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时间：2020-11-14
《根瘤菌的分离与鉴定电子教案.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、根瘤菌的分离与鉴定采集农大豆2号保豆3号保存每个单株植物的根瘤收集在一个卫生纸包中，每个采集点的多个植株放在一个装有硅胶的自封袋中。分离及纯化用无菌水浸泡干燥根瘤菌直至其复原。2.用95%的酒精浸泡3~5分钟，用5%的NaClO3浸泡1分钟，用无菌水清洗5~7次（换水）。（在超净台上操作，并且在酒精灯附近，防止染菌）分离及纯化(1)根瘤浸泡(2)根瘤消毒分离及纯化3.用牙签（灭菌时尖头朝上，平头朝下）的平头端在灭菌的玻璃平皿上将根瘤刺破（必要时可以滴加一滴无菌水）。用灭菌接种环蘸取菌液在YMA固体培养基上划线
2、。用灭菌接种环蘸取同种菌液，在载玻片上进行革兰氏染色，镜检。分离及纯化消毒刺破划线分离及纯化4.待平板出现菌落后，观察，选取目的菌落再次划线纯化，镜检。5.纯化后的菌划线在试管斜面培养基上，供保菌。分离及纯化挑菌，摇菌稀释1万倍稀释2万倍稀释100万倍保菌使用YMA液体+20%甘油，吹打斜面上的菌，吸取保存。使用YMA液体+20%甘油，吸取摇好的单个菌斑菌液。提取基因组DNA260/280:1.97260/230:2.02浓度：570ng/μl鉴定16SrDNA序列测定：方法同书。其中：dNTP：2.5mm引
3、物：10μm测序后，在NCBIblast中进行比对，一般情况下，相似性能达到99%左右。此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！ 感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢
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