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时间:2020-03-22
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1、艾肯菌的分离与鉴定北京医院陈东科苛养菌(fastidiousmicroorganism)是一类生长需要特殊营养物质的细菌,与许多感染性疾病有关,其分离培养较为困难,由这些菌引起的感染发病率一直难以估计。因此,对苛养菌的分离鉴定和药敏试验不仅是临床迫切的需要,同时也是衡量一个细菌室技术水平的重要标志。其中“HACEK”细菌群生长缓慢且需CO2环境,所致感染有相关性。此群苛养菌系人类口腔、呼吸道、泌尿生殖道的正常菌群,在一定条件下可引起严重感染。H代表嗜血杆菌属(Haemophilus);A代表放线杆菌属(Actinobacillus);C代表心杆菌属(Cardiobacteri
2、um);E代表艾肯菌属(Eikenella);K代表金氏菌属(Kingella)。1.概述腐蚀艾肯菌(Eikenellacorrodens)系人类口腔及泌尿生殖道的正常菌群,是苛养菌群中的慢速生长菌,在一定条件下可引起严重感染,主要引起细菌性心内膜炎、菌血症和混合性细菌感染(尤其在人咬伤感染标本中多见)。腐蚀艾肯菌是艾肯菌属中的唯一菌种,属奈瑟菌科。腐蚀艾肯菌是人类粘膜表面固有菌群的一部分,经常从上呼吸道标本中分离出该菌,也可从胃肠道或泌尿生殖道标本中分离到,通常不致病,只形成带菌状态。当机体免疫力下降或粘膜表面破损时,此菌进入周围组织引起感染。腐蚀艾肯菌可引起人类的多种感染
3、,如软组织脓肿、中耳炎、鼻窦炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎、败血性关节炎及术后感染等,但该菌常与其他细菌一起引起混合感染,此类感染常发生在头颈部或腹部。在人咬伤感染标本中经常分离到此菌。2.镜下形态取菌落涂片,革兰染色后镜下见到无芽孢的革兰阴性多形态小杆菌。3.生化特性触酶试验阴性,氧化酶试验阳性,靛基质及尿素酶试验阴性,硝酸盐还原试验阳性,鸟氨酸脱羧酶阳性,葡萄糖O-F阴性。4.培养特性腐蚀艾肯菌是兼性厌氧菌,对营养要求较高,初代分离需要氯化血红素,在含3%~10%CO2的环境中生长良好。腐蚀艾肯菌不能在MH、HTM、营养琼脂及中国兰琼脂平板上生长。有文献报道,再添加了5mg/
4、L克林霉素(或5mg/L氯洁霉素)的选择性培养基上可显著提高腐蚀艾肯菌的分离率,但要注意应与常规培养基一起使用,以免将其他致病菌丢失。5.菌落特征在5%羊血琼脂平板上经24h培养后,可形成针尖大小的菌落。培养48h该菌是没有形态特点的(形成光滑、湿润、圆形、半透明的小菌落),不易与其它细菌相区别。经过72h以上培养后方呈现出该菌的典型菌落形态特征来,即较干燥、扁平、中心凸起、有扩散生长边缘的菌落。典型形态一:经96h培养后,在5%羊血琼脂平板上呈干燥、扁平、圆形、透明、中间突起、边缘呈扩散生长、直径2~4mm的斗笠样菌落。典型形态二:经96h培养后,在5%羊血琼脂平板上呈扁平
5、、圆形、表面粗燥、半透明、中央凸起、边缘呈扩散生长、直径2~4mm的草帽样菌落。典型形态三:经96h培养后,在5%羊血琼脂平板上呈光滑、圆形、半透明、中央突起、直径1~3mm的菌落。形态四:经96h培养后,在5%羊血琼脂平板上呈光滑、圆形、半透明、淡黄色、直径2~3mm的菌落。培养时间较长时菌落周围培养基可呈草绿色,用棉签抹取菌苔可见黄色。该菌的纯培养物有一种类似发霉的口腔菌群的特殊气味。以上特点应在实际操做中加以注意。6.耐药性腐蚀艾肯菌对克林霉素天然耐药,但对其他如青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类、喹诺酮类、四环素类、氨基糖甙类、大环内酯类、氯霉素类、复方磺胺等抗生素多呈
6、高度敏感。菌株A1655对庆大霉素、红霉素、克拉霉素耐药,提示临床医生应更具临床微生物实验的药敏实验报告进行用药,经验用药可能导致治疗失败。谢谢
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