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1、龙眼内生菌的分离与脂肪酸鉴定朱育菁，王秋红，陈璐，蓝江林，林抗美，刘波收稿日期：基金项目：福建省科技平台建设项目(2007N020I),福建省农科院创新团队“微生物基础生物学与农业生物药物的研究与应用”(STJF-Y03),作者简介:朱育苦(1972-)，女,福建福州人,副研究员，博士,从事植物病害微生物及其生物防治。通讯作者:刘波(1957-),男,福建惠安人，研究员,博士,主要从事生物技术和生物防治研究。Tel:0591-87848933,E-mail:lacp(b@163.com(福建省农科院农业生物资源研究所，福建祸州35(X)03)摘要：对龙眼“福眼”果
2、实的内生菌进行分离纯化和脂肪酸鉴定。鉴定结果表明在龙眼果实中检测到分属于肠杆菌属(.Eterobacter)^果胶杆菌属(Pectobactenum)^克吕沃尔菌属(Kluyvera')和沙门氏杆菌屈(Salmonella)的内牛.细菌，以及分属丁•枝他雷属(Cladosporium),柱顶他每丿屈(Scytalidium),外瓶每屈(Exophiala)的内朱真菌。关键词：龙眼；内生菌中图分类号：Q939文献标识码：A文章编号：IsolationandFatty-acidIdentificationofEndophytesinLonganZHUYu-jing,W
3、ANGQiu-hong,CHENLu,LANJiang-Lin,LINKang-mei,LIUBo(AgriculturalBiorcsourccResearchInstitute,FujianAcademyofAgriculturalSciences,Fuzhou350003,FujianCliina)Abstract:Theendophytesinlongan(DimocarpuslongganaLour.)wereisolatedandidentifiedbyfatty-acidtechnology.Theresultsshowedthatendophyti
4、cbacteriabelongingtoEterobacter,Pectobacteriiun,Kluyvera.andSalmonellaweredetectedin(hefniitoflongan,aswellastheendophyticfungibelongingtoCladosporium,ScytalidiumandExophiala・Keywords：Dimocarpuslong^ana;Endophyte自1898年Vogl从黑麦草种子内分离出第一株内生真菌以來，植物内生菌作为一种新的微生物资源受到了广泛的关注山。人们发现植物体内存在大量有益的内生
5、细菌和内生真菌，这些内牛菌在植物体内能产牛多种牛物学作用，可以提供植物所盂要的营养物质如氮源(内生共生固氮)及一些激素，参与植物的防卫功能，能够促进植物快速生长，增强植物抗逆境、抗病害、抗动物危害的能力龙眼(DimocarpuslongganaLour.)是亚热带名优水果，营养丰富，香甜可口，具有较高的药用价值和保健作用，深受国内外消费者欢迎，是我国重要的出口商品之一［3］。但龙眼成熟期在8〜9月高温季节，采后牛理代谢旺盛，鲜果易变色、变质、不耐贮运，在28°C室温下，一周左右全部变质腐烂。而我国龙眼保鲜贮运技术的研究滞后，鲜果销售受到限制,难以人批量远销和出口。
6、在世界范围内，龙眼的保鲜、加工技术问题还是一个还无法彻底解决的技术问题［4］。脂肪酸是构成生物膜的重要物质，细菌的细胞结构中普遍含有的脂肪酸成分与细菌的DNA具有高度的同源性，各种细菌具有其特征性的细胞脂肪酸指纹图谱⑸。国内外己冇把脂肪酸用于细菌鉴定的报道［切。本研究采用脂肪酸鉴定技术对龙眼的内生菌进行分离与鉴定，以期为龙眼腐烂机理的研究与牛物保鲜的开发应用提供理论依据。1材料与方法1.1材料供试龙眼采口泉州农科所基地，品种为“福眼"，采摘时间为2006年8刀，龙眼牛长期为成熟期。1.2培养基与试剂内牛细菌分离与增殖培养均采用NA培养基，内牛真菌分离与增殖培养均采
7、用PDA培养基。内生细1W脂肪酸提取培养基为TSBA培养基：胰蛋H淼大豆肉汤(Trypticsoybroth,TSB)30g+琼脂15g+水1000mL(TSB购于Fisher公司)。内生真菌脂肪酸提取培养基为SDB培养基：沙堡氏葡萄糖肉汤(SabouraudDextroseBroth,SDB)30g+水1000mL(SDB购于Fishei•公司)。内生菌脂肪酸提収试剂有①皂化试剂：氢氧化钠45g+甲醇150mL+水150mL；②甲基化试剂：6N盐酸325mL+甲醇275mL；③萃取试剂：止已烷200mL+甲基叔丁基乙醯200mL；④洗涤试剂：氮氧化钠10.8計水
8、900mL
