tgfβ1、wtp53基因在前列腺癌组织中的表达及其临床意义

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1、TGFβ1、wtp53基因在前列腺癌组织中的表达及其临床意义作者：苏振波梁作文洪泉赵丹王伟华【摘要】目的探讨TGFβ1、wtp53基因在前列腺癌组织中的表达并探讨其临床意义。方法应用免疫印迹技术检测正常前列腺、前列腺癌组织和癌旁组织中TGFβ1，wtp53基因的表达。结果正常前列腺外腺和癌旁组织间的TGFβ1、wtp53表达水平无差异(P>0.05);前列腺癌组织中TGFβ1和wtp53表达，与正常前列腺组织和癌旁组织相比差异显著(P<0.01);已有远处转移灶的前列腺癌组织中TGFβ1和wtp53表达，与无转移灶者相比差异显著(P<0.01)。结

2、论TGFβ1和wtp53基因与前列腺癌的发生和转移相关，并可能在前列腺癌的进展中起重要作用。因此，借助测定TGFβ1与wtp53表达可辅助前列腺癌的诊断和评估预后。【关键词】前列腺癌;TGFβ1;wtp53;免疫印迹法　　【Abstract】ObjectiveTodetecttheexpressionsofTGFβ1andwtp53geneinprostatecarcinomaandevaluateitssignificances.MethodsWesternblottingmethodwasusedtodetectTGFβ1andwtp53expressioninth

3、enormalandcarcinomousprostatictissues.ResultsTGFβ1wassimilarly9expressedinthenormalandprostaticparaneoplastictissues(P>0.05)，andsowaswtp53(P>0.05).EitherTGFβ1orwtp53wasdifferentlyexpressedinthecarcinomousprostatictissuescomparedwithnormalorparaneoplastictissues(P<0.01).Theexpressionso

4、fTGFβ1orwtp53werestatisticallydifferentbetweenmetastaticprostatecarcinomaandnonmetastaticcarcinoma(P<0.01).ConcmusionsTGFβ1andwtp53genesarerelatedtothemalignanttransformationandmetastatisofprostatecarcinoma.TodetecttheexpressionsofTGFβ1andwtp53maymakeforjudgingprostatecancer′sdiagnosisan

5、dprognosis.　　【Keywords】Prostatecancer;TGFβ;wtp53;Westernblotting　研究表明前列腺癌的发生是基因调控失衡的结果，其生物学特性与多种癌基因、生长因子密切相关〔1～4〕。转化生长因子(TGF)β1有促进肿瘤侵袭、转移、血管增生以及免疫抑制等多种作用〔1〕。野生型p53(wtp53)是肿瘤抑制基因，突变后则是典型的显性癌基因，具有致癌的作用〔2〕。本研究运用免疫印迹技术分别检测了TGFβ1及wtp53基因在前列腺癌组织中的表达，并探讨其临床意义。9　　1资料与方法　　1.1标本来源2005年10月至2008年4月本院经直肠

6、前列腺穿刺活检和手术切除后液氮保存的标本均经病理组织学确诊。前列腺癌36例(其中经影像学诊断为有远处转移的为24例)，年龄46～82岁。正常前列腺6例作对照。　　1.2主要试剂兔抗人TGFβ1、p53多克隆一抗，羊抗兔辣根过氧化物酶标记的二抗，均购自武汉博士德生物工程有限公司。DAB显色剂购自北京中杉金桥生物技术有限公司。Western标志物是国产预染蛋白标志物。溴化乙锭、琼脂糖、SDS、TEMED、丙烯酰胺、N，N二甲基双丙烯酰胺、DTT、PMSF购自美国Sigma公司;DEPC购自德国Merk公司;其他常规化学试剂均为分析纯产品。　　1.3主要仪器凝胶成像系统(上海天能科技有限公司

7、);蛋白质电泳装置及转移系统(Biorad，美国)。　　1.4wtp53、TGFβ1的蛋白表达　　1.4.1总蛋白提取将液氮低温保存的前列腺组织、前列腺癌及癌旁组织剪碎后各取100mg，分别加入500μl蛋白裂解液，4℃，15000r/min匀浆后200r/min离心15min。上清移入另一管中，200009r/min离心60min。弃上清，取沉淀重新悬浮于200μl匀浆缓冲液中，加蛋白提取液，充分混匀，沸水加热变