鸡大肠杆菌分离鉴定

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1、鸡大肠杆菌病病原的分离鉴定及药敏实验关键词：大肠杆茵；分离鉴定；致病性随着养鸡业集约化、产业化的不断发展，疾病越来越多，细菌对抗生素的耐药性越来越强，在临床疾病防治工作中，耍取得较好的治疗效果，需耍选择对致病菌比较敏感的药物来进行预防和治疗，达到有效控制疾病的目的。为了控制鸡人肠杆菌在鸡群中的传播，我们对送检的疑似人肠杆菌病例进行病原的分离鉴定，并对分离菌的培养特性、致病力及抗菌药物的敏感性进行了研究，为有效防制鸡人肠杆菌病提供了依据。1材料与方法1.1病料来源采自太谷县蛋鸡场150〜200H龄有典型气囊炎、肝包膜炎、心包

2、膜炎和败血症的病死蛋鸡的肝脏、脾脏、心血等。1.2细茵分离培养无菌采集病、死鸡的肝脏、心血等组织，接种在普通琼脂平板及普通肉汤，37°C培养20h,抹片，革兰氏染色后镜检。挑取表面光滑，边缘整齐，灰白色半透明的单个小菌落划线接种于麦康凯琼脂平板和伊红美兰琼脂平板，T37:培养20h,观察结果。1.3细茵形态学观察取在麦康凯琼脂或伊红美兰琼脂平板上培养20h的新鲜菌落，抹片进行革兰氏染色镜检。1.4生化试验选取麦康凯琼脂上长出的红色菌落或伊红美兰琼脂上长出的黑色带金属光泽的菌落，作MR、V-P、靛基质、三糖铁、明胶液化、氧化

3、卿、过氧化氢卿、尿素IW试验。1.5致病性试验设试验鼠32只f每株菌注射2只），每株菌做活菌计数后，给小白鼠腹腔注射0.7亿/只；设对照鼠2只，注射生理盐水0.2mU只，观察发病情况。发病与病死小白鼠取心血，肝脏、脾脏进行细菌分离鉴定。1.6药敏试验选取麦康凯琼脂上长出的红色菌落或伊红美兰琼脂上长的黑色带金属光泽的菌落，做药敏试验。取对照株O°、、O作对照。均置37°C,培养18〜24h,观察结果。2结果2.1病鸡及病死鸡的病理剖检变化病鸡肝脏肿大、质脆，有点状坏死灶，表面覆盖有黄白色的纤维素性渗出物；脾脏肿大，肺充血、淤

4、血，部分鸡肺脏有I〜2mm大小坏死灶；肾脏肿大，有尿酸盐沉积；十二指肠有岀血性肠炎变化；盲肠扁桃体肿胀、血。2.2细茵分离在麦康凯琼脂上长出红色的菌落和在伊红美兰琼脂上长出黑色带金属光泽的菌落。1.3细茵形态学观察病死鸡肝、肾等组织培养物涂片染色镜检，均可见两端钝圆，多数散在排列，偶尔有2〜3个连在一起的革兰氏阴性短杆菌。1.4生化试验结果各菌均对大多数糖类f葡萄糖、乳糖、麦芽糖、果糖、甘露糖，缓慢发酵庶糖）产酸产气，MR试验阳性、V—P试验阴性、产生靛基质、三糖铁底层产酸、明胶液化试验阴性、氧化酶试验阴性、过氧化氢酶试验

5、阳性、尿素酶试验阴性。此结果符合大肠杆菌的特性。1.5致病性试验试验组小白鼠均在48h内死亡，对照组小白鼠均健活。解剖死亡小白鼠，肝脏肿大、边缘钝圆、肠道弥漫性出血。釆用营养琼脂平板，37°C培养20h,在平板上形成圆形隆起、光滑、无色透明、边缘整齐的小菌落。挑取单个菌落作生化实验符合上述生化反应结果。3讨论2.1通过木次试验结果可看出，临床上大肠杆菌的药敏谱发生了-•定的变化，特别对嚨诺酮类药物的敏感性，标准菌株对环丙沙星、恩诺沙星都很敏感，而临床上分离出的大肠杆菌的敏感率环丙沙星为56.25%,高敏率仅为12.5%；恩

6、诺沙星为25%,高敏率仅为6・25%,表明太谷县大肠杆菌分离株对以上药物有较高的耐药性，但与两年前相比较，其敏感性略有冋升，这可能与近两年这类药物应用减少有一定的关系。在太谷县临床上鸡对大肠杆菌的敏感率达60%以上的常规药物主要有：丁胺卡那霉素、庆大霉素、卡那霉素、新霉素等，特别是丁胺卡那霉素，敏感率可高达93.75%。1.2大肠杆菌存在于人和动物的肠道内，少数特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有致病性，属于病原性大肠杆菌。我们在动物感染性试验屮发现，所分离的大肠杆菌有较强的致病力。肉汤培养物腹腔感染的小鼠均能在24〜48h内

7、死亡，死亡时眼睑、面部水肿，肠系膜和胃壁浆液陛水肿，肾脏和脾脏肿大、出血。1.3大肠杆菌是条件性致病菌，防制该病的关键在于加强饲养管理，做好各个环节的卫生消毒，消除各种发病诱因。日常要提供全价优质饲料，并足量补充维生素和电解质；夏季还要注意防暑；应添加饲料添加剂，如碳酸氢钠、杆菌肽锌、维生素C等；严格执行卫生防疫措施，创造一个良好的饲养环境。由于各地大肠杆菌的血清型，特别是优势血清型存在差界，有效而通用的菌苗尚未出现，因此筛选地区性免疫原性优良的大肠杆菌菌株制作菌苗，乃是防制鸡大肠杆菌免疫预防的基础。建议有条件的肉种鸡场，

8、最好采用自家灭活苗，这样效果可靠，更适用于血清型复杂的地区。通过以上的研究可以看出，大肠杆菌流行病学具有极其复杂的特征，这也是鸡大肠杆菌病难以采取针对性预防的关键所在。因此，定期对鸡场的大肠杆菌进行分离鉴定，选用具有针对性的菌株作为抗原制备菌苗，配以敏感的药物治疗和良好的卫牛措施，才能收到较好的防治效果