卵黄抗体对鼠伤寒沙门氏菌感染小鼠肠道免疫应答的调节作用

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1、犬ｉｌ裡大學ＤＡＬＩＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ硕士芽位记文ＭＡＳＴＥＲＡＬＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮ卵黄抗体对鼠伤寒沙门氏菌感染小鼠肠道免疫应答的调节作用生物化工学科专业作者姓名ｌｉ李晓宇讲师指导教师２０１５年６月答辩日期—硕士学位论文卵黄抗体对鼠伤寒沙门氏菌感染小鼠肠道免疫应答的调节作用ＣｈｉｃｋｅｎＥｇｇＹｏｌｋＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓＭｏｄｕｌａｔｅｔｈｅＩｎｔｅｓｔｉｎａｌＩｍｍｕｎｅＲｅｓｐｏｎｓｅｉｎＭｉｃｅＣｈａｌ

2、ｌｅｎｇｅｄｗｉｔｈＳａｌｍｏｎｅｌｌａＴｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ作者姓名：姚营学科、专业：生物化工？学号：２１２１８１１８指导教师：李晓宇讲师完成日期：２０１５年６月１日大遠理工大＃ＤａｌｉａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ大连理工大学学位论文独创性声明作者郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除文中巳经注明引用内容和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体巳经发表的研究成果，也不包含其他巳申请学位或其他用途使用过的

3、成果一。与我同工作的同志对本研究所做的贡献均巳在论文中做了明确的说明并表示了谢意。若有不实之处，本人愿意承担相关法律责任。学位论文题目：》膝砲＃作ｉｉ和拘爲作者签名：日期：年日＿＾月＿１—命疼—Ｊ４【大连理工大学硕士学位论文摘要当动物机体受到外来病原菌入侵时，免疫系统被激活以抵御病原菌对机体的伤害。然而免疫系统的高度活化会导致动物采食量及体重下降等免疫应激现象，这给养殖业造成巨大经济损失。抗生素可有效改善。因此如何缓解免疫应激具有非常重要的实际意义动物的生长状况，，但随着动物产品中药物残留和细菌耐药性

4、等问题的出现迫切需要寻找一种既能有效控制养殖动物疾病，又不带来食品安全问题和环境隐患的新产品以替代、抗生素，，特。研宄表明卵黄抗体可用于动物感染性疾病的防治因其具有安全、高效一异性强等优点，所以被认为是最有前景的新代绿色，关、安全型抗生素替代品。然而于ＩＹ的作用机理现在还未阐明，ＩＹ在抑制病原菌的同时，能否对动物机体的免疫系ｇｇ一统起到调节作用，有待于进步的研宄，。本课题在前期研宄的基础上通过体内实验分析ＩｇＹ对鼠伤寒沙门氏菌攻毒小鼠肠道黏膜各种Ｔ淋巴细胞的影响。此外，通过体外实验还考察了ＩｇＹ对巨噬细胞吞噬活性和树突

5、细胞成熟度的影响。ＩｇＹ对攻毒小鼠肠道點膜各种Ｔ淋巴细胞的影响：昆明小鼠随机分为４组，用链霉素预处理２ｄ，１２ｈ后灌胃ＰＢＳ、非特异性ＩｇＹ和特异性ＩｇＹ，持续３ｄ，在此期间观察小鼠的状态、死亡率和体重。３ｄ后解剖小鼠并取小肠，分离肠道派尔淋巴结、上皮层，以及固有层的淋巴细胞，用流式细胞仪检测各种淋巴细胞的数量变化。结果表明鼠伤寒沙门氏菌攻毒后，６０％显减轻小鼠精神状态萎靡，体重明，派尔，死亡率达到淋巴结＋＋出现肿大，ＣＤ３ＴＤ８Ｔ细１０％和１４％细胞和Ｃ胞分别提高。上皮内淋巴细胞出现大量＋＋＋＋增加，ＣＤ８Ｔ细胞和ＴＣ

6、Ｒｙ５Ｔ细胞分别增加１８％和１６％。固有层中ＣＤ４Ｔ细胞和ＣＤ８Ｔ细胞升高８％和，死亡率降至２０％，１２％。口服特异性ＩｇＹ后，小鼠精神状态好转但体＋重无明显变化。派尔淋巴结肿大状况好转，并且派尔淋巴结中总的Ｔ细胞（ＣＤ３Ｔ细＋６５％ＩＹ还可显ＣＤ８Ｔ细胞胞）降低．，基本恢复到正常水平。特异性ｇ著降低上皮层中＋５ＩＹ和ＴＣＲＴ细胞的比例，分别降低１２％和１０％ｙ。固有层中的淋巴细胞在特异性ｇ的＋＋作用下，，也显著降低，其中ＣＤ４Ｔ细胞和ＣＤ８Ｔ细胞分别减少７％和１２％。这表明特异性ＩｇＹ可缓解鼠伤寒沙门氏菌攻毒引起的炎症反应

7、，对机体起到保护作用。ＩＹ对巨噬细胞Ｆ，ＩＴＣ标记鼠伤寒沙门氏菌ｇ吞唆活性的影响：用然后巨＿细胞与３ｈ，细菌共培养后，检测巨噬细胞的吞噬率及ＮＯ的释放量非特异性ＩＹ。结果表明ｇ和特异性ＩｇＹ可显著提高巨哩细胞对细菌的吞嚼率，分别提高２０％和３３％。并且特异性ＩｇＹ显著减少了巨唾细胞ＮＯ的分泌，使ＮＯ的分泌量由原先的２６＾ｍｏｌ／Ｌ降低至１４？ｉｍｏｌ／Ｌ。这表明ＩＹ可增强巨唾细胞对细菌的吞噬率并减少炎症因子的分泌。＾ｇ－ＩＹ对树突细胞成熟度的影响，用ｌＯｎ／ｍＬｒＧＭＣＳＦｇ：从小鼠骨髓中分离原代细胞ｇ－４和ｒＩＬ诱

8、导分化成树突细胞，收集第７ｄ的未成熟树突细胞。将鼠伤寒沙门氏菌与未成熟树突细胞以及特异性ＩＹ共同培养３ｈ，用流式细