白及内生菌的分离与鉴定

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1、顼士学位论文••‘-W•石、.'Vvi-•’’一e‘„一会及由生黉的分禽与奚走苏子敬指导教师；杨星勇教授专业名称：微生物学研究方向：病原微生物与寄主二〇一S年五月独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得重庆师范大学或其他教育机构的学位或证书而俥用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明。学位论文作者签名：：彳签字日期：x年汐月々日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解重庆师范大学

2、有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权重庆师范大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。学位论文作者签名：签字日期：kg年/月/口日重庆师范大学硕士学位论文白及内生菌的分离与鉴定硕士研究生：苏子敬指导教师：杨星勇教授学科专业：微生物学所在学院：生命科学学院重庆师范大学二零一五年五月AThesisSubmittedtoChongqingNormalUniversityinPartialFulfillmentofthe

3、RequirementsfortheDegreeofMasterRhizomabletillaeendophyticfungiidentificationCandidate：SuzijingSupervisor：Prof.XingyongYangMajor：MicrobiologyCollege：CollegeofLifeSciencesChongqingNormaluniversityMarch，2015重庆师范大学硕士学位论文摘要白及内生菌的分离与鉴定摘要白及是兰科白及属，具有重要的观赏和药用价值。其块茎具有止血润肺、生肌止痛、保护组织和修补破损组织等功

4、效，临床上用于治疗外伤出血、吐血、疮疡和溃疡等病症。随着近年人们对白及认识的不断加深，用途不断扩大，白及市场价格攀升。野生白及被乱采滥挖，其资源不断受到破坏，导致野生资源急剧缩减，面临着灭绝的危险。白及又因种子发育不完全且极其细小，很难播种出苗，现在在生产上大都以块茎进行繁殖，其繁殖系数较低。所以白及资源紧缺，市场供不应求，怎样有效地进行人工栽种和繁殖成了急需解决的问题。目前，虽然已实现白及人工栽培，但其繁殖栽培措施并不理想。而内生菌是普遍存在于植物中的一类重要的微生物资源，一些内生菌在植物生长发育中起着重要作用。白及内生菌与白及生长的关系以及白及药用成分的

5、关系还少有报道。这些研究的前提是内生菌的分离鉴定。基于此，我们开展了这方面的研究。本研究实验材料白及(Bletillastriata)取自重庆市药用植物种植研究所内的白及种植园区。将新鲜的白及植株带回实验室，选取生长健康的白及洗净，将其根、茎块、茎、叶4个部分的组织块，经75%的酒精和0.1%的升汞表面消毒后，分别接于PDA、MEA（麦芽糖培养基）、CS（察氏培养基）、LB培养基上。研究表明，从组织块中共分离到内生真菌菌株71个，内生细菌菌株23个。其中从根、叶、茎和茎块中分别分离到内生真菌菌株6个、20个、20个和25个。经形态学和分子生物学鉴定后，一共鉴

6、定出了19种内生真菌，包含在10个属中。对白及内生细菌进行抗菌活性实验后，发现一株内生细菌（b9）对芽孢杆菌和大肠杆菌都具有抗菌活性。关键词：白及；白及属；内生真菌；内生细菌；分离；鉴定I重庆师范大学硕士学位论文AbstractRhizomabletillaeendophyticfungiidentificationAbstractOrchidaceaeRhizomaBletillaehasimportantornamentalandmedicinalvalue.ThetuberofRhizomaBletillaehasbleedinglungs,muscl

7、epain,healthprotectionorganizationsandrepairdamagedtissuefunction,clinicalfordiseasetreatmentoftraumaticbleeding,vomiting,soreandulcersyndrome.Withthedeepeningofthedialogueandawarenessinrecentyears,theuseofcontinuousexpansion,whiteandmarketpricesclimbed.wildRhizomaBletillaewasindis

8、criminatedigged,thecontinu