组织屮的表达,并探讨其临床意义。1资料与方法1.1标木来源2005年10月至2008年4月木院经直肠前列腺穿刺活检和手术切除后液氮保存的标本均经病理组织学确诊。前列腺癌36例(其中经影像学诊断为冇远处转移的为24例),年龄46〜82岁。正常前列腺6例作对照。1.2主要试剂兔抗人TGF卩1、p53多克隆一抗,羊抗兔辣根过氧化物酶标记的二抗,均购自武汉
7、博士德生物工程有限公司。DAB显色剂购自北京屮杉金桥生物技术有限公司。Western标志物是国产预染蛋口标志物。溟化乙锭、琼脂糖、SDS、TEMED、丙烯酰胺、N,N二卩基双丙烯酰胺、DTT、PMSF购口美国Sigma公司;DEPC购门德国Merk公司;其他常规化学试剂均为分析纯产品。1.3主要仪器凝胶成像系统(上海天能科技有限公司);蛋白质电泳装置及转移系统(Biorad,美国)。1.4wtp53、TGF卩1的蛋白表达141总蛋口提取将液氮低温保存的前列腺组织、前列腺癌及癌旁组织剪碎后各取100mg,分别加入500(11
8、蛋白裂解液,4°C,15000r/min匀浆后200r/min离心15min。上清移入另一管中,20000r/min离心60min。弃上清,取沉淀重新悬浮于200卩1匀浆缓冲液屮,加蛋白提取液,充分混匀,沸水加热变性10mine应用蛋白分析试剂(BioRad,USA)测定蛋白浓度。1.4.2SDSPAG
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