霍山石斛多糖的分离纯化及结构鉴定

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1、霍山右斛多糖的分离纯化及结构鉴定摘要霍山石斛属于兰科，多年生草木植物，主要分布于中国安徽省霍山县，是我国最早有记载的石斛类屮药材，具有巨大的药用价值和市场潜力。多糖是霍山石斛中最主要的活性成分之一，研究发现霍山石斛多糖貝有抗氧化、抗肿瘤、抗白内障以及提高机体免疫力等作用。本文以霍山石斛为材料，成功分离纯化了一种多糖DHP-W2,对它的结构进行了详细的解析，并对DHP・W2的抗糖基化活性进行了初步的研究。通过不同浓度TCA对多糖脱蛋白率和多糖损失率关系的比较，发现0.5%TCA脱蛋白效果较好且多糖损失率较低，因此釆用0.5%TCA对经热水浸提得到的霍山石斛粗多糖进行脱蛋白。霍山

2、石斛粗多糖经DEAE■纤维素离子交换树脂，SephacrylS-200分离纯化得到一单一组分DHP・W2。经高液相凝胶渗透色谱测定其分了量为7.3x104Dao红外光谱扫描分析表明它是典型的多糖类化合物，紫外光谱分析表明其不含蛋白质、核酸等杂质，全水解分析表明DHP・W2主要由葡萄糖（G1c）、木糖（Xy1）和半孚L糖（Gal）按1.1:1.0:0.5的分子摩尔比以及少量的半乳糖醛酸组成。甲基化分析和核磁共振波谱分析表明,DHP-W2的主链曲1,6■连接和1,4■连接的p-D-glucose组成，分枝点位于O-4/6；DHP-W2的枝链由1,4■连接的a-D-xylose.1

3、,2,4-连结的a-D-xylose以及末端残基a-D-xylose>a-D-galactose和a-D-galacturonicacid组成。对DHP-W2的体外抗蛋白质非酶糖基化活性进行了初步的研究表明DHP・W2具冇明显的体外抗蛋白质非酶糖基化活性。关键词：霍山石斛；多糖；结构；抗糖基化活性PurificationandidentificationofpolysaccharidesisolatedfromDendrobiumhuoshanenseABSTRACTDendrobiumhuoshanenseC.Z.TangetS.J.Cheng(Orchidaceousap

4、erennialherbalplantandmainlydistributeinHuoshancounty^AnhuiprovinceofChina>Z)./7wo5/z(7A?ez75eisoneoftheearliestrecordedmedicinalplantsinChina.andpossessesprominentmedicinalvalueandenormousmarketdemand.RecentresearchindicatesthatpolysaccharidesareoneofmajoractiveingredientsofZ)

5、7ew5eandpossessesavarietyofbioactivities,includingantioxidation,antitumour,immunityimprovementandanticataract.Inthispaper,DHP-W2wassuccessfullyisolatedfromD./zw^^/z^we/v^e.anditsstructurefeaturesandanti-glycatedactivitywereinvestigatedrespectively.Comparisonbetweenremovalrateofproteinandlos

6、srateofpolysaccharideindifferentconcentrationsofTCAindicatedthatl.5%TCAwasmostappropriatelyusedtoremoveprotein.ThccrudcpolysaccharidcofZ)./?w€>5/2t7wew5ewasfractionatcdbyDEAE-celluloseanion-exchangeandgelfiltrationchromatographyofSephacrylS-200,givingonepurefractionDHP-W2.Itsmolecularweight

7、wasdctcrmincdtobc7.3x104byhigh-pcrformanccgcl-pcrmcationchromatography.TheinfraredspectraanalysisrevealedthatDHP-W2wasatypicalpolysaccharideandtheultravioletanalysisindicatedthatDHP-W2didnotcontainproteinsandnucleicacids.DHP-W2wascomposedofglucose.xylose