merlin基因在人胃癌组织中的表达及临床意义

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1、Merlin基因在人胃癌组织中的表达及临床意义1.湖南省肿瘤医院消化泌尿内科长沙410003；2.湖南师范大学医学院病理教研室长沙410005【摘要】目的探讨抑癌基因失活与在胃癌(GC)发生发展的关系。方法采用荧光实时定量PCR和免疫组化检测35例胃癌组织及配对癌旁非肿瘤组织中MerlinmRNA和蛋白表达水平；探索其与GC患者临床病理特征间的关系。结果MerlinmRNA和蛋白在癌旁非肿瘤组织中高表达，而在癌组织中的表达则明显下调，差异有显著性(P<0.05)；在高、中分化腺癌、I期和II期、无淋巴结转移GC中Merlin蛋白阳性率，分别高于低分化腺癌、III期和IV期、有淋巴结转移

2、(P<0.05)o结论Merlin基因具有抑制GC发生及侵袭转移作用。【关键词】胃癌；Merlin；侵袭转移；抑癌基因[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheroleoftumorsuppressgeneinhumangastriccarcinoma(GC)progress.MethodsTheexpressionofMerlinmRNAandproteininhumanGCtumortissueandpairedadjacentnon-tumortissueweredetectedbyQuantitativereal-timePCRandImmunohi

3、stochemistry.ResultsBothMerlinmRNAandproteinishighlyexpressedinGCtissues，andexpressioninGCtissuesissignificantlymodulated(P<0.05).ThepositiverateofMerlinproteininhighand/ormediumdifferentiatedadenocarcinoma,IphaseandIIphase,andnolymphnodemetastasisweresignificanthigherthanthoseoflowdifferentiate

4、dadenocarcinoma,IIIandIVstage,andlymphnodemetastasis(P<0.05).ConclusionOurresultssuggestingthatMerlingenecouldplayainhibitroleintheprogressofGC.[keywords]Gastriccancer;Merlin；Invasionandmetastasis；TumorsuppressgeneMerlin也称NF2基因是一种瘤抑制基因，其失活可导致蛋白质的变性并可诱导肿瘤的发生。其编码的merlin蛋白与细胞的运动和增殖有着较密切的关系，磷酸化使merl

5、in蛋白丧失了抑制肿瘤生长的能力[1]。为研宄抑癌基因表达与胃癌发生发展之间的联系。笔者采用荧光实时定量PCR和免疫组化方法检测胃癌组织及配对癌旁非肿瘤组织中MerlinmRNA和蛋白表达水平，分析其表达水平与TNM分期、分化程度及淋巴结转移情况等临床病理特征因素的相关性。1资料和方法1.2.1一般资料及标本采集收集湖南省肿瘤医院医院2014年1月至2014年12月间胃癌根治性手术所切除的胃癌组织标本和配对的癌旁非肿瘤组织标本共35例，且均经术后病理组织学检查诊断证实。患者术前均未行化学治疗或放射治疗。其中男21例，女14例；中位年龄50岁（22〜65岁）。肿瘤大小：＜5cm10例，≥

6、5cm25例。分化程度：高分化4例，中分化8例，低分化23例；侵及浆膜及浆膜以外者13例，未及浆膜者22例；有淋巴结转移的20例，无淋巴结转移的15例。根据2014年国际抗癌联盟/美国癌症联合委员会（UICC/AGCC）TNM分期标准：I期3例、II期10例，III期18例、IV期4例。癌旁非肿瘤组织来自于肿瘤两端的切缘，经病理证实无癌细胞浸润。部分新鲜胃癌组织标本用于检测MerlinmRNA,剩余部分病理标本经40g/L甲醛固定，常规石蜡包埋，制备为5&micr0;m厚的连续切片。所奋病理标本分为胃癌组织与癌旁非肿瘤组织2组；胃癌组织根据病理类型、临床分期、有无淋巴结转移再进行分组。1.2

7、.3荧光定量PCR检测MerlinmRNA的表达采用Trizol方法按操作说明书提取胃癌组织、临近癌旁非癌胃组织的总RNA。Merlin的cDNA则由人连宝生物逆转录试剂盒合成，应用分光光度法监测RNA浓度，并使用琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性。实时定量PCR按照SYBRGreenqPCR试剂盒说明书（购自大连宝生物生物技术有限公司）完成，用β-actin作为内参。所冇实验部分重复3次。1.2.4免