试验专题酶的活性探究

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1、课题:5•探究影响酶活性的因素一、学习目标探索酶的特性和影响酶活性的因素。二、课前预习1.实验原理(1)新鲜的肝脏屮含有。过氧化氢分解产主水和O(2)淀粉遇碘后,形成色的复合物。淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖。麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。注:市售a-淀粉酶的最适温度约60%(3)淀粉陆可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和衙萄糖,麦芽糖和衙萄糖与发牛作用,可生成砖红色Cu2。沉淀。比较过氧化氢酶和f£+的催化效率操作序号项日1乃试管2号试管13%的HA溶液2mlml2催化剂2滴肝脏研轉液FeCh溶液3振荡试筲V4现象记录产生气泡而且_产生气泡而且_卫生香燃烧卫生香燃烧

2、结论:过氧化氢酶的催化效率比的催化效率—,具有性。1、做这个实验为什么要选用新鲜的肝脏?2、为什么要将肝脏制成研磨液?3、滴入肝脏研轉液和氯化铁溶液时,可否共用一个吸管?为什么?验证酶的专一性取两只洁净的试管编上号,然后按照表屮序号1至序号3的要求操作:.轻轻振荡这两支试管,使试管内的液体混合均匀,并且将管的下部浸到6CTC的水中,保温5min,取出试管各加人2ml斐林试剂,然后将两只试管的下半部放在酒精灯的火焰上均匀加热,煮沸Imino(1)请回答甲、乙试管各有什么变化?甲,乙。序号项目试管甲乙i注入可溶性淀粉溶液2mL2'注人蔗糖溶液2mL3注入新鲜的淀粉酶2

3、mL2mL(2)木试验的1=1的是o(3)将试管的下半部浸到60°C的水中,原因是(4)在已知淀粉他能够催化淀粉水解的悄况下,本实验设置甲号试管述有没有必耍?三、重点探究温度对卿活性的影响序号加入试剂或处理方法试管ABCabC1溶液(A、B、C)2mL2mL///溶液(a、b、c)///ImLImL2保温5min60°C100°Co°c°C°C°C3将液加入到A试管,b液加入到试管,液加入到C试管屮,摇匀4保温5min°C°C°C5滴入碘液,摇匀2滴滴2滴6观察现象并记录注:2.这里最后的鉴定不能使用斐林试剂,因为使用斐林试剂需耍才显色。那会使原先在冰块中的混合液会随

4、着温度的升高而将淀粉水解,产牛还原糖--一麦芽糖,从而也会出现砖红色沉淀。这样就无法说明在0°C时o(1)加入淀粉IW前控制好各自的温度,目的是(2)通过这个实验,得出的结论是0PH值对酶活性的影响序号加入试剂或处理方法试管1231溶液ImLImLImL2注入蒸锚水ImL//3注入氮氧化钠溶液/ImL/4注入盐酸//ImL5溶液2mL2mL2mL660°C水浴保温5min7加入斐林试剂,边加边振荡2mL2mL2mL8水浴加热煮沸lmin9观察3支试管中溶液颜色变化变记录该实验中,鉴定时所用的是斐林试剂。这是因为,下表中,2、3号试管中的碱性及酸性已经使酶失左了活性,使

5、用斐林试剂时的加温不会对失去活性的酶有作用;1号的淀粉已经被催化分解成还原糖,加热也不会对实验结果产生改变)(1)能不能按表格中的实验操作步骤把1和5颠倒來操作?原因是(2)本实验的结论是课题:6•叶绿体色素的提取和分离一、学习目标初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法,探索叶绿体屮有几种色素。二、课前预习1.实验原理:叶绿体中的色素是有机物,不溶于水,易溶于丙酮等有机溶剂中,所以用丙酮、乙醇等能_色素。层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体色素在层析液屮的溶解度不同,分子量小的溶解度高,随层析液在滤纸上扩散速度,溶解度低的随层析液在滤纸上扩散速度。所以用层析法来分离

6、四种色索。2.实验步骤:步骤注意问题分析1.提取色素加SiO2加SiO2为5克绿叶剪碎,放入研钵,加了。SiO2>CaCO3和10mL无水乙加CaCO3加CaCO3防止研懒时醇,迅速、充分研像。(若没受到破坏。有无水乙醇,也可用体积分数为95%的乙醇,但要加入适量加无水乙醇叶绿体色素易溶于无水乙醉的无水碳酸钠,除去水分)等冇机溶剂。减少研磨过程,迅速减少有毒性的丙酮挥发。2.收集滤液漏斗基部放一单层尼龙布,研尼龙布起过滤作用。磨倒入漏斗内挤压,将滤液收集到小试管中,用棉花塞塞住试管口用棉花塞塞紧是为防试管口。止丙酮挥发。3.制备滤纸条干燥可吸收更多的滤液将干燥的滤纸,

7、顺着纸纹剪成长010cm,宽1cm的纸条,一端剪顺着纸纹剪成长条层析时,色素分离效果好。去二个角,并在距这一端1cm处划画■端切去二个角可使层析液同时到达滤液细笔线。(不能用鬪珠笔划,为什线么?)4.划滤液细线滤液细线越细、越齐越好。防止色素带之用毛细吸铮吸取少量滤液,沿间。划出细、齐、肓的重复二次。一条滤液细线,干后重复三次。增加色索在滤纸上的附着量,实验结果更明显。5.纸层析法分离色素层析液不能没及滤纸条。防止色素将3mL层析液倒入试管屮,将滤纸条(划线一端朝下)插入层析液中,用棉塞塞紧试管棉塞塞紧试管口。层析液中的苯、丙酮、石油Uo醸易挥发。6

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