鸡致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性试验

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1、试验报告HusbandryAnimalModern业殖养禽畜代当组稿Email:nmgxmy2008@sina.com鸡致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性试验郝永正李广香山西省太谷县畜牧兽医中心030800摘要：对太谷县周边鸡场疑似大肠杆菌病死亡量鉴定管由杭州天和微生物试剂有限公司生产。鸡的病料进行病原菌分离，并进一步进行血清型鉴（3）大肠杆菌O抗原定型血清诊断液购于中国定、生化试验、动物试验和耐药性试验。结果显示，兽医药品监察所。实验动物为体重20～25g小白鼠引起鸡场发病的病原菌为大肠杆菌，主要血清型为20只，购自山西医科大学动物实验

2、中心。O157。该菌株有较强的致病性，耐药性试验结果显（4）药敏试验。选择硫酸阿米卡星、盐酸左旋氧示对硫酸阿米卡星、氟苯尼考等高度敏感，对盐酸氟沙星、氟苯尼考、新霉素、卡那霉素、头孢噻呋钠、左旋氧氟沙星、头孢曲松钠等中敏，对恩诺沙星和庆大霉素、氨苄西林、阿莫西林、恩诺沙星、环丙沙环丙沙星等耐药。星、链霉素和先锋Ⅴ号等药物进行。关键词：大肠杆菌；分离鉴定；耐药性实验1.2试验方法鸡大肠杆菌病是由大肠埃希氏杆菌引起的一（1）细菌分离培养。将采集病料样品接种于普类疾病的总称。该病的感染途径主要是消化道和呼通培养基上，37℃恒温培养18h，观察细

3、菌生长情况吸道，也可通过种蛋垂直传播，可原发、继发或并和菌落特征。挑取单个菌落接种于麦康凯琼脂平发，不同年龄的鸡都能感染。该病一年四季均有发板，37℃恒温培养24h后挑取可疑、红色、中等大小生，但以冬季和春季多发，症状一般呈典型经过：鸡和光滑的菌落进行革兰染色、镜检。将革兰染色情只精神萎顿、羽毛蓬乱、呼吸困难、食欲废绝，黄、况、形态和大小等均符合大肠杆菌特征的菌株初步白、绿稀便交替出现。急性型常于发病一周内死亡，确定为大肠杆菌，对疑似大肠杆菌进行菌种保存。亚急性或慢性型多发生于成年蛋鸡，患病的鸡精神（2）生化试验。将分离纯化的细菌在无菌条

4、件不振、食欲减少、饮水量增加，逐渐消瘦和下痢，但下进行糖发酵试验、甲基红试验、V-P试验、吲哚试死亡率不高。验、硫化氢试验、尿素酶试验和枸橼酸盐利用试验该病的防治主要使用抗菌药和抗生素，药物的检测。大量和频繁使用造成大肠杆菌耐药菌株不断产生，（3）致病性试验。将20只小白鼠分成2组，每致使治疗效果下降，给养鸡业造成严重经济损失；组10只。Ⅰ组为试验组，用鸡大肠杆菌肉汤培养物同时，抗菌药物在畜禽体内的残留给养禽业的持续接种，腹腔注射0.3mL/只；Ⅱ组为对照组，腹腔注射发展和人类的身体健康带来潜在危害。本试验，分灭菌生理盐水0.3mL/只。

5、注射后每天观察2次，连离鉴定和了解鸡大肠杆菌血清型及耐药性现状，以续观察7d。剖检病死鼠，取死鼠的肝脏涂片染色镜期为临床防治该病提供科学依据。检，再将其接种于麦康凯琼脂，挑取可疑菌落分离1材料与方法培养，进行观察。1.1材料（4）血清型鉴定。按大肠杆菌O抗原定型血清（1）病料来源。样品来自太谷县周边几个鸡养诊断液使用说明书操作。首先将分离的细菌进行玻殖场，共采样25份，经临床诊断为鸡大肠杆菌病。板凝集反应，初步筛选疑似O血清型菌株，然后通（2）培养基。营养琼脂、麦康凯琼脂、普通肉汤、过试管凝集反应进一步确定其血清型。伊红美蓝琼脂和细菌微量

6、生化反应管均购于杭州（5）耐药性实验。采用纸片法，测量抑菌圈直天和微生物试剂公司；M．R．试剂、V-P试剂、靛基质径。抑菌圈直径大于20mm为高度敏感、10～20mm试验用培养基等均按照常规方法配制。细菌生化微为中度敏感、小于10mm为耐药。122014.11当代畜禽养殖业ModernAnimalHusbandry试验报告组稿Email:nmgxmy2008@sina.com2结果与分析d≧20mm，高度敏感；10mm≦d﹤20mm，中度敏感；d﹤2.1细菌的分离培养10mm,耐药。从25份病料中分离出大肠杆菌11株，分离率18株大肠杆

7、菌对14种抗生素有不同程度的耐为44％。分离菌在营养琼脂上生长24h后，形成圆药。具体结果见表1。形、边缘整齐、隆起、光滑、湿润和灰白色的菌落，直3结论与讨论径为2～3mm；在麦康凯琼脂上形成红色、圆形隆3.1分离株鉴定及发生感染的原因起、光滑湿润和边缘整齐的小菌落；在伊红美蓝琼经过细菌分离培养和生物学特性鉴定，得知引脂上形成紫黑色、具有金属光泽的小菌落；在普通发该地区肉鸡发病死亡的致病菌为致病性大肠杆肉汤中呈均匀浑浊，管底有灰白色沉淀，振荡呈云菌，血清型为O157。大肠杆菌为条件致病菌，而现雾状散开。革兰染色镜检可见革兰阴性、无芽孢、短

8、代规模化饲养场的肉鸡饲养主要采用网上平养方小和两端钝圆的短杆菌。式，饲养密度大、鸡舍空气污浊、通风不良、光照不2.2生化试验足、肉鸡生长速度快、耗氧量大以及环境卫生和饲11株分离菌对葡萄糖、麦