抗鳗利斯顿氏菌鸡卵黄抗体对致病香鱼保护作用的研究

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1、特异性卵黄抗体(SpecificeggyolkimmunoglobulinY,IgY)是通过特定抗原免疫产蛋鸡，从免疫母鸡产的鸡蛋蛋黄中提取出来的，可用于感染特定病原疾病的预防和治疗。口服鸡卵黄抗体作为预防和治疗微生物感染引起的动物疾病，效果明显，受到广泛关注。木研究利用硫酸较盐析法提取抗鳗利斯顿氏菌卵黄抗体，并通过膜透析法进行分离纯化。购买的健康香鱼分为3组，腹腔注射鳗利斯顿氏菌后,分别灌胃特异性抗鳗利斯顿氏菌卵黄抗体(Anti-£.anguillarumIgYaLIgY)、非特异性卵黄抗体(nonspecificIgYnspIgY)和等量的生理盐水。实验结果表明，灌胃100mg/kg

2、和200mg/kg(灌胃卵黄抗体量/香鱼体重)特异性卵黄抗体组香鱼的累计存活率分别为50%和80%均高于非特异性卵黄抗体组，香鱼存活率分别为10%和15%,生理盐水对照组的香鱼7天后全部死亡；分别于香鱼感染鳗利斯顿氏菌不同时间点灌胃200mg^g特异性卵黄抗体，结果表明感染后即刻灌胃特异性卵黄抗体香鱼存活率最高为80%,在感染7天前和感染1天后灌胃保护效果次之，累计存活率分别为64%和55%O揭示特异性卵黄抗体对感染鳗利斯顿氏菌的香鱼具有积极的保护作用，且灌胃时间是特异性卵黄抗体发挥保护作用的一个关键的影响因素。平板计数法比较感染香鱼即刻灌胃特异性卵黄抗体和非特异性卵黄抗体12h后香鱼的

3、血液、肝、脾和头肾组织中的载菌量，结果表明特异性卵黄抗体组香鱼的血、肝、脾和头肾中的载菌量显著低于灌胃非特异性卵黄抗体组，说明特异性卵黄抗体可能通过抑制细菌生长发挥保护香鱼的作用。实时荧光定量PCR测定香鱼感染后即刻灌胃两种卵黄抗体，24h后各组香鱼的肝、脾、头肾组织中肿瘤坏死因子(TNF-a),白细胞介素-ip(IL-lp),转化生长因子(TGF-p),白细胞源趋化因子2(LECT2)的mRNA的表达变化，结果表明灌胃特异性卵黄抗体组除了肝组织中的LECT2,其余各组织各炎症因子的表达量均显著低于非特异卵黄抗体组和感染对照组。表明特异性卵黄抗体可能通过抑制炎症因子的表达抑制炎症反应。头

4、肾巨噬细胞吞噬实验表明，特异性卵黄抗体处理的巨噬细胞对鳗利斯顿氏菌的吞噬率明显高于非特异卵黄抗体处理组，说明抗鳗利斯顿氏菌卵黄抗体可以通过增强巨噬细胞吞噬鳗利斯顿氏菌的活力提高染病香鱼的抵抗力。以上实验结果揭示通过灌胃特异性卵黄抗体对感染鳗利斯顿氏菌的香鱼能够发挥有效的治疗和预防作用，且保护作用机制可能和特异性卵黄抗体的抑菌杀菌作用、增强吞噬细胞吞噬活性以及调节炎症因子的表达有关。关键词：香鱼；卵黄抗体；鳗利斯顿氏菌；载菌量；炎症因子；吞噬实验Passiveprotectiveeffectofchickeneggyolkimmunoglobulinsagainstexperimental

5、Listonellaanguillaruminfectioninsweetfish(Plecoglossusaltivelis)AbstractYolkantibody(eggyolkimmunoglobulinY,IgY)wasextractedfromtheeggslaidbyhensinitiallyimmunizedwithspecificantigen,whichisaproteinwithstrongimmunefunction,andcanbeusedtothepreventionandtherapyofsomediseases.Oraladministrationofch

6、ickeneggyolkimmunoglobulins(IgY)hasattractedmuchattentionasameansforcontrollinginfectiousdiseasescausedbymicroorganisms.IgYisolationprocedureswerecarriedoutbysaltprecipitation(ammoniumsulphateinsolidfonn)followedbycentrifugationanddialysis,andevaluatedtheprotectiveeffectofIgYagainstListonellaangu

7、illaruminfectioninsweetfish.HealthsweetfishesdividedintothreegroupsaftertheintraperitonealinjectionofListonellaanguillcirum.fedwithanti-L.anguillammIgY(aLIgY),non-specificIgY(nsplgY),andequalsaline.Thefishtreatedwith1O