药物分析研究进展

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1、药物分析研究进展高效毛细管电泳班级：10动物医学1班姓名：文道鹏学号：222010602033130引言：高效毛细管电泳（HPCE）具有多种分离模式（多种分离介质和原理），故具有多种功能，因此苴应用十分广泛，通常能配成溶液或悬浮溶液的样品（除挥发性和不溶物外）均能用HPCE进行分离和分析，小到无机离子，大到生物大分子和超分子，甚至整个细胞都可进行分离检测。它广泛应用于生命科学、医药科学、临床医学、分子生物学、法庭与侦破鉴定、化学、环境、海关、农学、宀产过程监控、产品质检以及单细胞和单分子分析等领域。关键

2、词：简介应用摘要：20世纪80年代问世以来，由为驱动力，在毛细管中按其淌度和分配系数不同进行高速、快速分离分析的一种新技术。20世纪80年代问世以來，由于它具有高速（理论塔板数大于105）、快速（分析时间不超过加min）.进样体积小（一般为nl级）和溶剂消耗少等优点，发展迅速，成为电色谱法的一个重要分支。高效毛细管电泳冃前在临床疾病、基因工程、药物定量以及杂质含量等方面都有广泛的应用。1•高效毛细管电泳1.1高效毛细管电泳简介1981年Jorgenson和Lukacs首先提出在75ym内径毛细管柱内用高

3、电压进行分离，创立了现代毛细管电泳。1984年Terabe等建立了胶束毛细管电动力学色谱。1987年Hjerten建立了毛细管等电聚焦,Cohen和Karger提出了毛细管凝胶电泳。1988-1989年离相结合的产物。CE和高效液相色谱法(HPLC)相比，其相同处在于都是高效分离技术，仪器操作均可白动化，且二者均有多种不同分离模式。二者Z间的差异在于：CE用迁移时间取代HPLC中的保留时间,CE的分析时间通常不超过30min,比HPLC速度快；对CE而言,从理论上推得其理论塔板高度和溶质的扩散系数成正比

4、，对扩散系数小的生物大分子而言，其柱效就要比；检测器则除了未能和原子吸收及红外光谱连接以外，其它类型检测器均已和CE实现了连接检测；一般电泳定量精度差，而CE和HPLC和近；CE操作自动化程度比普通电泳要高得多。总之,CE的优点可概括为三高二少：高灵敏度，常用紫外检测器的检测限可达10-13~10-15mol＞光诱导荧光检测器则达10・19~10・21mol；高分辨率，其每米理论塔白质,1.7min分离19种阳离子,3min内分离30种阴离子；样品少，只需nl(10-9L)级的进样量；成本低，只需少量(

5、几毫升)流动相和价格低廉的毛细管。由于以上优点以及分离生物大分子的能力，使CE成为近年来发展最迅速的分离分析方法之一。当然CE还是一种正在发展中的技术，有些理论研究和实际应用正在进行与开发。“C凸统指以高压电场为驱动力,以毛细管为分离通道，依据样品屮各组分Z间淌度和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。其仪器结构包括一个高压电源，一根毛细管，一个检测器及两个供毛细管两端插入而乂可和电源相连电渗，粒子在毛细管内电解质中的迁移速度等于电泳和电渗流(EOF)两种速度的矢量和，正离子的运动方向和电渗流一

6、致，故最先流出；中性粒子的电泳流速度为“零=故其迁移速度相当于电渗流速度；负离子的运动方向和电渗流方向相反,但因电渗流速度一般都大于电泳流速度，故它将在中性粒子之后流吐从而因各种粒子迁移速度不同而实现分离。电渗是CE中推动流体前进的驱动力，它使整个流体像一个塞子一样以均匀速度向前运动，使整个流型呈近似扁平型的“塞式流（见图）它使溶质区带在要途径,增加电场强度可以提高速度。但高场强导致电流增加，引起毛细管中电解质产生焦耳热（自热）。自热将使流体在径向产生抛物线型温度分布，即管轴中心温度要比近壁处温度高。因

7、溶液粘度随温度升高呈指数下降，温度梯度使介质粘度在径向产生梯度，从而影响溶质迁移速度，使管轴中心的溶质分子要比近管壁的分子迁移得更快，造成一步导致低缓冲液浓度可降低电流强度，使温差变化减小。高离子强度缓冲液可阻止蛋白质吸附于管壁，并可产生柱上浓度聚焦效应，防止峰扩张，改善峰形。减小管径在一定程度上缓解了由高电场引起的热量积聚，但细管径使进样量的毛细管进行微量制备，仍能达到良好的分离效果和重现性。高效毛细管电泳法，是近年来发展最快的分析方法之一。是以高压电场为驱动力，以毛细管为分离通道，依据样品中各组分之

8、间淌度和分配行为上的差异而实现分离分析的液相分离方法。1.2基本原理高效毛细管电泳是近年来发展起来的一种分离、分析技术，它是凝胶电泳技术的发展，是高效液相色谱分析的补充。该技术可分析的成分小至有机离子、大至生物大分子如蛋白质、核酸等。可用于分析多种体液样本如血清或血浆、尿、脑脊液及唾液等，HPLC分析高效、快速、微量。电泳迁移不同分子所带电荷性质、多少不同,形状、大小各异。一定电解质及PH的缓冲液或其它溶液内，受电场作用，样本屮各组分按一定