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时间:2019-10-18
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1、XX大学毕业论文mn23基因在人肺癌组织中的表达及其临床意义2014年6月25日nm23基因在人肺癌组织中的表达及其临床意义【摘要】目的:观察mn23基因在人肺癌屮的表达,探讨其与肺癌临床生物学行为的关系。方法:采用免疫组织化学UltrasensitiveTMSP三步法,检测49例肺癌及40例癌旁正常组织肺切片中nm23蛋白表达的情况,结合临床资料,应用统计学方法对其与肺癌临床生物学行为的关系进行分析。结果:在49例肺癌组织中,nm23蛋口的阳性表达率为55.1%,显著低于正常肺组织的87.5%(P0.01);在病理分级高中分化、低分化和未分化癌组织屮
2、nm23蛋白的阳性表达率分别为82.6%、41.2%和11.1%,差异貝有统计学意义(P0.01);在不同年龄、性别、吸烟指数、淋巴结转移及TNM分期中,nm23蛋白表达情况的差异均无统计学意义(P0.05)。结论::nn)23蛋白的表达水平随肺癌组织分化程度升高而增加,而与肺癌转移抑制作用可能无关【关键词】免疫组织化学;肺癌;nm23基因;组织分化程度肺癌已成为人类癌症死亡的主要原因之一。在我国,肺癌发病率及死亡率增长迅速。癌症的预后与诊断时的临床分期密切相关。肺癌的发生发展是一个多基因参与、多阶段发生、长时间形成的极其复杂的病变过程。nm23基因是
3、近年来研究较多的肿瘤转移抑制基因但是PM,nm23基因的蛋白直接或间接调节转移过程的机制仍未明确,nn)23蛋白的表达与非小细胞帅癌转移及预后关系的结论也不明确。木研究通过检测肺癌患者癌组织屮mn23蛋白的表达与肺癌临床生物学行为间的关系,为进一步探讨肺癌的发病机制提供理论依据,推测其可能的作用机制。1材料与方法1」标本来源选取酋安交通大学医学院第一附屈医院1998年3月〜2004年12月经手术切除或气管镜活检的63例肺癌,去除资料不全病例,取术而未进行放疗和(或)化疗、无其他疾病或并发症及临床资料齐全的病例49例用于本研究。其中男33例,女16例;年
4、龄34〜72岁,平均(59.2±11.3)岁。按1981年WHO肺癌病理类型分类标准:鳞癌19例,腺癌20例,小细胞癌10例;分化程度:高中分化23例,低分化17例,未分化9例。按美国联合癌症分类委员会(AJCC)和国际抗癌联盟(UICC)2002年制定的TNM分期标准进行分期,其中I期15例,II期13例,III+IV期21例;冇区域淋巴结转移者28例。对原HE切片进行复习,调取存档石蜡包埋组织标木,每例标木均经病理科有经验的医师选择1〜2块,制成4pm厚连续切片4张,3张切片供免疫组化染色,1张供HE染色复核诊断。取40例癌旁正常肺组织作为对照。1
5、.2方法病例标本为病灶中央常规取材,10%福尔马林固定,石蜡包埋,连续切片厚约4pm。采用免疫组化UltrasensitiveTMSP三步法检测nm23蛋白的表达。1.3质量控制毎次染色均设计对照,以作为染色质量控制标准,阳性对照采用已知的阳性对照片(购于福州迈新生物技术开发冇限公司),空白对照采用磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗,所有对照均与实验标本在相同条件下严格按照实际和推荐方法进行染色。1.4判定标准免疫组化阳性反应为细胞浆或细胞核中有黄色颗粒。蛋口累积的评分方法:参照Fromwitz综合计分法并略加修改行半定量分析,在高倍镜(10><40)下,
6、随机选择5~10个不同的视野各计数10~20个癌细胞,约100个癌细胞,记录阳性细胞的百分数和染色特征。阳性细胞的百分数计算公式:阳性细胞百分数=(阳性细胞数/总癌细胞数)x100%。阳性百分率5%〜25%为1分,26%〜50%为2分,51%〜75%为3分,75%为4分。着色强度以多数阳性细胞呈现的染色计分,浅棕色为1分,棕色为2分,深棕色为3分。行综合评分,0〜1分为阴性(・),2〜3分为弱阳性什),4〜5分为中度阳性什+),6〜7分为强阳性什卄)。读片在2位冇经验的病理科医师指导下进行,有争议的结果由3位医师共同讨论决定。1.5统让学处理应用SPS
7、S11.5forWindows统计软件包行卡方检验和Fisher确切概率法,结果均以双侧P0.05为差异冇统计学意义。2结果2」nm23蛋口在正常肺组织及肺癌中的表达nm23在止常肺组织及肺癌组织中阳性率分别为87.5%、55.1%(P0.01)。nm23蛋白阳性表达为胞浆冇棕黄色颗粒,以癌巢边缘和散在的癌细胞表达较多,染色较深(图l)onm23蛋白在鳞癌屮以弱屮度阳性为主,在腺癌屮以屮度阳性为主,小细胞癌则以弱阳性为主(图2)。结果显示在肺癌中nm23蛋口表达水平明显降低(表l)o2.2nm23蛋白表达与肺癌临床病理特征的关系由表2可以看出,在不同的
8、年龄、性别、吸烟指数、组织学类型及TNM分期屮,nm23蛋白表达情况的差别均无统计学意义(P0
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